OKSIDASI BIOLOGIS DAN ANTIOKSIDAN

1. PENDAHULUAN
Prinsip reaksi oksidasi-reduksi merupakan konsep penting yang mendasari sifat
oksidasi biologis. Secara kimia, oksidasi adalah pengurangan elektron, sedangkan reduksi
adalah penambahan elektron. Zat yang memberi elektron disebut reduktor (donor) dan zat
yang menerima elektron disebut oksidator.
Menurut bioenergetika oksidasi adalah reaksi oksidasi reduksi sebagai pembebasan
energi di dalam sel untuk proses kehidupan sel tersebut dan disimpan dalam bentuk ATP. Ada
dua aspek yang terlibat pada reaksi oksidasi, pelepasan hidrogen dan hilangnya elektron.
Setiap oksidasi disertai dengan pengurangan elektron.

2. TUJUAN PRAKTIKUM
1. Mengamati reaksi oksidasi reduksi
2. Mengamati proses oksidasi
3.Menjelaskan mekanisme kerja vitamin C dan E sebagai
antioksidan 4.Menjelaskan mekanisme terbentuknya radikal bebas
5. Mengklasifikasikan antioksidan

3 PERCOBAAN
3.1 Laktat dehidrogenase dalam ragi
Tujuan:
Mengetahui peristiwa oksidasi-reduksi berdasarkan aktivitas enzim laktat
dehidrogenase terhadap substratnya asam laktat
Reagen dan bahan :
Tabung reaksi, pipet tetes, suspensi ragi (yeast), metilen blue 0,02%, sodium laktat,
parafin
Prosedur:
Siapkan 2 tabung reaksi, yang diisi dengan 3 mL suspensi ragi dan 1 ml metilen blue
0,02%. Khusus tabung pertama ditambahkan 2 ml sodium laktat 5%. Kocok pelan. Lapisi
permukaan tabung dengan parafin, panaskan dalam penangas 38 oC. Amati perubahan warna
yang terjadi.
3.2. Uji
Schardinger
Tujuan :
Mengamati peristiwa reduksi berdasarkan aktivitas enzim laktat dehidrogenase dalam
susu.
Alat dan bahan :
Tabung reaksi, pipet tetes, metilen blue 0,02%, formaldehid 0,4%, susu segar, Pasteurized milk
(susu yang telah dipanaskan sampai 70oC)
Prosedur:
Siapkan 2 tabung reaksi. Tabung pertama diisi 2 ml susu segar, tabung kedua diisi 2 ml
pasteurized milk. Masing-masing tabung ditambahkan 3 tetes metilen blue 0,02% dan Sodium
laktat 5% sebanyak 1 mL. Campur dengan baik, panaskan dalam penangas 60oC, selama 30
mnt. Amati perubahan warna yang terjadi!

3.3. Uji Oksidase dan Pengaruh Vitamin

` Tujuan:
1. Memperlihatkan proses oksidasi senyawa fenol oleh polifenol oksidase (PPO) di
dalam bahan
2. Memperlihatkan efek antioksidan vitamin C dan E terhadap oksidasi fenol oleh
PPO Alat dan Bahan:
Tabung reaksi, pipet tetes, mortir, stamper, pisau, buah-buahan (pisang, kentang, dll),
larutan fenol 1 %, larutan vitamin C, larutan vitamin E
Prosedur:
Sampel (kentang/ apel/ buah lain) dikupas, dikupas, dilumat/dihancurkan, diambil
sarinya, dimasukkan ke dalam 3 tabung reaksi sebanyak 3-5 mL. Semua tabung ditambahkan
Larutan fenol 1% sebanyak 10 tetes. Khusus tabung 1 ditambahkan larutan vitamin C 10 tetes,
tabung 2 ditambahkan vitamin E 10 tetes. Kocok pelan sampai homogen. Perhatikan
perubahan warna ! dilakukan dengan cepat, untuk menghindari kesalahan hasil

3.4. Uji sifat antioksidan vitamin C terhadap gugus fenol

Tujuan:
1. Memperlihatkan proses oksidasi senyawa fenol oleh polifenol oksidase (PPO) di
dalam kentang
2. Memperlihatkan efek antioksidan vitamin C dan E terhadap oksidasi fenol oleh PPO
Alat dan bahan :
Tabung reaksi, pipet tetes, pisau, buah-buahan (pisang, kentang, dll), larutan asam
askorbat
Prosedur:
Sampel (kentang/ apel/ buah lain) dikupas, disayat tipis, 2-3 potong dalam tabung
reaksi, ditambahkan larutan asam askorbat 1-2 mL pada tabung 1, larutan vitamin E 1-2 mL
pada tabung 2 sedangkan tabung 3 ditambahkan air suling dalam jumlah yang sama. Setelah ½
jam perhatikan perubahan warna buah

3.5. Uji sifat reduksi vitamin C terhadap reagen

benedict Tujuan :
Memperlihatkan proses reduksi vitamin terhadap reagen benedict yang mengandung ion
Cu++
Alat dan bahan :
Tabung reaksi, pipet tetes, larutan vitamin C, reagen, larutan glukosa
Prosedur:
Siapkan 2 tabung reaksi, yang masing-masing diisi reagen benedict sebanyak 2 mL.
Khusus tabung 1 ditambahkan larutan asam askorbat 4 tetes, sedangkan tabung 2
ditambahkan 4 tetes larutan glukosa. Didihkan dalam penangas 5 menit atau di api spritus 3
menit. Amati yang terjadi!
 Tabel 1. Hasil Pengamatan Uji Oksidasi Biologis
(uji Laktat Dehidrogenase, Schardinger, Oksidasi dan Pengaruh Vitamin)
Reaksi Uji Hasil Pengamatan Kesimpulan
Laktat dehidrogenase
dalam ragi
Tabung 1 Sebelum pemanasan: biru
tua
Sesudah pemanasan: biru
muda pucat

Tabung 2 Sebelum pemanasan: biru

tua
Sesudah pemanasan: biru
tua

Schardinger
Tabung 1 Sebelum pemanasan: biru
muda
Sesudah pemanasan: biru
muda pucat

Tabung 2 Sebelum pemanasan: biru

muda
Sesudah pemanasan: biru
muda

Uji oksidasi dan

pengaruh
vitamin Tabung 1
( )

Tabung 2 ( )

Tabung 3 ( )

Tabung 1 ( )

Tabung 2 ( )

Tabung 3 ( )

Tabung 1 ( )
 Tabung 2 ( )

Tabung 3 ( )

Tabel 34. Hasil Uji Sifat Antioksidan dan Reduksi Vitamin

Reaksi Uji Hasil Pengamatan Kesimpulan
Uji sifat anti-oksidan
Tabung 1 ( )

Tabung 2 ( )

Tabung 1 ( )

Tabung 2 ( )

Uji sifat reduksi vitamin

C
Tabung 1 (vit C)

Tabung 2 (glukosa)

Tabung 1 ( )

Tabung 2 ( )

TUGAS BACA

1. Jelaskan apakah yang dimaksud dengan radikal bebas dan faktor-faktor apakah yang
memicu terbentuknya radikal bebas!
..............................................................................................................................................................................................
..............................................................................................................................................................................................
............................................................................................................................................. .................................................
 ..............................................................................................................................................................................................
..............................................................................................................................................................................................
..............................................................................................................................................................................................
..................................................................................................................................................... .........................................
............................................................................
2. Jelaskan apakah yang dimaksud dengan antioksidan dan klasifikasi antioksidan!
..............................................................................................................................................................................................
..............................................................................................................................................................................................
..............................................................................................................................................................................................
..............................................................................................................................................................................................
..............................................................................................................................................................................................
...................................................................................................................................... ........................................................
...........................................................................................
3. Jelaskan mekanisme kerja vitamin C dan flavonoid sebagai antioksidan!
..............................................................................................................................................................................................
..............................................................................................................................................................................................
.......................................................................................................................................................................... ....................
..............................................................................................................................................................................................
..............................................................................................................................................................................................
..............................................................................................................................................................................................
..........................................................................................

Mengetahui
Dosen Pengasuh

( )