LAPORAN AKHIR PRAKTIKUM

PENGANTAR BIOTEKNOLOGI PERTANIAN

FAHIRA ANGGRAINI

NIM. 1906112489

AGROTEKNOLOGI A

ASISTEN PRAKTIKUM :

1. AULANNISA

2. IFATHUL JANNAH

JURUSAN AGROTEKNOLOGI

FAKULTAS PERTANIAN UNIVERSITAS RIAU

PEKANBARU

2021
 DAFTAR ISI

DAFTAR ISI..........................................................................................................ii
DAFTAR TABEL.................................................................................................iv
DAFTAR GAMBAR..............................................................................................v
I. PENDAHULUAN UMUM.................................................................................1
1.1 Latar Belakang...............................................................................................1
1.1.1 Bioteknologi Secara Umum........................................................................1
1.2 Tujuan Praktikum...........................................................................................3
a. Pembuatan Kompos...................................................................................3
b. Pengenalan Alat Laboratorium..................................................................3
c. Pembuatan Larutan Stok dan Media.........................................................3
d. Penanaman dan Sterilisasi.........................................................................4
e. Pengamatan, Subkultur dan Aklimatisasi..................................................4
II. KAJIAN PUSTAKA.........................................................................................5
2.1 Pembuatan Kompos........................................................................................5
2.1.1 Pengertian Kompos..................................................................................5
2.1.2 Syarat – Syarat Pembuatan Kompos........................................................7
2.2 Media MS (Murashige Skoog).......................................................................8
2.2.1 Pengertian Media MS..............................................................................8
2.2.2 Faktor Penting Pembuatan Larutan Stok...............................................10
2.4 Sterilisasi dan Penanaman............................................................................11
2.4.1 Pengertian Sterilisasi.............................................................................11
2.4.2 Faktor Terpenting Dalam Sterilisasi Eksplan........................................12
2.5 Subkultur dan Aklimatisasi..........................................................................13
2.5.1 Pengertian Subkultur.............................................................................13
2.5.2 Faktor Penghambat Tumbuhnya Subkultur...........................................15
2.5.3 Pengertian Aklimatisasi.........................................................................15
III. METEDOLOGI.............................................................................................19
3.1 Tempat dan Waktu.......................................................................................19
3.2 Bahan dan Alat.............................................................................................19
3.2.1 Pembuatan Kompos...............................................................................19
3.2.2 Pengenalan Alat.....................................................................................19
3.2.3 Pembuatan Larutan dan Stok dan Media...............................................19
3.2.4 Sterilisasi dan Penanaman.....................................................................19
3.3 Cara Keja......................................................................................................20
3.3.1 Pembuatan Kompos...............................................................................20
3.3.2 Pengenalan Alat.....................................................................................20
3.3.3 Pembuatan Larutan dan Stok dan Media...............................................20
3.3.4 Sterilisasi dan Penanaman.....................................................................21
3.3.5 Pengamatan, Subkultur, dan Aklimatisasi.............................................22
IV. PEMBAHASAN.............................................................................................23
4.1 Pembuatan Kompos......................................................................................23
4.2. Pengenalan Alat Laboratorium....................................................................25
4.3 Pembuatan Larutan Stok dan Media MS......................................................34
4.4 Sterilisasi dan Penanaman............................................................................36
4.5 Pengamatan, Subkultur dan aklimatisasi.....................................................38
V. KESIMPULAN................................................................................................41
5.1. Pembutan Kompos......................................................................................41
5.2. Pengenalan Alat Laboratorium....................................................................41
5.3. Pembuatan Larutan Stok dan Media MS.....................................................41
5.4. Sterilisasi dan Penanaman...........................................................................42
5.5. Pengamatan, Subkultur, dan Aklimatisasi...................................................42
DAFTAR PUSTAKA...........................................................................................44
 DAFTAR TABEL
Tabel 1. Sumber bahan organik yang umum dimanfaatkan.....................................6
Tabel 2. Komposisi Media MS (Murashige Skoog)................................................9
 DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Penerapan Bioteknologi Secara Umum.................................................1
Gambar 2. Kompos..................................................................................................5
Gambar 3. Media MS...............................................................................................8
Gambar 4. Sterilisasi Alat......................................................................................11
Gambar 5. Sterilisasi Eksplan................................................................................13
Gambar 6. SubKultur.............................................................................................14
Gambar 7. Aklimatisasi..........................................................................................15
Gambar 8. Pipet Tetes............................................................................................26
Gambar 9. Gelas Beaker........................................................................................26
Gambar 10. Cawan Petri........................................................................................26
Gambar 11. Scalpel................................................................................................27
Gambar 12. Spatula................................................................................................27
Gambar 13. Pinset..................................................................................................27
Gambar 14. LAFC..................................................................................................28
Gambar 15. Autoklaf..............................................................................................29
Gambar 16. Botol Kultur.......................................................................................29
Gambar 17. Magnetic Stirer...................................................................................30
Gambar 18. pH Meter Digital................................................................................30
Gambar 19. Bunsen................................................................................................31
Gambar 20. Neraca Analitik..................................................................................31
Gambar 21. Labu Ukur..........................................................................................32
Gambar 22. Erlenmeyer.........................................................................................32
Gambar 23. Rak Kultur..........................................................................................32
Gambar 24. Gelas Ukur.........................................................................................33
Gambar 25. Mortal.................................................................................................33
Gambar 26. Batang Pengaduk................................................................................33
 I. PENDAHULUAN UMUM

1.1 Latar Belakang

1.1.1 Bioteknologi Secara Umum

Gambar 1. Penerapan Bioteknologi Secara Umum

Secara definisi, istilah bioteknologi mempunyai pengertian penerapan

prinsip – prinsip biologi,biokimia,dan rekayasa dalam pengolahan bahan dengan
memanfaatkan agensia jasad hidup dan komponen – komponennya untuk
mengahsilkan barang dan jasa. Dalam pengertian ini mengandung makn abahwa
semua produk atau jasa yang berasal dari jasad hidup atau komponennya dan yang
dihasilkan dan penerapan teknik biologi,biokimia,dan rekayasa adalah produk
atau jasa bioteknologi. Oleh karena itu, jika dituntut dari sejarah perkembangan
ilmu dan teknologi, maka produk – produk jasad hidup yang telah dikembangkan
manusia sejak ratusan atau bahkan ribuan tahun silam, dapat dikategorikan
sebagai produk bioteknologi. Sebagai contoh, produk minuman hasil fermentasi,
wine, bir, yogurt,kefiratauproduk makanan seperti misalnya tempe,oncom,tape
dan lain – lain adalah produk yang dihasilkan dari pemanfaatan agensia jasad
hidup.
 Bioteknologi selalu berkaitan dengan reaksi – rekasi biologis yang
dilakukan oleh jasad hidup sebagai suatu individu atau komponen – komponennya
yang dapat berupa organel, sel atau jaringan, atau bahkan molekul – molekul
tertentu, misalnya DNA, RNA, protem atau enzim. Secara umum, bioteknologi
dapat diklasifikasikan menjadi dua level yaitu bioteknologi konvensional dan
bioteknologi modern. Dalam bioteknolohi konvensional, penerapan teknik –
teknik biologi, biokimia atau rekayasa masih sangat terbatas sehingga belum
mencapai aras rekayasa molekular yang terarah.

Dalam perkembangannya, bioteknologi telah mencapai aras (level)

rekayasa yang jauh lebih terarah sehingga hasilnya dapat lebih, atau bahkan
sepenuhnya, dikendalikan. Sebagai contoh, sekarang telah dimungkinkan untuk
melakukan memanipulasi genetik pada jasad secara sangat terarah sehingga hasil
memanipulasi semacam ini mulai berkembang ketika para ilmuwan berhasil
melakukan teknik manipulasi bahan genetik (DNA) secara in vitro. Dengan
teknik yang dikenal sebagai DNA rekombiann, atau rekayasa genetik, para
ilmuwan dapat menyambung molekul – molekul DNA yang berasal dari jasad
yang berbeda menjadi suatu molekul DNA rekombinan. Perkembangan teknik
biologi molekular semacam ini akhirnya menumbuhkan madzhab bioteknologi
yang berlandaskan pada teknik biologi molekular. Meskipun demikian, teknik
biologi molekular yang dimaksudkan bukan semata – mata teknik yang
didasarkan atas rekayasa bahan genetik, melainkan juga teknik – teknik molekular
yang lain, misalnya antibodi monoklonal. Selain itu, bioteknologi modern juga
tidak hanya berhenti pada aras manipulasi jasad di laboratorium, tetapi juga
mencakup proses hilir manipulasi, misalnya teknologi fermentasi, teknologi
isolasi dan purifikasi enzim.

Meskipun bioteknologi mencakup aspek pemanfaatan jasad hidup dan

komponen – komponennya, namun tidak semua metode atau kegiatan yang
melibatkan jasad hidup dapat dikategorikan sebagai bioteknologi. Suatu metode
pemuliaan tanaman dapat diklasifikasikan sebagai bioteknologi jika mencakup
penggunaan teknik rekayasa molekular. Oleh karena itu, praktek pertanian sendiri
tidak dapat sepenuhnya dikategorikan sebagai bioteknologi. Apa yang terjadi
sekarang adalah pengembangan dan penerapan prinsip – prinsip bioteknologi
modern untuk digunakan di dalam praktek pertanian. Dengan demikian
bioteknologi pertanian lebih merupakan teknik atau metode perekayasaan yang
diintroduksikan ke dalam praktek pertanian. Teknik lain yang juga tidak masuk
dalam kategori bioteknologi adalah teknik kloning embrio. Teknik semacam ini
biasanya dikategorikan sebagai rekayasa hayati (bioengineering). Selain itu ada
istilah lain yang berebda dari pengertian bioteknologi yaitu bioteknik
(biotechnique) yaitu suatu teknik untuk menghasilkan alat – alat untuk keperluan
biologis, misalnya teknik untuk membuat mesin pompa jantung.

Perkembangan ilmu dan teknologi akhir – akhir ini menunjukkan bahwa

batasan – batasan semacam ini semakintipis karena ada proses interaksi yang
intensif antara suatu teknologi dengan teknologi yang lain. Selain itu, apa yang
hari ini dianggap sebagai teknik modern, mungkin akan segera menjadi teknik
konvensional jika ditemukan teknik – teknik baru yang lebih maju.

1.2 Tujuan Praktikum

a. Pembuatan Kompos

Tujuan dari praktikum ini adalah mengetahui salah satu metode

pemanfaatan bioteknologi tradisional yaitu pembuatan biofertilizer dan
biodecomposer memanfaatkan limbah pertanian dan rumah tangga.

b. Pengenalan Alat Laboratorium

Tujuan dari praktikum pengenalan alat-alat laboratorium yaitu praktikan

dihrapkan dapat mengerti, memahami, dan mengetauhi alat-alat laboratorium
dan cara penggunaan alat-alat laboratorium tersebut.

c. Pembuatan Larutan Stok dan Media

Tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengetahui komposisi hara ada
larutan Murashige dan Skoog (MS) dan mengetahui tahapan pembuatan
larutan stok media MS.
d. Penanaman dan Sterilisasi

Praktikum ini bertujuan untuk mengetahui prosedur pembuatan media

aseptik yang tepat untuk digunakan sebagai media perbanyakan tanaman
dengan kultur jaringan, kultur anther dan media embrio rescue.

e. Pengamatan, Subkultur dan Aklimatisasi

Tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengetahui teknik perbanyakan

pada tanaman secara in vitro. Mengatauhi bagaimana perbanyakan tanaman
secara subkultur dan mengetauhi aklimatisasi dan tahapan-tahahapannya.
 II. KAJIAN PUSTAKA

2.1 Pembuatan Kompos

2.1.1 Pengertian Kompos

Kompos adalah bahan – bahan organik yang telah mengalami proses
pelapukan karena adanya interaksi antara mikroorganisme (bakteri pembusuk)
yang bekerja didalamnya. Kompos di alam terbuka bisa terjadi dengan sendirinya
lewat proses alamiah, namun proses tersebut berlangsung lama sekali dapat
mencapai bertahun – tahun. Kebutuhan akan tanah subur padahal sudah semakin
mendesak, oleh karenanya proses tersebut perlu dipercepat dengan bantuan
manusia. Dengan cara yang baik, proses mempercepat pembuatan kompos
berlangsung wajar sehingga perlu kompos yang berkualitas baik
(Murbandono,2010).

Gambar 2. Kompos

Dilingkungan alam terbuka, proses pengomposan bisa terjadi dengan

sendirinya. Lewat proses alami, rumput, daun – daunan dan kotoran hewan serta
sampah lainnya lama kelamaan membusuk karena adanya kerja saam antara
organisme dengan cuaca. Proses tersebut bisa dipercepat oleh perlukan manusia,
yaitu dengan menambahkan mikroorganisme pengurai sehingga dalam waktu
singkat akan diperoleh kompos yang berkualitas baik.

Kompos mempunyai beberapa sifat yang menguntungkan antara lain

sebagai berikut :
 a. Memperbaiki struktur tanah berlempung sehingga menjadi ringan

b. Memperbesar daya ikat tanah berpasir sehingga tanah tidak berderai

c. Menambah daya ikat air pada tanah

d. Memperbaiki drainase dan tata udara dalam tanah

e. Meningkatan daya ikat tanah terhadap zat hara

Tabel 1. Sumber bahan organik yang umum dimanfaatkan

Asal Bahan
Pertanian a. Jerami dan sekam padi, gulma, batang dan tongkol jagung,
a. Limbah dan semua bagian vegetatif tanaman, batang pisang, sabut kelapa
residu tanaman
b. kotoran padat, limbah ternak cair, limbah pakan ternak,
b. Limbah dan cairan biogas
residu
c. Glirisida, ternano, mukuna, turi, lamtoro,
c. Pupuk hijau sentosesma,albisida.
d. Tanaman air d. Azola, ganggang biru,enceng gondok, gulma air

e. Penambat e. mikroorganisme, mikoriza,rhizobium,biogas

nitrogen
Industri a. Serbuk gergaji kayu,biotong,kertas,ampas tebu,limbah
a. Limbah padat kelapa sawit,limbah pengalengan makanan, dan pemotongan
hewan
b. Limbah cair b. Alkohol, limbah pengolahan kertas, ajinomoto, limabh
pengelolaan minyak kelapa sawit

Limbah rumah a. Tinja, urin,sampah rumah tangga, sampah kota

tangga
a. sampah
 Kompos yang baik adalah kompos yang sudah mengalami pelapukan
dengan ciri – ciri warna yang berbeda dengan warna warna bahan pembentuknya,
tidak berbau, kadar air rendah, dan mempunyai suhu ruang.

Manfaat kompos antara lain sebagai berikut :

a. Menyediakan unsur hara mikro bagi tanaman

b. Menggemburkan tanah

c. Memperbaiki struktur dan tekstur tanah,

d. Meningkatkan porositas, aerasi, dan komposisi mikroorganisme tanah

e. Memudahkan pertumbuhan akar tanaman

f. Menyimpan air tanah lebih lama

g. Meningkatkan efisiensi pemakaian pupuk kimia

h. Bersifat multi lahan karena dapat digunakan di lahan pertanian,

perkebunan,reklamasi lahan kritis, maupun padang golf.

2.1.2 Syarat – Syarat Pembuatan Kompos

Agar pembuatan kompos berhasil, beberapa syarat yang diperlukan
antara lain :

a. ukuran bahan mentah,semakin kecil ukuran potongan – potongan bahan

mentahnya, semakin kecil semakin cepat pula waktu pembusukannya

b. suhu dan ketinggian timbunan kompos, makin besar isolasi panas dan semakin
mudah timbunan menjadi panas. Timbunan yang semakin dangkal akan
kehilangan panas dengan cepat, karena bahan tidak cukup untuk menahan panas
dan menghindari pelepasannya.

c. kelembapan, timbunan kompos harus selalu lembab, dengan kandungan lengas

50 – 60%, agar mikroba tetap beraktivitas. Kelebihan air akan mengakibatkan
volume udara jadi berkurang, sebaliknya bila terlalu kering proses dekomposisi
proses dekomposisi akan berhenti.
d. nilai pH, bahan organik dengan nilai pH 3 -11 dapat dikomposkan. pH optimum
berkisar antara 5,5 – 80. Bakteri menyukai pH netral, sedangkan fungsi aktif pada
pH agak masam.

2.2 Media MS (Murashige Skoog)

2.2.1 Pengertian Media MS

Keberhasilan dalam kultur jaringan akan dipengaruhi oleh penggunaan
media yang digunakan. Media kultur jaringan tidak hanya terdiri dari unsur hara
makro, mikro, vitamin dan zat pengatur tumbuh, tetapi juga karbohidrat yang pada
umumnya berupa gula untuk menggantikan karbon yang biasanya diperoleh dari
atmosfer melalui proses fotosintesis. Media kultur jaringan merupakan campuran
air dan hara yang mengandung garam-garam organik dan zat pengatur tumbuh.
Garam-garam anorganik terdiri dari unsur- unsur hara makro (N, P, K, Ca, Mg
dan Na) dan unsur-unsur hara mikro (B, Co, Mn, I, Fe, Zn dan Cu). Tanaman
membutuhkan unsur hara tersebut untuk melakukan proses-proses metabolisme,
terutama pada masa vegetatif. Diharapkan unsur yang terserap dapat digunakan
untuk mendorong pembelahan sel dan pembentukan sel-sel baru guna membentuk
organ tanaman seperti daun, batang, dan akar yang lebih baik sehingga dapat
memperlancar proses fotosintesis (Rizqiani et al., 2007).

Gambar 3. Media MS

Media Murashige and Skoog banyak digunakan sebagai media kultur.

Menurut George and Sherington (1984), media MS mengandung garam-garam
anorganik yang tinggi. Media MS merupakan media yang sangat luas
pemakaiannya karena mengandung unsur hara makro dan mikro yang lengkap
sehingga dapat digunakan untuk berbagai spesies tanaman. Komposisi media MS
terdiri dari unsur hara makro, unsur hara mikro, besi, vitamin, myoinositol,
sukrosa dan bahan pemadat (agar).

Unsur hara makro MS terdiri dari: MgSO4.7H2O, KH2PO4, NH4. NO3,

KNO3, CaCl2.2H2O, sedangkan unsur hara mikro terdiri dari: NaMoO4.2H2O,
H3BO3, MnSO4. 4H2O, ZnSO4. 4H2O, CuSO4.5H2O, KI, CoCl2.6H2O. Besi
yaitu FeSO4.7H2O dan Na2.EDTA. Vitamin MS terdiri dari: Thiamine-HCL,
Pyridoxine-HCL, Nicotinic Acid dan Glyicne. Selain komposisi media dasar
tersebut juga dapat ditambahkan zat pengatur tumbuh sesuai perlakuan yang
diinginkan.

Tabel 2. Komposisi Media MS (Murashige Skoog)

No Komposisi Konsentrasi No Komposisi Konsentrasi

(mg/L) (mg/L)
Hara Makro
1. NH4NO3 1650 13. CuSO4.5H2O 0,025
2. KNO3 1900 14. CoCl2.6H2O 0,025
3. CaCl2.2H2O 440 15. Myo-inositol 100
4. MgSO4.7H2O 370 Vitamin
5. KH2PO4 170 16. Myo-Inositol 100
Hara Mikro 17. Asam nikotinat 0,5
6. FeSO4.7H2O 27,8 18. Piridoksin 0,5
7. Na2EDTA.2H 37,3 19. Thiamin HCL 0,1
2O
8. MnSO4.4H2O 22,3 Sumber karbon
9. ZnSO4.7H2O 8,6 20. Sukrosa 30.000
10. H3BO3 6,2 Bahan
11. Kl 0,83 21 Agar 8g/l
12. Na2MoO4.2H 0,25 pH media 5,8
2O
Zat Pengatur Sesuai
Tumbuh perlakuan
 Prinsip dasar dalam pembuatan media adalah penyediaan larutan stok
yang akan digunakan untuk membuat berbagai media perlakuan. Larutan stok
yang digunakan di Laboratorium Kultur Jaringan Balai Penelitian Tanaman
Rempah dan Obat yaitu stok unsur makro, stok unsur mikro, vitamin dan zat
pengatur tumbuh. Stok hara makro dan mikro dapat disimpan dalam jangka waktu
4-8 minggu sedangkan stok vitamin lebih singkat, hanya 1-2 minggu. Adanya
larutan stok yang tersedia, pembuatan media dapat dilakukan dengan teknik
pengenceran dan pencampuran.

Dalam pembuatan larutan stok, dibutuhkan ketelitian dalam melakukan

penimbangan dan pencampuran bahan kimianya. Bahan kimia yang ditimbang
harus sesuai dengan komposisi yang telah ditentukan, serta tidak boleh dikurangi
maupun dilebihkan karena akan berpengaruh terhadap keseimbangan
pertumbuhan tanaman. Untuk memudahkan dalam pembuatan media dan
menghemat pekerjaan menimbang bahan kimia secara berulang-ulang dan
menghindari penimbangan dalam jumlah yang sangat sedikit, diperlukan larutan
stok dari masing-masing komposisi yang diinginkan. Banyaknya larutan stok yang
dibuat tergantung kebutuhan. Larutan stok dapat dibuat untuk 25, 50, 100 kali dan
seterusnya. Unsur hara makro dapat dibuat 20 kali kepekatan untuk satu liter
media. Untuk unsur mikro dapat dibuat 100 kali kepekatan dalam satu liter media
dan vitamin dapat dibuat 1000 kali kepekatan dalam satu liter media.

Prinsip dasar dalam pembuatan larutan stok yaitu melarutkan satu persatu
unsur hara secara berurutan dimulai dari bobot molekul yang paling kecil ke bobot
molekul yang paling besar. Setiap unsur dilarutkan satu persatu sampai benar-
benar larut kemudian unsur yang lain berikutnya.

2.2.2 Faktor Penting Pembuatan Larutan Stok

Dalam pembuatan larutan stok, yang perlu diperhatikan adalah
penyatuan beberapa komponen media sekaligus dalam suatu larutan stok dan
harus mempertimbangkan kecocokan dan kestabilan dari sifat kimianya. Oleh
karena itu, pencampuran larutan stok harus satu persatu dan volume yang
dicampurkan harus sesuai. Dalam larutan stok yang berisi beberapa komponen
media jangan sampai ada endapan. Larutan yang sudah mengalami pengendapan
tidak dapat digunakan lagi. Pengendapan tidak dapat digunakan larutan stok
umumnya terjadi bila kepekatan larutan terlalu tinggi larutan terlalu tinggi. Oleh
karena itu pengendapan larutan dapat dihindari dengan membuat larutan yang
tidak terlalu pekat atau tidak menggunakan larutan campuran yaitu dengan
membuat satu larutan stok hanya untuk satu jenis bahan terutama unsur hara
makro. Kondisi simpan juga perlu diperkirakan karena bahan FeNa EDTA tidak
tahan dalam suhu tinggi atau cahaya. Larutan stok kadang – kadang ditumbuhi
mikroorganisme, larutan stok yang terkontaminasi ini tidak dapat digunakan lagi.

2.4 Sterilisasi dan Penanaman

2.4.1 Pengertian Sterilisasi

Gambar 4. Sterilisasi Alat

Sterilisasi adalah segala kegiatan dalam kultur jaringan harus dilakukan

di tempat yang steril, yaitu di laminar flow dan menggunakan alat-alat yang juga
steril. Sterilisasi  juga dilakukan terhadap peralatan, yaitu menggunakan etanol
yang disemprotkan secara merata pada peralatan yang digunakan. Teknisi yang
melakukan kultur jaringan juga harus steril. Peralatan yang kami gunakan yaitu
petridish yang berfungsi untuk media  pemotongan hasilnya steril karena dalam
mensterilisasi sesuai petunjuk. Alat yang kedua yaitu botol kultur yang berfungsi
untuk menaruh penanaman eksplan hasilnya juga steril karena sangat hati-hati
dalam melakukan sterilisasi. Peralatan yang ketiga yaitu Erlenmeyer yang
berfungsi untuk pencucian,hasilnya juga steril karena dalam melakukan
pensterilan dilakukan dengan sungguh-sungguh dan menjaga kondisi lingkungan
tetap steril. Peralatan yang keempat yaitu scalpel yang berfungsi untuk memotong
eksplan,hasil alat tersebut juga steril karena praktikan dalam melakukan sterilisasi
selalu dalam keadaan steril dan berhati-hati. Peralatan yang ke lima yaitu pinset
yang berfungsi untuk mengambil eksplan,hasil alatnya juga steril karena dalam
melakukan pensterilan dilakukan sesuai petunjuk dan keadaan lingkungan serta
praktikan steril sehingga tidak ada bakteri yang masuk. Peralatan yang ke enam
yaitu aluminium foil yang berfungsi untuk membungkus botol kultur,hasilnya alat
tersebut juga steril karena praktikan menggunakan dengan hati-hati dan cermat.

2.4.2 Faktor Terpenting Dalam Sterilisasi Eksplan

Dalam sterilisasi bahan tanaman, hal yang penting yang harus mendapat
perhatian adalah; bahwa sel tanaman dan kontaminan adalah sama-sama benda
hidup. Kontaminan harus dihilangkan tanpa mematikan sel tanaman. Teknik
penanaman kultur jaringan sangat sederhana, yaitu suatu sel atau irisan jaringan
tanaman yang sering disebut eksplan secara aseptik diletakkan dan dipelihara
dalam medium pada atau cair yang cocok dan dalam keadaan steril. dengan cara
demikian sebaian sel pada permukaan irisan tersebut akan mengalami proliferasi
dan membentuk kalus. Apabila kalus yang terbentuk dipindahkan kedlam medium
diferensiasi yang cocok, maka akan terbentuk tanaman kecil yang lengkap dan
disebut planlet. Dengan teknik kultur jaringan ini hanya dari satu irisan kecil suatu
jaringan tanaman dapat dihasilkan kalus yang dapat menjadi planlet dalam jumlah
yang  besar (Anonim,2009).
 Gambar 5. Sterilisasi Eksplan

Eksplan yang telah ditanam, agar dapat tumbuh menjadi kalus dan
kemudian menjadi planlet, membutuhkan pemeliharaan yang rutin dan tepat.
Artinya, eksplan atau kalus yang sudah waktunya untuk dipindahkan ke dalam
media tanam yang baru harus segera dilaksanakan, tidak boleh sampai terlambat.
Pemindahan yang terlambat dapat menyebabkan pertumbuahn eksplan atau kalus
dapat terhenti atau dapat mengalami brownig atau terkontaminasi oleh jamur atau
bakteri. Botol-botol eksplan yang sudah berisi medium setelah ditutup dengan
alumunium foil, kemudian disterilisasi. Sterilisasi medium lebih sedikit waktunya
dibandingkan dengan sterilisasi alat-alat, yakni 15 menit, tetapi suhu dan tekannya
sama (Hendra,2007). Menabur eksplan dilakukan di dalam Laminar Air Flow
Cabinet dengan kondisi aseptik. Sebelum kita bekerja di dalam laminar air flow
cabinet, semua perhiasan tangan harus dilepas, dan tangan dibasuh terlebih dahulu
dengan alkohol 70%. Eksplan yang siap ditaman dipotng dengan menggunakan
scalpel di dlam cawan petri. Potongan eksplan dimasukan kedalam erlenmeyer
yang berisi media tumbuh, hingga  permukaan yang teriris bersentuhan dengan
medium. Setelah semua pekerjaan menabur selesai, kemudian alat-alat yang sudah
dipakai dibersihkan (Wetherel,2008).

2.5 Subkultur dan Aklimatisasi

2.5.1 Pengertian Subkultur

Subkultur adalah usaha untuk menggantikan media dalam kultur
jaringan dengan media yang baru, sehingga kebutuhan nutrisi untuk pertumbuhan
kalus dapat terpenuhi. Subkultur merupakan salah satu tahap dalam perbanyakan
tanaman melalui kultur jaringan. Pada dasarnya subkultur adalah memotong,
membelah dan menanam kembali eksplan yang telah tumbuh sehingga jumlah
tanaman akan bertambah banyak. Waktu pelaksanaan subkultur tergantung pada
beberapa hal, misalnya eksplan yang ada dalam botol sudah tumbuh setinggi
botol, atau eksplan tersebut sudah berada lama di dalam botol sehingga
pertumbuhannya sudah mulai berkurang akibat mulai kekurangan hara. Pada
media dalam botol sendiri kelihatan mulai menipis, berwarna kecoklatan atau
hitam sebagai hasil reaksi pertumbuhan tanaman, bekas bagian tanaman yang mati
dan lain-lain. Bisa saja tanaman baru 4-6 minggu di dalam botol namun
pertumbuhannya sudah setinggi botol maka segera dilakukan subkultur. Bisa juga
tanaman belum setinggi botol namun sudah berada lebih dari empat bulan
sehingga perlu disubkultur. Tujuan penelitian ini adalah sterilisasi bagian tanaman
dari lapang yang akan digunakan sebagai eksplan dan melakukan subkultur bagian
tanaman untuk perbanyakan secara in vitro.

Gambar 6. SubKultur

Kultur jaringan, inisiasi kultur yang bebas dari kontaminan merupakan

langkah yang sangat penting. Eksplan dari lapangan mengandung debu, berbagai
kotoran dan kontaminan hidup pada permukaannya. Kontaminan hidup dapat
berupa cendawan, bakteri, serangga dan telurnya, tungau serta spora-spora. Bila
kontaminan ini tidak dihilangkan maka pada media yang mengandung gula,
vitamin dan mineral, kontaminan terutama cendawan dan bakteri akan tumbuh
dengan cepat. Dalam beberapa hari, kontaminan akan tumbuh dan memenuhi
seluruh botol kultur. Eksplan yang tertutup kontaminan akhirnya mati baik
sebagai akibat dari persaingan hara dan pengrusakan dari bakteri atau cendawan
maupun akibat senyawa toksik yang dihasilkan oleh cendawan atau bakteri
(Gunawan, 1984).

2.5.2 Faktor Penghambat Tumbuhnya Subkultur

Salah satu faktor pembatas dalam keberhasilan kultur jaringan adalah
kontaminasi yang dapat terjadi pada setiap saat dalam masa kultur. Kontaminasi
dapat berasal dari: (1) Eksplan, baik eksternal maupun internal; (2)
Mikroorganisme yang masuk ke dalam media; (3) Botol tanam atau alat-alat
tanam yang kurang steril; (4) Lingkungan kerja dan ruang kultur yang kotor; dan
(5) Kecerobohan dalam pelaksanaan. Bakteri tidak saja berada pada eksplan
bagian permukaan tetapi terkadang ada pada bagian dalam eksplan. Biasanya bila
ada di permukaan, respon kontaminasinya sangat cepat yaitu dalam tempo dua
kali 24 jam sudah tampak. Tetapi bila bersifat internal, responnya muncul setelah
beberapa hari bahkan terkadang baru tampak dalam hitungan bulan, di mana
sudah terjadi induksi kalus atau mulai terbentuk organogenesis (Santoso dan
Nursandi, 2000). Keberhasilan teknik kultur jaringan terutama dalam perbanyakan
tanaman juga ditentukan oleh perlakuan subkultur.

2.5.3 Pengertian Aklimatisasi

Gambar 7. Aklimatisasi
 Aklimatisasi adalah upaya penyesuaian fisiologis dan adaptasi tanaman
terhadap lingkungan baru yang menjadi tempat tumbuhnya. Proses aklimatisasi
dilakukan dengan cara bertahap agar hasil eksplan atau planlet dapat beradaptasi
dengan perubahan lingkungan baik suhu, kelembapan, cahaya maupun faktor
lainnya yang berbeda saat tanaman masih berada dalam botol kultur (Mantell et al
1985). Hal lain yang perlu diperhatikan dalam proses aklimatisasi adalah factor
lingkungan, seperti sinar matahari, kelembaban nisbi, dan temperature serta
pemeliharaan antara lain, pemupukan, penyiraman, serta pengendalian hama
penyakit tanaman. Temperatur yang dibutuhkan 28 + 2oC dengan temperature
minimum 15 oC. Hal ini disebabkan bahwasanya temperature yang tinggi dapat
menyebabkan dehidrasi yang dapat menghambat pertumbuhan tanaman.
Kelembaban nisbi (RH) yang diperlukan bekisar 60-85%. Karena kelembaban
yang tinggi memiliki fungsi untuk menghindari penguapan yang terlalu tinggi
bagi tanaman. Pada malam hari kelembaban dijaga agar tidak terlalu tinggi,
karena dapat mengakibatkan busuk akar pada tunas muda. Oleh karena itu perlu
untuk diusahakan agar media pada pot jangan sampai terlalu basah. Sedangkan
kelembaban yang terlalu rendah pada siang hari dapat diatasi dengan memberikan
semprotan kabut (mist) di sekitar tempat penanaman dengan sprayer (Deden,
2003:7).

Media tanam yang termasuk dalam kategori bahan organic umumnya

berasal dari komponen organisme hidup antara lain: daun, batang, bunga, akar,
dan kulit tanaman. Penggunaan media bahan organic sudah menyediakan cara
bagi tanaman. Selain itu bahan organic mempunyai pori-pori makro dan mikro
yang hampir seimbang sehingga sirkulasi udara yang dihasilkan cukup banyak
dan daya serap air yang tinggi. Untuk meningkatkan budidaya tersebut diperlukan
pemeliharaan yang benar, salah satunya dengan menggunakan media organic yang
dapat memenuhi unsur hara yang dibutuhkan tanaman. Media organic yang sering
dipakai antara lain, arang kayu, arang sekam, moss, dan cocopeat (Rossa, 2011).

Arang kayu harus dipecah menjadi potongan kecil sebelum digunakan.

Ukuran pecahan arang tergantung pada ukuran pot yang akan digunakan untuk
menanam. Sifat-sifat media arang kayu antara lain: (1) tahan lama, (2) kurang
mampu mengikat air, (3) mengandung unsur karbon (C), sulfur (S), Fosfor (F),
serta abu, (4) media ini sangat cocok untuk daerah yang mempunyai kelembaban
tinggi (Iswara dalam Diah, 2012). Menurut hasil beberapa penelitian arang kayu
mengandung senyawa karbon yang tinggi yang dapat merangsang pertumbuhan
akar pada tanaman angrek.

Arang sekam mempunyai kelebihan sebagai media karena memiliki

rongga yang sangat banyak sehingga drainase dan aerasinya baik. Dengan begitu
akar mudah bergerak diantara butiran arang sekam. Sifat higroskopis yang
dimiliki arang sekam sehingga perlu dijenuhkan sebelum digunakan. Daya tahan
arang sekam sekitar 1 tahun, kemudian akan menjadi partikel kecil.
Pembuatannya menggunakan panas yang tinggi sehingga tidak perlu disterilisasi
kembali. Penelitian Pudiyati (2009 dalam Diah, 2012), arang sekam dapat
merangsang pertumbuhan akar, dan daun tanaman anthurium karena mengandung
karbon dan fosfor. Selain itu karena kandungan karbon, sulfur, dam fosfor
berfungsi untuk mempercepat pertumbuhan akar, daun, dan pertumbuhan tinggi
tanaman.

Induksi perakaran dilakukan pada saat aklimatisasi dengan terlebih dahulu

merendam atau mencelupkan bagian dasar batang dalam larutan yang
mengandung senyawa auksin seperti IBA dan NAA atau dengan Rooton F.
Biakan yang berasal dari tahap elongasi yang akan diaklimatisasi dan diinduksi
perakarannya harus terlebih dahulu dibuang bagian kalusnya dan dibersihkan pada
air mengalir. Harus diperhatikan pula bahwa dalam proses aklimatisasi tunas
memerlukan kelembaban yang cukup dan media tumbuh tidak terlalu basah.
Media tumbuh yang digunakan dapat berupa campuran tanah + arang sekam (1: 1)
atau tanah + serbuk sabut kelapa (1: 1) atau tanah + kompos halus (1: 1). Media
sebaiknya disterilisasi dahulu dengan pemanasan dan tekanan uap (Ni luh, 2014).

Media yang telah disterilisasi dapat diletakkan dalam bak plastik atau bak
semen yang ada di kamar kaca. Untuk menjaga kelembaban dilakukan
penyungkupan dengan plastik, sedangkan untuk mempercepat pertumbuhan bibit,
penyemprotan dengan pupuk daun seperti Hyponex, Bayfolan, dan Gandasil
sangat dianjurkan pada umur 1 minggu setelah tanam (Anna, 2013).

Pierik (1987 dalam Deden, 2003) menyatakan bahwa perbanyakan melalui

kultur jaringan dikatakan berhasil apabila memenuhi beberapa kriteria, yaitu (1)
Tidak merubah sifat genetik tanaman induk apabila dilakukan perbanyakan secara
koronal, (2) Seleksi yang kuat pada bahan tanaman yang bebas penyakit, (3)
Pemindahan tanaman/bibit hasil kultur jaringan ke dalam tanah tidak sukar, (4)
Teknik perbanyakannya tidak terlalu rumit, (5) Kemampuan regenerasi tidak
menurun (6) Ekonomis.
 III. METEDOLOGI

3.1 Tempat dan Waktu

Laporan dibuat pada hari selasa tanggal 5 januari 2021 pukul 16 : 00
bertempat di Pangkalan Kerinci Perumahan Mutiara Kerinci Indah, Kabupaten
Pelalawan, Pekanbaru, Riau.

3.2 Bahan dan Alat

3.2.1 Pembuatan Kompos

Alat dan bahan yang digunakan pada pembuatan kompos adalah wadah
pembuatan kompos, cangkul, botol bekas, laarutan EM4, gula merah, air cucian
beras, abu gosok, pupuk kandang, wadah, dan limbah sayuran atau limbah
pertanian

3.2.2 Pengenalan Alat

Alat dan bahan yang digunakan pada praktikum pengenalan alat yang
dilaboratorium bioteknologi adalah pena, buku, hp, laptop, dan aplikasi zoom.

3.2.3 Pembuatan Larutan dan Stok dan Media

Alat dan bahan yang digunakan yaitu Timbangan analitik, aluminium
foil, beker glass, magnetic tirer, Erlenmeyer, botol kultur, panic, ph meter, bahan
kimia, gula (30 gr), aquades dan agar-agar (8 gr).

3.2.4 Sterilisasi dan Penanaman

Alat dan bahan yang digunakan yaitu scalpel, pinset, Bunsen,
pentridish, tisu, masker, bunga papaya jantan, media ms, alkohol 96%, klorox,
byclin, spiritus, dan aquades.

3.2.5 Pengamatan, Subkultur, dan Aklimatisasi

Alat dan bahan yang digunakan pada materi ini adalah hp, alat tulis yang
berupa buku dan pena.
3.3 Cara Keja

3.3.1 Pembuatan Kompos

Dalam pembuatan kompos yang pertama dilakukan adalah membuat

larutan activator dengan gula merah sebanyak 500 ml yang dipanaskan, kemudian
tambahkan air sebanyak 400 ml lalu tunggu hingga dingin, kemudian campurkan
dengan larutan EM4 sebanyak 10 ml kemudian aduk rata. Masukan pupuk
kandang dan abu gosok, lalu bahan organik di cacah sampai berukuran kecil
kemudian dimasukkan ke dalam pupuk kandang dan abu gosok yang telah
dimasukan tadi lalu diaduk rata kemudian masukan larutan activator yang telah
dibuat sebelumya, kemudian masukan sayur-sayuran kedalamnya kemudian tutup
rapat dan tunggu beberapa hari.

3.3.2 Pengenalan Alat

Praktikum dikerjakan dengan cara mendengarkan dan memahami serta

mencatat penjelasan dari asisten praktikum bioteknologi.

3.3.3 Pembuatan Larutan dan Stok dan Media

Pada pembuatan larutan stok yang pertama yang dilakukan adalah

menyiapkan alat dan bahan yang digunakan, kemudian timbang semua bahan
kimia. Untuk membuat 100 ml larutan, larutan bahan kimia dengan 50 ml dan
aquades dicampurkan dengan menggunakan magnetic tirer sampai larut. Ketika
larut tambahkan aquades hingga volumenya menjadi 100 ml. kemudian masukan
ke Erlenmeyer larutan yang telah dicampurkan tadi, sebelum menggunakan
Erlenmeyer bilas terlebih dahulu dengan larutan aquades, lalu tutup Erlenmeyer
dengan aluminium foil dan beri label, kemuadian dilektakkan di lemari es.

Pada pembuatan larutan media yang pertama dilakukan adalah timbang

gula dengan berat 30 gr dan agar-agar sebanyak 8 gr. Kemudian larutkan gula
dengan aquades sebanyak 6000 ml digelas bekker 1 liter menggunakan magnetic
tirer. Setelah larut tambahkan larutan stok kemudian tambahkan lagi aquades
sebanyak 300 ml. ukur ph larutan menggunakan ph meter, jika ph sudah sesuai
tambahkan lagi larutan aquades sebanyak 100 ml hingga larutan tersebut
mencapai 1000 ml, lalu masukan kedalam panci yang sebelumnya sudah
dibersihkan menggunakan larutan aquades, tambahkan agar-agar kemudian
panaskan hingga mendidih. Lalu pindahkan ke botol kultur sebanyak 20 mp lalu
tutup dengan aluminium foil, kemudian masukan ke autoklaf selama 15 menit.
Setelah 15 menit diamkan sebentar lalu keluarkan dan simpan ke ruangan kultur.

3.3.4 Sterilisasi dan Penanaman

Pada Sterilisasi anther papaya yang pertama dilakukan adalah mencuci

bunga papaya dengan larutan aquades lalu direndam pada larutan koroks 2%
selama 15 menit. Setelah 15 menit kemudian bilas lagi dengan aquades kemudian
rendam dengan kloroks 1% lalu bilas lagi dengan aquades sebanyak 3X, lalu
sterilisasi scalpel dan pinset dengan menggunakan alkohol 96% kemudian bakar
sebentar di pembakaran Bunsen tunggu apinya padam, kemudian lakukan
penanaman.

Pada penanaman kultur anther papaya yang pertama dilakukan adalah

memisahkan kuncup bunga jantan dari tanaman pepaya sesuai ukuran kuncup
bunga, lalu dicuci dengan air mengalir dan direndam dengan agrept dan dithane
selama 15 menit. Lalu bilas dengan air steril dan kemudian dibawa ke dalam
laminar air flow cabinet. Sterilisasi kuncup bunga dalalm LAFC dengan
mencelupkan Bungan ke dalam alkohol 70% lalu dilewatkan di atas api Bunsen
lalu diamkan sampai api padam, lakukan hal yang sama sampai dua kali.
Kemudian buka kuncup bunga dengan pinset dan buang koloranya secara hati-hati
agar antenanya tidak rusak, lepaskan antenna dari tangkai dan tanam pada media
kultur MSO. Kemudian simpan dalam gelap selama dua bulan untuk menginduksi
pertumbuhan kalus.
3.3.5 Pengamatan, Subkultur, dan Aklimatisasi

Pada materi ini cara kerjanya yaitu mendengarkan asisten menjelaskan

materi pengamatan, subkultur, dan aklimatisasi.
 IV. PEMBAHASAN

4.1 Pembuatan Kompos

Menurut hasil pengamatan yang telah dilakukan dari praktek pembuatan
kompos didapatkan karakteristik fisik kompos yang telah dibuat :
a. Bau
Jika proses pembuatan kompos beralan dengan normal, maka tidak
menghasilkan bau yang menyengat. Walaupun demikian, dalam pembuatan
kompos tidak akan terbebas sama sekali dari adanya bau. Kompos yang sudah matang dapat
diketahui dari baunya yang seperti bau tanah.
b.Warna
Warna merupakan salah satu indikator untuk mengetahui kematangan
kompos yaitu cokelat kehitam-hitaman. Apabila kompos masih berwarna hijau
atau warnanya mirip dengan bahan mentahnya berarti kompos tersebut belum
matang.
c.Tekstur
Ukuran partikel sampah yang digunakan sebagai bahan baku pembuatan
kompos harus sekecil mungkin untuk mencapai efisiensi aerasi dan supaya lebih
mudah dicerna atau diuraikan oleh mikroorganisme. Semakin kecil partikel,
semakin luas permukaan yang dicerna sehingga pengurai dapat berlangsung
dengan cepat. Jika proses pembuatan kompos beralan dengan normal, maka
tekstur kompos remah dan tidak menggumpal. pada kompos yang sudah matang,
bentuk fisiknya menyerupau tanah yang berwarna kehitaman
d.Waktu
Lama waktu pengomposan tergantung pada karakteristik bahan yang
dikomposkan, metode yang digunakan dan keberadaan aktivator pengomposan.
Secara alami pengomposan akan berlangsung dalam waktu beberapa minggu
sampai 2 tahun hingga kompos benar-benar matang. Menurut hasil pengamatan,
waktu pengomposan yang hanya dilakukan selama 1 bulan. Waktu untuk
pengomposan ini sebenarnya sudah cukup untuk membuat kompos matang
apalagi dengan adanya penambahan aktivator seperti biosin dan molase. Namun
yang terjadi kompos belum semuanya matang dan teksturnya juga lembek dan
menggumpal serta ada belatung dalam proses pengomposan. Mungkin terjadi
karena pencampuran aktivator, dosis aktivator, dan bahan baku sayuran yang mungkin
dapat menyebabkan proses pengomposan tidak berjalan sempurna
Faktor-faktor yang dapat mempengaruhi pengomposan antara lain :
a.Bahan baku
Kecepatan suatu bahan menjadi kompos dipengaruhi oleh nilai
perbandingan C/N dari bahan tersebut. Semakin mendekati C/N tanah maka bahan
tersebut akan lebih cepat menjadi kompos. Tanah pertanian yang baik
mengandung perbandingan unsur C dan N yang seimbang, yaitu C/N = 10/12.
Oleh karena itu, semua bahan dengan kadar C/N yang tinggi, misalnya kayu dan
biji-bijian yang keras harus dicampur dengan bahan-bahan yang berair, seperti
dedaunan dan sampah dapur. Luas permukaan bahan juga ikut mempengaruhi
kecepatan pengomposan. Semakin halus dan kecil bahan baku kompos maka proses
pengomposannya akan semakin cepat dan lebih banyak hasilnya. Sebaliknya, bila bahan
baku berukuran besar maka proses pengomposannya akan semakin lama.
Oleh karena itu, dianjurkan untuk terlebih dahulu mencacah atau
memotong kecil-kecil (sekitar 4 - 5 cm) bahan organik yang berukuran besar agar
mempercepat proses pengomposan. Jenis bahan baku organik juga akan
menentukan kualitas produk akhir kompos. Untuk bahan organik yang
mengandung selulosa dan lignoselulosa biasanya sulit untuk dirombak maka
diperlukan mikroba yang mempunyai kemampuan spesifik. Oleh karena itu, untuk
menghasilkan kompos yang baik, beberapa  jenis bahan organik harus dicampur
sehingga memberikan komposisi dan parameter yang ideal.
b.Suhu
Proses pengomposan akan berjalan baik pada suhu ideal, yaitu 40 - 50 oC. Salah
satu cara yang dapat dilakukan untuk mempertahankan panas yang ideal adalah
dengan menimbun bahan sampai pada ketinggian tertentu (sekitar 1,25 - 2 m).
Jika timbunan terlalu pendek atau rendah maka akan menyebabkan panas mudah
menguap. Sebaliknya, timbunan bahan yang terlalu tinggi justru akan membuat suhu
menjadi terlalu tinggi dan udara di dasar timbunan menjadi berkurang. Kondisi
kekurangan udara tersebut cenderung akan memacu pertumbuhan bakteri anaerob
sehingga menimbulkan bau tidak enak.
c.Nitrogen
Nitrogen merupakan salah satu faktor yang berpengaruh dalam proses
pembuatan kompos karena dibutuhkan bakteri untuk dapat tumbuh dan berkembang
biak. Timbunan bahan kompos yang kandungan nitrogennya rendah tidak menghasilkan panas
sehingga pembusukan bahan akan berlangsung lama.
d. Kelembapan Salah satu faktor yang tidak kalah penting dalam proses
pembuatan kompos adalah menjaga kelembapan agar tetap seimbang. Secara
umum, kelembapan timbunan yang seimbang adalah sekitar 40 — 60% atau
keadaannya selembap karet busa yang diperas. Jika timbunan bahan semakin basah
maka kegiatan mengaduk harus semakin sering dilakukan. Di daerah yang
bercurah hujan tinggi, timbunan kompos harus dijaga agar tidak terlalu becek.
Sebaliknya, di daerah yang bercurah hujan rendah dan cenderung kering,
timbunan bahan kompos dapat diairi tiap 4 — 5 hari sekali.
Usaha yang dapat dilakukan untuk menjaga timbunan kompos agar
tidak terlalu becek, yaitu dengan membuat puncak timbunan menyerupai atap dan agak
membulat agar dapat mengalirkan airnya. Namun, bila hujan masih sangat deras,
timbunan perlu ditutup dengan plastik atau kain terpal untuk menjaga
kelembapan. Apabila berbagai upaya telah dilakukan dan timbunan kompos masih
tetap terlalu basah (becek) maka perlu dilakukan pengadukan setiap hari.

4.2. Pengenalan Alat Laboratorium

Pengenalan alat merupakan langkah pertama sebelum kita melakukan
percobaan atau penelitian, karena dengan mengenal alat, kita dapat mengetahui
fungsi masing-masing dari alat tersebut dan cara pengoperasiannya. Adapun alat-
alat yang terdapat di dalam laboratorium bioteknologi adalah sebagai berikut:

a. Pipet tetes, berfungsi untuk mengambil dan memindahkan larutan dalam

volume yang sedikit.
 Gambar 8. Pipet Tetes

b. Beaker glass, berfungsi sebagai tempat pembuatan larutan stok.

Gambar 9. Gelas Beaker

c. Cawan petri, berfungsi sebagai tempat memotong eksplan, sterilisasi, dan

sebagai wadah media MS.

Gambar 10. Cawan Petri

d. Scalpel, berfungsi untuk memotong eksplan yang akan ditanam.

 Gambar 11. Scalpel

e. Spatula, berfungsi untuk mengambil dan memindahkan bahan kimia

terutama yang berupa padatan.

Gambar 12. Spatula

f. Pinset, berfungsi untuk mengambil dan memindahkan eksplan.

Gambar 13. Pinset

g. Laminar Air Flow Cabinet (LAFC), berfungsi sebagai tempat sterilisasi
dan tempat kerja dalam penanaman kultur jaringan. Adapun cara kerja dari
alat ini adalah sebagai berikut: 1) Semprotkan alkohol 70% ke seluruh
bagian LAFC; 2) Lap dengan tisu; 3)Masukkan alat dan bahan yang
digunakan dalam kegiatan kultur jaringan; 4) Tutup LAFC; 5)
Sambungkan ke arus listrik; 6)Tekan tombol ON; 7) Hidupkan lampu UV
selama lebih kurang 30 menit; 8) Setelah 30 menit matikan lampu UV; 9)
Hidupkan lampu neon dan diamkan terlebih dahulu selama lebih kurang
15 menit; 10) Melakukan penanaman dengan menghidupkan blower yang
berfungsi untuk menyaring udara agar udara tetap steril; 11) Mematikan
semua yang dihidupkan sebelumnya; 12) Keluarkan alt dan bahan; 13)
Semprot alkohol 70% ke seluruh bagian LAFC; 14) Lap dengan tisu.

Gambar 14. LAFC

h. Autoklaf, berfungsi sebagai tempat sterilisasi alat dan bahan kultur

jaringan. Adapun cara penggunaan alat ini adalah: 1) Pastikan aquades
cukup di dalam autoklaf; 2) Tutup dengan bagian penyaring autoklaf; 3)
Sterilkan cawan petri, pinset, dan alat-alat logam dengan dibungkus
terlebih dahulu dengan kertas steril; 4) Tutup autoklaf; 5) Atur waktu 15
menit, suhu 121⁰C, dan tekanan 2 atm; 6) Sambungkan ke arus listrik; 7)
Tekan tombol ON; 8) Setelah bunyi alarm, buka tutp autoklaf; 9)
Keluarkan alat dan bahan tadi.
 Gambar 15. Autoklaf

i. Botol kultur, berfungsi sebagai tempat media dan penanaman eksplan.

Gambar 16. Botol Kultur

j. Magnetic stirer, berfungsi untuk menghomogenkan larutan stok. Adapun

cara penggunaan alat ini adalah sebagai berikut: 1) Sambungkan ke arus
listrik; 2) Letakkan beaker glass di atas magnetic stirer; 3) Masukkan
batang pengaduk dan posisikan di tengah; 4) Atur kecepatannya menjadi
600 rpm; 5) Tunggu samapi selesai, dan ubah keceatan menjadi nol; 6)
Angkat beaker glass menggunakan hot hands; 7) Lepas sambungan dari
arus listrik.
 Gambar 17. Magnetic Stirer

k. pH meter digital, berfungsi untuk mengukur pH larutan. Adapun cara

penggunaannya adalah sebagai berikut: 1) Sambungkan batang katoda ke
monitor pH; 2) Kalibrasi dengan menggunakan aquades; 3) Lap dengan
tisu secara perlahan; 4) Melakukan pengujian terlebih dahulu dengan
larutan Buffer-4 dan Buffer-7; 5) Kalibrasi dengan menggunakan aquades;
6) Lap dengan tisu secara perlahan; 7)Ukur pH larutan media (5.8), jika
pH larutan melebihi angka tersebut maka ditambahkan larutan asam dan
jika pH larutan kurang dari angka tersebut maka ditambahkan larutan basa;
8) Kalibrasi dengan menggunakan aquades; 9) Lap dengan tisu secara
perlahan; 10) Cabut batang pengaduk dari monitor dan tekan tombol OFF.

Gambar 18. pH Meter Digital

l. Lampu bunsen, berfungsi untuk mensterilkan alat-alat yang digunakan.

Adapun cara penggunaannya adalah dengan mencelupkan alat ke alkohol
90% sebelum disterilkan pada lampu bunsen.
 Gambar 19. Bunsen

m. Neraca analitik, berfungsi untuk mengukur massa kecil dalam rentang sub-
miligram. Adapun cara penggunaan alat ii adalah sebagai berikut: 1)
Sambungkan ke arus listrik; 2) Tunggu lebih kurang 15 menit sebelum
digunakan; 3) Timbang bahannya, gunakan aluminium foil sebagai
alasnya; 4) Tekan tombol OFF; 5) Cabut dari arus listrik.

Gambar 20. Neraca Analitik

n. Labu ukur, berfungsi untuk menghomogenkan sekaligus mengukur

volume larutan.
 Gambar 21. Labu Ukur

o. Erlenmeyer, berfungsi untuk menghomogenkan larutan dan sebagai wadah

untuk menyimpan larutan stok.

Gambar 22. Erlenmeyer

p. Rak kultur, berfungsi sebagai tempat meletakkan botol kultur.

Gambar 23. Rak Kultur

q. Gelas ukur, berfungsi untuk mengukur volume larutan.

 Gambar 24. Gelas Ukur

r. Mortal, berfungsi untuk menghaluskan bahan kimia padat.

Gambar 25. Mortal

s. Batang pengaduk, berfungsi untuk mengaduk larutan.

Gambar 26. Batang Pengaduk

Selain pengenalan alat juga dijelaskan tentang bahan eksplan. Bahan

eksplan berasal dari tanaman baik akar, batang, daun, dan sebagainya. Adapun
cara memilih eksplan yang baik adalah: 1) Perhatikan umur induknya, diambil
umur yang masih muda; 2) Ambil bagian meristematis; 3) Ambil tanaman yang
sehat; 4) Ambil bagian tanaman secara utuh; 5) Genotipe dari eksplan kita
ketahui; 6) Ukuran eksplan < 5 cm.
4.3 Pembuatan Larutan Stok dan Media MS
Larutan stok dapat dikelompokan menjadi :
a. Stok Hara Makro
Stok hara makro berisi senyawa-senyawa sumber unsur hara makro yang
diperlukan dalam jumlah besar. Karena sumber unsur hara makro memiliki jenis
anion yang berbeda maka biasanya dibuat larutan stok tunggal. Apabila kita
mencampur seluruh larutan maka dikhawatirkan akan terjadi pengendapan.
Larutan stok hara makro dibuat beberapa macam dan diberi nama larutan stok A
(NH4NO3), B (KNO3, C (CaCl2.2H2O), D (MgSO4.7H20 dan KH2PO4), dan E
(FeSO4.7H2O dan Na2EDTA)
b. Stok Hara Mikro
Unsur hara mikro adalah unsur hara yang paling sedikit dibutuhkan oleh
eksplan. Biasanya larutan hara mikro dibuat dengan kepekatan 200 kali
konsentrasi akhir media dan bahan yang diperlukan masih cukup kecil
jumlahnya.  Bahan bahan yang digunakan adalah MnSo4.H2O, ZnSO4.7H2O,
H3BO3, KI, Na2MoO4.2H2O, C0Cl.6H20, dan CuSO4.5H2O.
c. Vitamin
Larutan stok vitamin dapat dibuat dengan menambahkan  Thiamine.HCl,
Nicotinic acid,Pyridoxine.HCl, dan Glycine.
Hal-hal yang Harus Diperhatikan dalam Pembuatan dan Penyimpanan
Larutan Stok :
            Pada pembuatan larutan stok harus memperhatikan daya simpan
larutan.  Larutan yang sudah mengalami pengendapan tidak dapat digunakan
lagi.  Pengendapan larutan stok umumnya terjadi bila kepekatan larutan terlalu
tinggi.  Oleh karena itu pengendapan larutan dapat dihindari dengan membuat
larutan yang tidak terlalu pekat atau tidak menggunakan larutan campuran yaitu
dengan membuat satu larutan stok hanya untuk satu jenis bahan (terutama untuk
unsur hara makro).  Kondisi simpan juga perlu diperhatikan, karena bahan
FeNaEDTA tidak tahan dalam suhu tinggi atau cahaya.  Larutan stok kadang-
kadang juga ditumbuhi oleh mikroorganisme, larutan stok yang terkontaminasi ini
tidak dapat digunakan lagi.
 Dalam pembuatan larutan stok, yang perlu diperhatikan adalah penyatuan
beberapa komponen media sekaligus dalam suatu larutan stok dan harus
mempertimbangkan kecocokan dan kestabilan dari sifat kimianya. Oleh karena
itu, pencampuran larutan stok harus satu per satu dan volume yang dicampurkan
harus sesuai. Dalam larutan stok yang berisi beberapa komponen media jangan
sampai ada endapan. Setelah larutan stok dibuat, pengambilanya untuk media
dapat dilakukan dengan cara memipet atau menakarnya dengan gelas ukur.
Kesalahan dalam menyimpan larutan stok akan menimbulkan kerusakan larutan
tersebut terutama larutan stok yang tingkat kepekaktannya tinggi. Untuk menjaga
agar larutan stok yang mengandung besi, botol yang telah diisi oleh larutan stok
harus dilapisi dengan alumunium foil agar larutan tersebut terjaga dari sinar
matahari yang ada dan menjaganya agar tidak cepat rusak. Penyimpanan larutan
stok harus sesuai dan tidak boleh pada ruangan yang terkena sinar matahari
langsung untuk menjaga kualitas dari larutan stok tersebut.
Zat Pengatur Tumbuh (ZAT) yang dibuat berdasarkan hasil penelitian
yaitu NAA dan termasuk dalam golongan auksin yang fungsinya untuk
merangsang pemanjangan sel-sel pucuk. NAA amat lambat diuraikan oleh sel
tumbuhan, dan stabil pada pemanasan dengan autoklaf. BAP termasuk dalam
golongan sitokinin yang fungsinya untuk meningkatkan pembelahan sel pada
jaringan tanaman serta mengatur pertumbuhan dan perkembangan tanaman.
Semua medium kultur in vitro dilengkapi sumber karbon dan energi. Hampir
semua kultur memperlihatkan respon pertumbuhan yang optimum dengan
pemberian disakarida dalam bentuk sukrosa. Hal ini didukung dengan pernyataan
Hermawan & Na’iem (2006), menyatakan bahwa Penambahan agar berfungsi
sebagai zat pemadat pada medium. Keasaman medium adalah salah satu yang
mempengaruhi keberhasilan kultur jaringan tanaman. Pada umumnya, keasaman
medium ditetapkan antara 5,6-5,8. Medium yang terlalu asam (pH<4,5) atau
terlalu basa (pH>7,0) dapat menghambat pertumbuhan dan perkembangan eksplan
(Anjar, 2008)
4.4 Sterilisasi dan Penanaman
Sterilisasi merupakan upaya yang dilakukan untuk menghilangkan semua
mikroorganisme (bakteri, jamur, parasit, dan virus) termasuk endospora bakteri
dari benda-benda mati atau instrumen yang menempel (Sursilah, 2010). Sterilisasi
eksplan dapat dilaksanakan dengan dua cara. Cara mekanis, cara ini digunakan
untuk eksplan yang keras atau berdaging, yaitu dengan cara membakar eksplan
terseut di atas lampu bunsen sebanyak 3 kali kemudian secara kimiawi, digunakan
untuk eksplan yang lunak. Sterilisasi ini menggunakan bahan-bahan kimia.
Bahan-bahan yang digunakan adalah Sodium hipoklorit, mercuri chlorit, dan
alkohol 70%.

Selain dilakukan kultur meristem, juga terdapat teknik in vitro lainnya

yaitu kultur nuselus dan kultur embrio. Teknik ini bermanfaat untuk
menyelamatkan embrio tanaman terutama hasil persilangan. Dengan kultur
embrio pada pemuliaan tanaman (contohnya jeruk) diharapkan dapat
mempersingkat masa memperoleh tanaman jeruk dan dapat mengeliminasi
penyakit-penyakit yang menyerang tanaman jeruk.

Penyerbukan dan pembuahan dapat berhasil namun setelah persilangan

buatan seringkali dijumpai permasalahan antara lain buah yang terbentuk gugur
saat embrio belum matang, terbentuk buah dengan endosperm yang kecil atau
terbentuk buah dengan embrio yang kecil dan lemah. Kondisi tersebut dapat
menghambat program pemuliaan tanaman karena embrio muda, embrio dengan
endosperm kecil atau embrio kecil dan lemah seringkali tidak dapat berkecambah
secara normal dalam kondisi biasa. Untuk mengatasi hal tersebut di atas maka
embrio tersebut dapat diselamatkan dan ditanam secara aseptis dalam media
buatan sehingga dapat berkecambah dan menghasilkan tanaman utuh. Teknik
untuk menanam embrio muda ini dikenal dengan sebutan penyelamatan embrio
(embryo rescue) (Anonim, 2017).

Berdasarkan tujuan dan jenis embrio yang dikulurkan, kultur embrio

digolongkan menjadi kultur embrio muda (Immature Embryo Culture), kultur
embrio dewasa (Mature Embryo Culture) dan kultur embrio nonzigotik. Kultur
embrio muda bertujuan menanam embrio yang terdapat pada buah muda sebelum
buah tersebut gugur (mencegah kerusakan embrio akibat buah gugur) sehingga
teknik ini disebut sebagai embryo rescue (penyelamatan embrio).Kultur embrio
dewasa dilakukan dengan membudidayakan embrio yang telah dewasa yang
diambil dari buah yang telah masak penuh untuk merangsangperkecambahan dan
menumbuhkan embrio tersebut secara in-vitro. Kultur embrio lebih mudah
dilakukan dibandingkan dengan penyelamatan embrio (Anonim, 2017).

Kultur anter merupakan salah satu cara untuk mendapatkan tanaman

haploid secara in-vitro. Tanaman haploid adalah tanaman yang memiliki jumlah
kromosom sama dengan jumlah kromosom gametofitik pada sel sporofitiknya.
Dalam kenyataannya dari kultur ini tidak hanya tanaman haploid yang bias
dihasilkan, tetapi juga muncul tanaman-tanaman dengan tingkat ploidi yang lebih
tinggi. Kenyataan ini ada keuntungannya karena berarti memperkaya keragaman
genetic tanaman tersebut yang mungkin berguna dalam usaha pemuliannya
(Anonim, 2017).

Teknologi haploid dapat dimanfaatkan untuk mendukung program

perbaikan genetik tanaman terutama dalam peningkatan efisiensi dan pemecahan
masalah yang tidak bisa atau sulit dilakukan secara konvensional. Beberapa teknik
bioteknologi seperti seleksi dengan markah molekuler, kultur anter, dan
penyelamatan embrio dapat dimanfaatkan untuk mendukung program pemuliaan
sehingga menjadi lebih efisien. Kultur anther merupakan salah satu teknik untuk
mendapatkan tanaman haploid sehingga seringkali dikenal dengan nama kultur
haploid. Kultur anther digunakan untuk menghasilkan kultivar atau hibrida F1
yang akan digunakan sebagai bahan seleksi oleh pemulia tanaman (Anonim,
2017).

Kultur anther atau kultur haploid banyak dipergunakan dalam

menghasilkan kultivar-kultivar baru karena memiliki beberapa keunggulan. Kultur
anter sebagaimana umumnya kultur jaringan dapat dimanfaatkan untuk berbagai
tujuan. Dalam pemuliaan tanaman kultur anter merupakan sumber genetik,
sumber keragaman karakter dan juga dapat digunakan sebagai jalan pintas dalam
pembentukan galur murni (Anonim, 2017).

Dalam penanaman eksplan harus dilakukan di lingkungan yang aseptic.

Syarat pertama kultur jaringan juga masih digunakan pada pelaksanaan ini yaitu
kondisi yang aseptik. Pada proses penanaman eksplan, lingkungan yang
digunakan haruslah benar-benar dalam kondisi yang aseptic. Oleh karenanya
penanaman biasanya dilakukan di Enkas, sebuah kotak dengan tepi yang
transparan dan terdapat lubang untuk tangan, atau dengan menggunakan LAF
(Laminar Air Flow).

Dalam penanaman eksplan semua alat-alat yang digunakan harus steril

untuk mencegah terjadinya kontaminasi yang merupakan hal yang dapat
menyebabkan kegagalan dalam penanaman eksplan pada media. Hal ini sesuai
dengan pendapat Gunawan (1988) yang menyatakan Kontaminasi yang terjadi
pada kultur jaringan merupakan momok yang cukup mengganggu proses kultur
jaringan. Namun kontaminasi juga dapat dicegah dengan perlakuan-perlakuan
yang aseptic. Stelah dua acara praktikum diatas dilakukan sterilisasi terhadap
peralatan kultur dan media kultur, tanaman atau eksplan yang akan ditanam juga
harus dalam keadaan steril dan sehat artinya eksplan tidak terserang penyakit
ataupun terkena serangan mikroba.

Selain peralatan yang digunakan yang perlu disterilisasi maka ruangan

yang digunkan juga harus dalam keadaan aseptik. Keberadaan kontaminan yang
berasal dari spora maupun mikroba lainnya sangat sulit dihindari termasuk juga di
dalam ruang kultur. Untuk itu sterilisasi ruangan juga perlu dilakukan tentunya
dengan tujuan untuk menciptakan lingkungan yang aseptic dan menghilangkan
mikroba maupun spora penyebab kontaminan.

4.5 Pengamatan, Subkultur dan aklimatisasi

Pengamatan merupakan salah satu tahap dalam kultur jaringan.
Pengamatan sangat penting dilakukan guna memantau pertumbuhan dan
perkembangan eksplan. Adapun indikator-indikator yang diamati meliputi: 1)
Awal muncul kalus, dihitung dari awal penanaman sampai awal munculnya kalus;
2) Warna kalus (hijau, kuning, atau putih); 3) Tekstur kalus, keadaan permukaan
kalus, apakah terpisah-pisah (remah), atau sulit dipisah-pisah (kompak); 4) Awal
muncul tunas, dihitung dari awal penanaman sampai awal munculnya tunas; 5)
Tinggi tunas, dihitung dari pangkal tanaman sampai ujung tanaman; 6) Jumlah
tunas.

Subkultur adalah usaha untuk menggantikan media dalam kultur jaringan

dengan media yang baru, sehingga kebutuhan nutrisi untuk pertumbuhan kalus
dapat terpenuhi. Subkultur merupakan salah satu tahap dalam perbanyakan
tanaman melalui kultur jaringan. Pada dasarnya subkultur adalah memotong,
membelah dan menanam kembali eksplan yang telah tumbuh sehingga jumlah
tanaman akan bertambah banyak.

Aklimatisasi dapat didefinisikan sebagai proses penyesuaian suatu

organisme untuk beradaptasi pada lingkungan yang baru. Proses aklimatisasi
sangat penting karena akan menentukan apakah tanaman yang berasal dari in vitro
dapat beradaptasi atau tidak pada kondisi in vivo. Umumnya biakan hasil kultur
jaringan yang akan diaklimatisasi harus berupa planlet artinya biakan harus
mempunyai perakaran dan pertunasan yang proporsional. Akan tetapi pada
perbanyakan tanaman melalui kultur jaringan, biakan yang akan diaklimatisasi
berupa biakan tanpa akar (stek mikro) (Mariska, 2003:11).

Media yang telah disterilisasi dapat diletakkan dalam bak plastik atau bak
semen yang ada di kamar kaca. Untuk menjaga kelembaban dilakukan
penyungkupan dengan plastik, sedangkan untuk mempercepat pertumbuhan bibit,
penyemprotan dengan pupuk daun seperti Hyponex, Bayfolan, dan Gandasil
sangat dianjurkan pada umur 1 minggu setelah tanam (Anna, 2013).

Pierik (1987 dalam Deden, 2003) menyatakan bahwa perbanyakan melalui

kultur jaringan dikatakan berhasil apabila memenuhi beberapa kriteria, yaitu (1)
Tidak merubah sifat genetik tanaman induk apabila dilakukan perbanyakan secara
koronal, (2) Seleksi yang kuat pada bahan tanaman yang bebas penyakit, (3)
Pemindahan tanaman/bibit hasil kultur jaringan ke dalam tanah tidak sukar, (4)
Teknik perbanyakannya tidak terlalu rumit, (5) Kemampuan regenerasi tidak
menurun (6) Ekonomis.
 V. KESIMPULAN

5.1. Pembutan Kompos

Kompos adalah bahan – bahan organik yang telah mengalami proses
pelapukan karena adanya interaksi antara mikroorganisme (bakteri pembusuk)
yang bekerja didalamnya. Kompos di alam terbuka bisa terjadi dengan sendirinya
lewat proses alamiah, namun proses tersebut berlangsung lama sekali dapat
mencapai bertahun – tahun. Sehingga dengan adanya bantuan manusia dapat
mempersingkat waktu pembusukan.

Pembuatan kompos yang berasal dari sampah sayuran dan daun kering
dipengaruhi oleh faktor, suhu, sumber karbon dan nitrogen, kelembaban, aerasi
dan ukuran partikel dan penambahan aktivator yang digunakan. Kompos yang
telah matang ditandai dengan warnanya yang berubah menjadi coklat kehitaman
menyerupai tanah, teksturnya menyerupai tanah (remah), suhunya tidak beda jauh
dengan suhu ruangan. Biasanya volume kompos yang sudah jadi akan mengalamu
penyusutan dari berat awal.

5.2. Pengenalan Alat Laboratorium

Pengenalan alat merupakan kegiatan memberitahu dan menyampaikan
nama, fungsi, kegunaan , dan cara mengoprasikan alat dengan benar, karena
dengan demikian kita dapat mengetahui fungsi masing-masing dari alat tersebut
dan cara pengoperasiannya. Adapun alat-alat yang terdapat di dalam laboratorium
bioteknologi adalah sebagai berikut: pipet tetes, gelas beaker, cawan petri, scalpel,
spatula, pinset, LAFC, autoklaf, botol kultur, magnetic stirer, pH meter digital,
lampu bunsen, neraca analitik, labu ukur, erlenmeyer, rak kultur, gelas ukur,
mortal, dan batang pengaduk

5.3. Pembuatan Larutan Stok dan Media MS

Pembuatan media untuk teknik kultur in vitro dibutuhkan dalam jumlah
yang sangat sedikit. Untuk itu perlu dibuat suatu larutan stok untuk setiap
kelompok hara. Tujuan pembuatan larutan stok ini adalah untuk menghemat
bahan kimia dan efisiensi tempat dan teknik pengerjaan.
 Pembuatan larutan stok berdasarkan pengelompokan dalam : Stok makro,
stok mikro, stok Fe, stok vitamin dan stok hormone terutama bila larutan stok
tidak disimpan terlalu lama (segera digunakan habis). Stok hormone dapat
disimpan antara 2-4 minggu, sedangkan stok hara dapat disimpan 4-8 minggu.
Dengan adanya larutan stok, pembuatan media selanjutnya hanya dengan teknik
pengenceran dan pencampuran saja.

Hasil pengamatan praktikum media MS dapat disimpulkan bahwa

keberhasilan dalam penggunaan metode kultur jaringan, sangat bergantung pada
media yang digunakan. Media kultur merupakan salah satu faktor penentu
keberhasilan. Media kultur merupakan komponen faktor lingkungan yang
menyediakan unsure pertumbuhan tanaman seperti unsur hara makro, unsur hara
mikro, karbohidrat, vitamin dan zat pengatur tumbuh, param-garam organik,
persenyawaan komplek alamiah, arang aktif dan bahan pemadat.

5.4. Sterilisasi dan Penanaman

Sterilisasi merupakan upaya yang dilakukan untuk menghilangkan semua
mikroorganisme (bakteri, jamur, parasit, dan virus) termasuk endospora bakteri
dari benda-benda mati atau instrumen yang menempel. Sterilisasi eksplan dapat
dilaksanakan dengan dua cara, yaitu secara mekanis dan secara kimiawi. Pada
proses penanaman, tahap pertama adalah persiapan alatdan sterilisasi alat dan
bahan serta ruangan. Selain itu diperlukan ketelitian yang tinggi untuk menjaga
agar tidak terjadi kekeliruan. Hal-hal yang perlu diperhatikan dalam penanaman
yakni sterilnya alat dan bahan yang digunakan, pemakaian safety clothes seperti
sarung tangan, masker, dan baju laboratorium dan teknik yang digunakan dalam
proses penanaman.

5.5. Pengamatan, Subkultur, dan Aklimatisasi

Pengamatan merupakan salah satu tahap dalam kultur jaringan, yang
memantau pertumbuhan dan perkembangan tanaman di botol kultur. Adapun
indikator-indikator yang diamati meliputi awal muncul kalus, warna kalus, tekstur
kalus, awal muncul tunas, tinggi tunas, dan jumlah tunas. Subkultur adalah usaha
untuk menggantikan media dalam kultur jaringan dengan media yang baru,
sehingga kebutuhan nutrisi untuk pertumbuhan kalus dapat terpenuhi.
Aklimatisasi merupakan penyesuaian kondisi tempat tumbuh dari lingkungan in
vitro ke tempat tumbuh di rumah kaca dan atau lapangan agar tanaman mampu
beradaptasi terhadap iklim dan lingkungan yang baru.
 DAFTAR PUSTAKA
Gunawan, L. W. 1988. Tehnik Kultur Jaringan Tumbuhan. Laboratorium Kultur
Jaringan Tanaman Pusat Antar Universitas (PAU) Bioteknologi Institut
Pertanian Bogor, Bogor.

Harzianum Rifai. Uruilal, C., Kalay, A. M., Kaya, E dan A. Siregar.

2012.Pemanfaatan Kompos Ela Sagu, Sekam dan Dedak Sebagai Media
Perbanyakan Agens Hayati Trichoderma. Jurnal Ilmu Budidaya Tanman
Vol 1 (1) : 2-3

Hermawan T & Na’iem 2006. Pengaruh Jenis Media dan Konsentrasi Zat
Pengatur Tumbuh Terhadap Perakaran pada Kultur Jaringan Cendana
(Santalum album Linn.). Jurnal Agrosains. Vol 19 (2) : 103109.

Indah, P. N., dan Ermavitalini, D. 2013. Induksi Kalus Daun Nyamplung

(Calophyllum inophyllum Linn.) pada Beberapa Kombinasi Konsentrasi
6- Benzylaminopurine (BAP) dan 2,4-Dichlorophenoxyacetic Acid (2,4-D).
Jurnal Sains dan Seni Pomits. 2(1).

Karjadi, A.K. dan Buchory A. 2008. Pengaruh Auksin dan Sitokinin terhadap
Pertumbuhan dan Perkembangan Jaringan Meristem Kentang Kultivar
Granola. J. Hort. 18(4):380-384, 2008.

Kurnianti, F.L. 2011. Konsentrasi Zat Pengatur Tumbuh NAA dan BAP terhadap
Pertumbuhan Biji Dendrobium capra J.J. Smith secara In Vitro. Jurnal
Tidak Terpublikasi.

Seswita, D. 2010. Penggunaan air kelapa sebagai zat pengatur tumbuh pada
multiplikasi tunas temulawak (Curcuma xanthorrhiza Roxb.) in vitro.
Jurnal Penelitian Tanaman Industri Vol 16(4): 135-140.

Wied, Hary Apriaji. (2004). Memproses Sampah. Jakarta : Penebar Swadaya

Yusnita. 2003. Cara memperbanyak tanaman secara efisien. Agro Media
Pustaka, Jakarta.