RANGKUMAN FITOKIMIA

Materi 1 – Ekstraksi

Jenis Ekstraksi Definisi Prinsip Jenis Alat Penggunaan

Ekstraksi merupakan proses pemisahan senyawa dari matriks atau simplisia dengan menggunakan pelarut yang sesuai. Peran ekstraksi dalam analisis fitokimia
sangat penting karena sejak tahap awal hingga akhir menggunakan proses ekstraksi, termasuk fraksinasi dan pemurnian.
Ekstraksi Cara Dingin
1. Pengocokan Metode ini merupakan merupakan Pengocokan dilakukan agar cepat mendapat Kocok Manual: Corong pisah Ekstraksi I2 dengan pelarut
turunan dari ekstraksi cair-cair, kesetimbangan antara bahan yang diekstraksi Kocok otomatis: etanol air
dengan meletakkan sampel padat dalam bagian sebelah dalam sel dengan yang Rotary Shaker
dalam wadah bersama pelarut masuk ke dalam cairan. Biasanya u/ minyak atsiri
organik, lalu dikocok. Kemudian, Senyawa polar ada di pelarut polar, senyawa
ekstrak dipisahkan dari matriks nonpolar di pelarut sesuai
sampel melalui sentrifugasi atau
filtrasi.
2. Maserasi Sediaan cair yang dibuat dengan cara Prinsip pemisahan didasarkan pada kemampuan Bejana maserasi + Tingtur Arnica dibuat dengan
mengekstraksi bahan nabati yaitu atau daya larut analit dalam pelarut tertentu. tutup+ pengaduk memaserasi 10 bagian bunga
direndam menggunakan pelarut Maka dari itu, pelarut yang digunakan harus mekanik Arnica dengan 100 bagian
bukan air/ pelarut non polar atau mampu menarik komponen analit dari sampel etanol encer. Tingtur
setengah air, misalnya etanol encer secara maksimal. selanjutnya disaring, berat
selama periode waktu tertentu pada Direndam → isi sel keluar (karena perbedaan jenisnya 0,892-
T kamar + pengadukan sesuai dengan konsentrasi dalam & luar) → lar kons tinggi 0,902.
aturan dalam buku resmi kefarmasian. terdesak keluar Biasanya u/ oleoresin
Perendaman dilakukan untuk
melunakkan dinding sel → mudah
lepas seny. kimia
 3. Perkolasi ekstraksi dengan pelarut yang selalu
baru sampai sempurna dimana
pelarut dialirkan perlahan melewati
simplisia yang umumnya dilakukan
pada temperatur ruangan.
Pengaliran meningkatkan difusi ZA
Menstruum: solvent u/ ekstraksi
Ekstraksi Cara Panas
1. Refluks ekstraksi dengan pelarut pada T titik
didihnya, selama waktu tertentu dan
jumlah pelarut terbatas yang relatif
konstan dengan adanya pendinginan
balik
bawah melalui serbuk tersebut, cairan penyari Perkolator bentuk: ekstraksi oleoresin dengan
akan melarutkan zat aktif sel-sel yang dilalui • Tabung: Pembuatan cara perkolasi selama tiga jam
sampai mencapai keadaan jenuh simplisia. ekstrak
• Gerak ke bawah disebabkan oleh kekuatan Cair
gaya beratnya sendiri dan cairan di atasnya • Corong: Pembuatan
dikurangi dengan gaya kapiler yang ekstrak atau tintur
dengan kadar tinggi
cenderung untuk
menahan. • Paruh: Pembuatan
Keuntungan: tidak terjadi kejenuhan pelarut ekstrak atau tintur
karena pelarut selalu baru dengan kadar rendah
• Simplisianya di rendam dalam pelarut pada • Magnetic stir bar Ekstraksi kulit buah manggis
wadah sama • Hotplate • Kandugan yang diekstrak :
• pelarut volatil yang digunakan akan menguap • Sumber arus listrik senyawa fenolik (xanthon)
pada suhu tinggi, namun akan didinginkan • Heating mantle • Pelarut : etanol Perbandingan
dengan kondensor sehingga pelarut yang • Labu alas bulat serbuk kulit manggis & etanol =
tadinya dalam bentuk uap akan mengembun • Reflux condenser 1:8 s.d. 1:12
pada kondensor dan turun lagi sebagai • Two rubber tubings • Suhu esktraksi : 60°C
KONDENSAT ke dalam wadah reaksi sehingga • Klem dan statif • Selama 60 menit
pelarut akan tetap ada selama reaksi • Termometer u/ senyawa termostabil
berlangsung • Sand bath
• Untuk mendapatkan hasil ekstraksi yang Boiling chip
sempurna, biasanya dilakukan pengulangan
proses pada residu pertama sebanyak 3-5
kali
• Pemanasan suhu tinggi tanpa ada zat yang
dilepaskan, EKSTRAKNYA
ADA DI PELARUTNYA
2. Sokhlet Soxhlet adalah metode ekstraksi
panas yang menggunakan pelarut
yang selalu baru, yang umumnya
dilakukan dengan alat khusus
sehingga terjadi ekstraksi kontinu
dengan jumlah pelarut yang relatif
konstan dengan adanya pendingin
balik (Depkes RI, 2000)
Biasanya digunakan untuk
memisahkan zat yang memiliki
kelarutan terbatas dan pengotornya
tidak larut dalam pelarut tersebut.
3. Infusa Infusa adalah proses penyarian yang
umumnya digunakan untuk menyari
zat kandungan aktif yang larut
dalam air dari bahan bahan nabati.
sarinya yang tidak stabil dan
mudah tercemar oleh kuman dan
kapang. → tidak boleh disimpan>24
jam.
Menurut FI IV, infusa adalah
sediaan cair yang dibuat dengan
mengekstraksi nabati dengan api
pada suhu 90oC selama 15 menit
Simplisia & pelarut terletak pada wadah berbeda 1. Stirrer bar Ektraksi Minyak Biji Kapuk
Wadah simplisia: Thimble 2. Still pot Dengan Metode Ekstraksi
Wadah pelarut : Round bottom flask 3. Distillation Soxhlet
Uap pelarut akan berpenetrasi ke jaringan simplisia 4. Thimble
dan kemudian terkondensasi Syarat pelarut: 5. Solid u/ zat dengan kelarutan
• Pelarut yang mudah menguap, seperti: 6. Siphon top terbatas dan pengotornya
heksan, eter, petroleum eter, metil klorida 7. Siphon exit tidak larut dalam pelarut
dan alkohol. 8. Expansion adapter
• TD pelarut rendah. 9. Condensor
• Kepolaran sesuai simplisia yang 10. Cooling water in
diekstraksi. 11. Cooling water out
Syarat sampel
Sampel jumlah sedikit
• Ekstrasi dengan pelarut air pada temperature penangas air yang terdiri dari • Infusa daun sena dan infusa
penangas air (bejana infus tercelup dalam panci dan air yang berada simplisia yang mengandung
penangas air mendidih, temperature terukur 90- dalam penangas. minyak atsiri harus diserkai
98oC) selama waktu tertentu (15-20 menit). setelah dingin.
• Rasio berat bahan dan air adalah 1 : 10, • Infusa kulit kina biasanya
• Infusa diserkai melalui kain flanel selagi panas → ditambah dengan asam
+ air panas secukupnya melalui ampas hingga sitrat sepersepuluh dari
diperoleh volume infus yang dikehendaki. bobot simplisia.
• Hasil infundasi umumnya diserkai dalam keadaan u/ daun, bunga, batang lunak,
panas, tetapi untuk bahan yang mengandung kulit buah
minyak atsiri, diserkai dalam keadaan dingin.
4. Dekokta Dekokta istilah aslinya adalah
dekoktum (bahasa Latin) : adalah
sediaan cair yang dibuat dengan cara
mengekstraksi bahan nabati dengan
pelarut air (pelarut berair/polar) pada
suhu 90° C selama 30 menit, terhitung
setelah panci bagian bawah mulai
mendidih
5. Digesti Maserasi kinetik (dengan
pengadukan kontinu) pada T kamar,
yaitu secara umum dilakukan pada
temperature 40-50℃ (Depkes
RI,2000)
Dilakukan untuk simplisia yang zat
aktifnya tahan terhadap pemanasan.
Menyerupai infusa: Keduanya direndam dalam 1. Pemanas air
air(panas) 2. Panci Tim = 1 unit yang
Proses melalui pemanasan dengan cara direbus terdiri atas 2 panci
pada perbandingan volume tertentu selama bertumpuk. Panci atas
waktu tertentu berisi air (atau pelarut
• Perbandingan komponen dan air 1 : 4 atau 1 : polar lain) dan simplisia.
6 Panci bawah berisi air.
• Waktu lebih lama dari infusa Metode 3. Panci bawah sebagai
cocok untuk pemanas panci atas
• Komponen stabil dalam panas sehingga panci atas tidak
• Tujuan: ekstraksi garam mineral & bitter langsung berhubungan
principle simplisia dengan api (Prinsip
penangas air)
(ini gue ngasal karena nggak ada, wkwk) Pemanasan Alatnya nggak dikasih nama
dan pengadukan kontinu menyebabkan daya pelarut digestor kali yak namanya
melarutkan sari meningkat (inget farfis, karena Tapi kalo gue search,
pelarutnya tidak kental jadi mudah membasahi
ada yang pake labu
simplisianya, sama yang pengadukan akan
bersumbat + batang
mempertipis membran imajiner disolusi yang jenuh)
pengaduk + hotplate, tapi
bisa juga pake
4. waterbath
• Bunga Amica 4 bagian
Daun Digitalis 0,5 bagian
• Kulit Akar Ipeka 0,5 bagian
• Kulit Kina 6 bagian
• Daun Kumis kucing 0,5 bagian
• Akar Senega 4 bagian
Keterangan : bagian simplisia
terhadap 100 bagian dekok.
Umumnya 10 bagian simplisia
terhadap 100 bagian dekok (10%
ekstrak)
• u/ bahan keras (batang kayu,
akar, biji) Hasil: Komponen
yang lebih larut minyak
• Ekstraksi oleoresin jahe
merah (Zingiber officinale
var rubrum)
6. Destilasi Destilasi atau penyulingan adalah
suatu metode pemisahan bahan
kimia berdasarkan perbedaan
kecepatan atau kemudahan
menguap (volatilitas) bahan.
Biasanya digunakan untuk
memisahkan cairan. Misalnya: minyak
atsiri.
Destilasi Air
Destilasi Uap
Uap: simplisia & pelarut tidak pada
wadah yang sama. Uap dari
simplisia yang dialirkan panas
pelarut
“Tidak ada satupun cairan yang mempunyai titik • Minyak atsiri dari bunga
didih persis sama. Oleh karena itu sangatlah mawar menggunakan metode
mungkin untuk memisahkan suatu campuran distilasi uap.
dua/lebih cairan dengan menaikkan suhu • Minyak atsiri dari jahe
campuran cairan sampai pada suatu titik dimana • menggunakan metode
cairan yang mempunyai titik didih lebih rendah (I) distilasi air.
mendidih dan kemudian menguap, sementara cairan
yang titik didihnya lebih tinggi tetap sebagai cairan.
Suhu akan konstan hingga cairan I lengkap
terdestilasi. Dengan mengkondensasi uap yang
dihasilkan pada suhu konstan tersebut dan
menampungnya dalam masing-masing wadah
diperoleh cairan yang relatif murni”.
• bahan sepenuhnya direndam dalam air, yang Alatnya kayak destilasi • untuk bahan termostabil
direbus dengan menerapkan panas langsung. sederhana sama fraksinasi
Uap dari simplisia + pelarut
Prinsipnya, mengendalikan suhu air
• relatif lebih singkat, kualitas lebih baik daripada Kayak destilasi sederhana, • untuk senyawa dengan TD
menggunakan distilasi air. bedanya kayak ada 2 tinggi (> 200 C) → kandungan
• Panasnya tidak langsung wadah, 1 buat panasin air, 1 yang menguap akan
• Simplisia hanya dilewatkan uap air, tidak berada buat simplisia + air trus terdestilasi
dalam wadah sama dg pelarut mereka terhubung
 Destilasi Vakum • Titik didih senyawa-senyawa tersebut akan turun Pompa vakum, tabung • Untuk senyawa cair dengan
bila tekanan disekitarnya diperkecil. distilasi, manometer, titik didih tinggi
• Caranya, tekanan di dalam labu diturunkan heater, sama aja selebihnya • Untuk senyawa cair yang larut
dengan jalan memompa udara ke dalam labu, atau mudah tercampur
sehingga perlu alat manometer dengan air.
• Penurunan tekanan juga menghindari
penguraian senyawa pada suhu tinggi.

Ekstraksi Modern
Jenis Ekstraksi Definisi Prinsip Jenis Alat Penggunaan
MAE Ektraksi yang memanfaatkan radiasi Radiasi gelombang micro → tekanan pada dinding • Microwave oven • u/ minyak atsiri
(Microwave Assisted gelombang mikro untuk percepat sel meningkat akibat pelarut menguap → matriks • Pengatur waktu & daya (kadar minyak lebih banyak
Extraction) ekstraksi mll pemanasan pelarut pecah → senyawa diperoleh dibanding metode
• Ekstraktor
• Indikator suhu konvensional)
Radiasi microwave dimulai sebelum
ekstraksi u/ panaskan pelarut sesuai Perlu diperhatikan!! • Kondensor Cth: minyak jahe
ketentuan 1. Waktu (1 jam) (zingiberene)
2. Daya (100 Watt)
3. Pelarut : bahan (8:1)
4. Putaran optic (indicator kemurnian senyawa)
SFE Ekstraksi dengan menggunakan cairan Supercitical fluid → zat pada kondisi T & P > titik • Cosolvent & CO2 pump: • Ekstraksi dari tanaman :
(Supercritical Fluid superkritis sbg pelarut kritis, sifatnya diantara gas-cair alirkan & atur tekanan diterpene (antioksidan),
Extraction) Cth: CO2 triterpene (fitosterol), dan
solvent & CO2
Syarat pelarut: punya daya solvasi → 1. Difusi mll padatan (spt gas), larutkan senyawa
• Cooler: serap panas tetraterpene (karoten).
Alasan dipilih CO2: perubahan gas-cair-gas (kemampuan (spt cairan)
u/ larutkan senyawa tanaman) 2. Pengganti pelarut organik • Heater: atur panas yang • Pembuatan serbuk halus.
1. Tidak tinggalkan • Dekafeinasi kopi.
3. Daya solvasi dapat diatur dg ubah T, P dibutuhkan oleh
residu beracun Densitas: u/ nilai kemampuan solvent
2. Tekanan kritis campuran cosolvent dan
u/ masuk ke pori matix & mudah keluar Penggunaan CO2: Sifat cairan
(73,8 barr) lebih lagi CO2 agar menjadi cairan
Bentuk gas harus dikondisikan dulu jd cairan → Superkritis:
mudah didapatkan super kritis, agar tidak
sampel terekstraksi → CO2 kembali jadi gas • Memiliki sifat gabungan
dibanding etanol Rendemen: perbandingan jumlah terjadi pendinginan
(243,3 barr) ekstrak yang diperoleh dengan jumlah GAS → CAIR → GAS antara cairan dan gas
berlebih • Menghasilkan reaksi yang
3. Hanya butuh suhu total simplisia (jumlah minyak hasil
• Separator: pemisahan sulit dicapai dengan pelarut
rendah (31 C) ekstraksi)
CO2 dari ekstrak o/ konvensional
untuk sampai
gravitasi • Senyawa terfluorinasi lebih
tekanan kritis
4. Tidak mudah • Cosolvent reservoir: mudah larut
terbakar tamping cairan CO2 • Kelarutan meningkat
5. Tidak Konsentrasi gas terlarut lebih
korosif/reaktif tinggi
6. Murah (selain air)

UAE Ekstraksi dengan bantuan gelombang
(Ultrasonic Assisted ultrasonic frekuensi 20-2000 kHz →
Extraction) tingkatkan permeabilitas sel →
dinding sel dari bahan dipecah dengan
getaran ultrasonik yang menyebabkan
kandungan yang ada di dalamnya
dapat keluar dengan mudah
1. Mechanical effect: gesekan pelarut + sampel → • • Sampel padat (nonvolatil/
zat ditarik o/ pelarut semivolatil) dan pakai pelarut
2. Cavitation effect: dinding sel dipecah o/ polar
ultrasonic → ZA keluar dg mudah
3. Thermal effect: suhu naik → ZA cepat keluar
Semakin tinggi amplitudo & semakin lama eksitasi,
sebabkan:
1. Rendemen makin besar
 Mekanisme kompresi ekspansi (Tarik
molekul pelarut u/ gerak menjauh)
Ekstraksi ultrasonic → ganggan
dinding sel/membran akibat serap
energi → penetrasi pelarut baik →
tingkatkan laju pindah
masa&senyawa dari sel ke pelarut
ASE Ekstraksi dengan T tinggi (40-200 C)
(Acclerated Solvent pada P ttt (1500 psi/100-200 barr),
Extraction) pakai 15-45 mL pelarut selama 12-20
menit → tingkatkan efisiensi &
kecepatan ekstraksi
T, P tinggi → tingkatkan penetrasi
pelarut ke material
CCE Ekstraksi dimana kedua zat yang
(Counter Current tidak dapat bercampur bergerak
Extraction) dengan arah berlawanan dalam suatu
/Ekstraksi Craig
kontak berkesinambungan satu sama
lain → zat terlarut dapat terpisah
2. Energi Ultrasonik ++
3. Aktivitas oksidan berkurang
T yng lebih tinggi dari metode ekstraksi lain & butuh P • ASE 100: single cell (10- • u/ ampel solid/semisolid
tinggi (u/ pertahankan pelarut dalam wujud cair 100 mL), sampel sedikit
walau T tinggi)
• ASE 200: rak 24 cell
(ekstraksi sampel sd 30g)
• ASE 300: 12 cell (34-100
mL), sampel >30 gram
• Fase cair dialirkan berlawanan dg larutan berisi zat • Apparatus Craig • u/ senyawa dg koef distribusi
ekstraksi berbeda
• Berdasarkan perbedaan koef distribusi
• Dilakukan pada T kamar → lindungi komponen
termolabil
• Fase gerak berada di atas fase diam → dikocok →
fase gerak berpindah kolom
• Fase gerak (etanol): isi sampel
• Fase diam (heksan): hanya ambil senyawa dg
polaritas sama
EAE Metode ekstraksi non • Enzim katalis hidrolisis polisakarida cell wall → ganggu kompleks dinding sel → ZA keluar
(Enzyme Assisted konvensional untuk mengekstrak • u/ senyawa fenol, oil, protein dan peptida, flavonoid
Extraction) 1. Enzyme-assisted aqueous extraction: ekstraksi minyak dari biji
suatu senyawa aktif dengan
2. Enzyme-assisted cold-pressing: hidrolisis dinding sel (tidak terdapat koloid polisakarida-protein)
bantuan enzim secara selektif
Enzim: selulase,
pectinase,
hemiselulase, Faktor:
viscoenzyme 1. Jenis enzim
2. Konsentrasi enzim
3. Ukuran partikel bahan
tanaman
4. Rasio padat terhadap air
5. Waktu hidrolisis
6. Suhu dan pH
TRITERPENOID GLIKOSIDA

• Klasifikasi berdasarkan unit isoprene, tidak berwarna & larut air Terhidrolisis → glikon + aglikon

Kedde Reagen (+) Warna ungu Borntrager (H2SO4+benzene+amonia e) (+) merah muda ada antrakuinon

(Asam dinitrobenzoat + MeOH + KOH) Bromine water test (+) endapan kuning

Baljet Reagen (+) Orange Saponin

(Asam picric + NaOH + etil alc) Hemolisis (darah +saponon) (+) sel darah merah pecah
ALKALOID: senyawa organik basa (ada N), rasa pahit Foam test (air + saponin → kocok) (+) buih → saponin

Dragendorff (+) endapan merah jingga Glikosida Jantung

(KI+aq+Bismut subnitrat + asetat glasial)
Mayer (Merkuri Cl + NaI + aq) (+) endapan putih/kuning
metanol pekat
Wagner (I2 + KI + aq) (+) endapan coklat
FLAVONOID: 2 cincin benzene dipisahkan propane, aromatic terkonjugasi, warna berubah
jika + basa/amonia
+ asetat basa Flavon/flavonol (+) kuning-merah
Antosianin (+) merah biru)
Kalkon (+) merah/lembayung
Uji Shinoda (etanol+Mg/Zn+HCl) (+) orange
Asam borat + Na asetat (+) kuning intensif
Uji FeCl3 (direbus aq + FeCl3) (+)hijau-biru/ungu ada OH fenolik
Keller-kiliani (asetat glas + FeCl3+H2SO4) (+) coklat → hijau-biru ada
glikosida jantung
dalam
Legal’s test (Na nitroprusid+piridin+ (+) merah muda/merah darah
NaOH) ada glikosida jantung
Baljet test (celup ke Na pikrat) (+) kuning/oren glikosida jantung
3,5-dinitrobenzoat (+NaOH + dinitro) (+) merah muda
Kumarin
FeCl3 test (+) hijau → (+) HNO3 kuning
Fluorescece (+ NaOH) (+) fluoresensi biru-hijau
Sianofor
Soium picrate (Na pikrat+Na karbonat) (+) kuning → merah bata
TANIN: Reaksi Spiro (H2O2+ FeSO4) (+) hijau, + NH4OH ungu

Goldbeater skin (lembaran tipis dr usus (+) coklat/hitam ada tannin Reaksi Almen (+ reagen Millon) (+) merah violet
sapi) rendam dalam asam hidroklorik +
Pseudotanin tidak warna/- FENOL POLIVALEN
Fe sulfat

Phenazone test (as. Na fosfat + (+) tannin endapan warna Asam Oksalat (+) pirogalol abu2
phenazone) (+) floroglusin merah
Gelatin test (gelatin + NaCl) (+) endapan putih (karena tannin (+) pirokatekol merah rose
mengendapkan protein, gelatina/ protein)
(+) resorsin kuning coklat
Matchstick u/ lignin (korek api Katekin dalam asam hasilkan floroglusinol
mengandung lignin) korek api celup ke → (+) merah muda/merah) Fehling (reagen fehling + NaOH) (+) endapan merah bata
tannin, keringkan, basahkan dg HCl Ag-Amonia (+) cermin perak (resorsinol)
Chlorogenic acid test (+amonia) (+) hijau (+) hitam (hidrokuinon)
VAnilin hydrochloric acid test (+) merah muda/merah floroglusinol Aq brom (+) endapan putih non larut
FeCl3 (+) coklat-hijau/biru hitam Folin Ciocalteu (+) biru
Lead acetate test (+ Pb asetat) (+) endapan kuning

ANTRAKUINON: medium alkali → ion fenolat

Borntrager test (ChCl3 + amonia) (+) kuning → merah

IR Rentang 1630 – 1700 cm-1

FENOL:

Reaksi Indofenol (anilin+NaOCl+NaOH) (+) merah

Landolt (aq brom) (+) endapan putih, kalo warna lin

polifenol