Mikrobiologi Farmasi (FMI61602) Kelompok I: Cara Inokulasi, Membuat Peremajaan Biakan dalam Media Padat dan Cair
Ahsanal Kasasiah, M.Si
Program Studi Farmasi
Universitas Singaperbangsa Karawang Tujuan • Menginokulasi bakteri E. coli, S. aureus, dan B. subtilis pada medium padat dengan metode zigzag dan inokulasi bakteri E. coli pada medium cair secara aseptic. Medium • Medium padat : Nutrient agar • Medium cair : Nutrient broth • Cawan petri (metode zigzag) dan tabung reaksi (agar miring)
Bentuk Medium Padat Medium cair
Inokulasi
• Inokulasi dari medium padat ke padat (metode
zigzag) • Di cawan petri : E. coli dan S. aureus • Agar mring (tabung reaksi) : B. subtilis • Inokulasi dari medium padat ke cair : E. coli Praktikum Mikrobiologi Farmasi (FMI61602) Kelompok 2 : Uji Batas Mikroba
Ahsanal Kasasiah, M.Si
Program Studi Farmasi
Universitas Singaperbangsa Karawang Tujuan • Mengukur cemaran bakteri CFU/ml dari suatu sampel jamu gendong X Alur Kerja 1. Melakukan Pengenceran Berseri (Serial Dilution) pada sampel
2. Melakukan Inokulasi dengan metode Spread
Alur Kerja
3. Inkubasi di 37 ℃ selama 24 jam
4. Mengamati dan Menghitung Koloni 5. Menentukan CFU/ml Beberapa aturan dalam menghitung koloni mikroba sesuai Standard Plate Count: 1. Cawan yang dipilih untuk dihitung adalah cawan yang mengandung 30-300 koloni 2. Beberapa koloni yang bergabung menjadi suatu kumpulan koloni dihitung 1 koloni 3. Deretan rantai koloni dihitung sebagai 1 koloni 4. Jika ada 2 cawan petri memenuhi syarat 30-300 maka dihitung rata- ratanya 5. Jika tidak ada yang diantara 30-300 maka diambil nilai yang terdekat dengan 30-300. Rumus CFU/ml 𝑏𝑎𝑛𝑦𝑎𝑘𝑛𝑦𝑎 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 • CFU/ml = 𝐹𝑎𝑘𝑡𝑜𝑟 𝑃𝑒𝑛𝑔𝑒𝑛𝑐𝑒𝑟𝑎𝑛 X 𝑣𝑜𝑙 𝑘𝑢𝑙𝑡𝑢𝑟 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑑𝑖𝑔𝑢𝑛𝑎𝑘𝑎𝑛 𝑑𝑖 𝑝𝑙𝑎𝑡𝑒 (𝑚𝑙) • Jumlah koloni/ml terdiri dari 2 angka di belakang koma, jika lebih maka dibulatkan. Praktikum Mikrobiologi Farmasi (FMI61602) Kelompok 3 dan 4: PENETAPAN RESPON MIKROBA TERHADAP ZAT ANTIMIKROBA
Ahsanal Kasasiah, M.Si
Program Studi Farmasi
Universitas Singaperbangsa Karawang Tujuan • Melakukan penetapan respon bakteri E. coli terhadap antibiotik kloramfenikol. • Melakukan penetapan respon bakteri S. lutea terhadap antibiotik kloramfenikol. Penetapan Potensi Antibiotik <131> 1. Cara Difusi ( Metode disk antibiotik) Prinsip Kerja • Membandingkan respon bakteri yang berbeda terhadap antibiotik • Sensitif • Intermediet • Resistan
Kelompok 3 : Bakteri Ecoli
Kelompok 4 : Bakteri S. Lutea Praktikum Mikrobiologi Farmasi (FMI61602)
Penggunaan mikroskop dan Pewarnaan bakteri Ahsanal Kasasiah, M.Si
Program Studi Farmasi
Universitas Singaperbangsa Karawang Prosedur Ambil sampel bakteri Tetesi kaca objek Sterilisasi kaca objek Flambir kaca objek 3x dengan aquadest dan letakkan di atas kaca objek
Tetesi preparat dengan Tetesi preparat dengan Tetesi preparat dengan
dekolourizer, diamkan iugol/iodin, diamkan kristal violet, diamkan Keringkan preparat selama 10 detik lalu selama 1 menit lalu selama 1 menit 30 detik bilas bilas lalu bilas
Tetesi preparat dengan
Pengamatan safranin, diamkan selama Amati preparat 1 menit lalu bilas dan dengan mikroskop (foto, morfologi sel, tunggu sampai kering warna yang dihasilkan) Prosedur
Digunakan untuk Adanya mordant, zat Digunakan untuk
memberikan warna pada warna akan lebih sukar menghilangkan zat warna sel tercuci. dari sel bakteri.