MANDIRI

LAPORAN

PENELITIAN MANDIRI

INDUKSI KALUS JARINGAN ENDOSPERM JERUK KALAMANSI PADA

BEBERAPA JENIS MEDIA DAN ZAT PENGATUR TUMBUH UNTUK
MEMPEROLEH JERUK TRIPLOID TANPA BIJI

Tim Pengusul:

Dr. Ir. Reny Herawati, MP

Dr. Hesti Pujiwati, SP, M.Si

UNIVERSITAS BENGKULU
Desember 2016
ii
iii
 DAFTAR ISI

Hal

HALAMAN PENGESAHAAN .................................................................... ii

DAFTAR ISI .............................................................................................. iii

RINGKASAN ........................................................................................................ iv

BAB I. PENDAHULUAN ................................................................................ 1

1.1. Latar Belakang ...................................................................... 2
1.2. Tujuan Penelitian ................................................................... 3

BAB II. TINJAUAN PUSTAKA ....................................................................... 4

BAB III. METODE PENELITIAN ...................................................................... 6

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................ 8

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ......................................................... 11

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................ 11

LAMPIRAN-LAMPIRAN ................................................................................... 14

1. Biodata Ketua dan Anggota Peneliti …................................................... 15

iv
 RINGKASAN

Jeruk Kalamansi (Citrus mitis) merupakan jenis buah jeruk yang berkembang
pesat di Bengkulu, berbau harum, dan memiliki rasa yang asam ketika sudah masak,
dan pahit ketika masih mentah. Jeruk Kalamansi dicanangkan sebagai produk
unggulan di Bengkulu karena tingginya daya jual dan cepatnya masa produksi buah,
yaitu enam bulan setelah masa tanam. Jeruk kalamansi banyak dibudidayakan di
Bengkulu, dan diproduksi secara besar-besaran untuk dijual dalam hasil olahan
bernama sirup kalamansi. Oleh karena itu, pemacuan produksi jeruk lokal akan
memiliki urgensi penting karena disamping untuk meningkatkan pendapatan
masyarakat, kesempatan kerja, konsumsi buah dan juga meningkatkan pendapan
daerah setempat. Namun demikian jenis jeruk tersebut masih mempunyai biji yang
relatif banyak (6-13 biji per buah), sehingga menyulitkan dalam proses pengolahan
terutama sirup kalamansi sebagai salah satu produksi khas daerah Bengkulu. Salah
satu cara yang dapat dilakukan adalah membuat tanaman triploid jeruk lokal tipe baru
tanpa biji (seedless) dengan warna yang menarik, dapat meningkatkan produktivitas,
mutu buah, dan daya saing di pasar global (Khan, 2008). Salah satu cara
pembentukan buah jeruk tanpa biji dapat dilakukan dengan kultur endosperm melalui
kalus (Gmitter et al., 1990; Raza et al., 2003).
Tanaman triploid akan menghasilkan buah tanpa biji karena
ketidakseimbangan perpasangan kromosom saat meiosis (Hoshino et al., 2011).
Keberhasilan embriogenesis somatik yang diinduksi dari jaringan endosperma
ditentukan oleh berbagai faktor (Hoshino et al., 2011). Faktor penentu
keberhasilannya antara lain tahap perkembangan jaringan endosperma dan formulasi
media. Embriogenesis somatik pada jaringan diploid jeruk Siam Simadu sudah
dikuasai dengan eksplan embrio nuselar pada media dengan penambahan BA dan
bahan organik (Husni et al., 2010), dan embriogenesis dari jaringan endosperma
triploid jeruk Siam Simadu juga telah dilaporkan oleh Kosmiatin et al. (2014), namun
embriogenesis somatik pada jeruk Kalamansi belum pernah dilaporkan, oleh karena
itu penelitian ini dilakukan untuk mendapatkan formulasi media induksi kalus
embrionik jeruk Kalamansi menjadi tanaman baru triploid tanpa biji melalui metode
embriogenesis somatik pada jaringan endosperm. Jika protokol untuk induksi
embriogenesis somatik dapat diperoleh dari penelitian ini, maka pengembangan
planlet melalui bioreaktor dapat segera dikembangkan untuk menghasilkan planlet
dalam jumlah besar dan dalam waktu yang relatif singkat.
Percobaan telah dilakukan di Laboratorium Bioteknologi Fakultas Pertanian
Universitas Bengkulu, mulai September 2016-Januari 2017. Media yang digunakan
dalam peneltian ini adalah media dasar MS dan MT (Murashige dan Tucker 1969)
dengan perlakuan berbagai jenis dan konsentrasi ZPT (GA dan BAP). Pengamatan
dilakukan terhadap jumlah dan persentase kultur yang steril, jumlah eksplan dan
persentase eksplan yang dapat membentuk kalus, dan tipe kalus yang dihasilkan.
Komposisi media MT yang diberi perlakuan 2 mL-1 GA3 + 0,25 mL-1 BAP,
kemudian diikuti oleh media MT yang diberi perlakuan 2 mL-1 GA3 + 0,25 mL-1
BAP merupakan formula terbaik untuk produksi kalus. Perlu dilakukan pelelitian
lanjutan untuk regenerasi kalus embrionik pada media tanpa zat pengatur tumbuh
(ZPT) dengan formulasi berbagai vitamin dan bahan organik.

v
 BAB I. PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang

Jeruk Kalamansi (Citrus mitis) merupakan jenis buah jeruk yang berkembang
pesat di Bengkulu, berbau harum, dan memiliki rasa yang asam ketika sudah masak,
dan pahit ketika masih mentah. Jeruk Kalamansi dicanangkan sebagai produk
unggulan di Bengkulu karena tingginya daya jual dan cepatnya masa produksi buah,
yaitu enam bulan setelah masa tanam. Jeruk kalamansi banyak dibudidayakan di
Bengkulu, dan diproduksi secara besar-besaran untuk dijual dalam hasil olahan
bernama sirup kalamansi. Oleh karena itu, pemacuan produksi jeruk lokal akan
memiliki urgensi penting karena disamping untuk meningkatkan pendapatan
masyarakat, kesempatan kerja, konsumsi buah dan juga meningkatkan pendapan
daerah setempat. Dengan makin meningkatnya jumlah penduduk, meningkatnya
pendapatan, dan kesadaran kebutuhan gizi masyarakat, maka permintaan buah jeruk
yang kaya mineral dan vitamin ini akan terus meningkat. Pada tahun 2010, kebutuhan
produksi buah jeruk diprediksi sebesar 2.355.550 ton dan jika produktivitasnya 17 -
20 ton per ha, maka pada tahun tersebut diperlukan luas panen kurang lebih 127.327
ha dari 67.883 ha luas panen yang tersedia pada tahun 2005. Penambahan luas areal
untuk mencapai total produksi yang telah ditetapkan hingga tahun 2010 diprediksikan
minimal 27.327 ha di luar tanaman yang belum berproduksi saat itu. Hingga tahun
2010 diperkirakan kebutuhan pengembangan areal baru seluas 30.060 ha. Dari luasan
ini, maka keperluan bibit jeruk yang bebas penyakit diperkirakan sebanyak
15.030.000 (populasi 500 bibit/ha) (Litbang Pertanian, 2005).
Buah jeruk kalamansi dapat dibekukan secara keseluruhan dan digunakan
sebagai es batu dalam minuman seperti teh atau ginger ale. Jus diekstraksi dengan
menghancurkan buah utuh untuk membuat minuman beraroma mirip dengan limun.
Minuman keras juga bisa dibuat dari buah utuh, dalam kombinasi dengan vodka dan
gula. Selanjutnya FEI (Rahman Said, 2010) mengemukakan Kalamansi umumnya
digunakan sebagai bumbu untuk masakan seperti bihon. Namun demikian jenis jeruk
tersebut masih mempunyai biji yang relatif banyak (6-13 biji per buah), sehingga
menyulitkan ketika akan digunakan sebagai jeruk peras atau produksi sirup.
Perbaikan mutu secara teknologi perlu dilakukan untuk meningkatkan kualitas
buah jeruk lokal sehingga dapat bersaing di pasar global. Salah satu cara yang dapat

1
 2

dilakukan adalah membuat tanaman jeruk lokal tipe baru tanpa biji (seedless) dengan
warna yang menarik (pigmented). Tidak terbentuknya biji dalam buah dapat
meningkatkan produktivitas, mutu buah, dan daya saing di pasar global (Khan, 2008).
Pembentukan buah jeruk lokal tanpa biji dapat dilakukan dengan cara perlakuan suhu
dingin, suhu panas, kultur endosperm melalui kalus (Gmitter et al., 1990; Raza et al.,
2003), hibridisasi somatik (Spiegel-Roy, 1996; Grosser dan Gmitter, 2005), radiasi
sinar Gamma (Spiegel-Roy, 1996), hibridisasi antarploidi (Spiegel-Roy, 1996; Raza
et al., 2003), dan rekayasa genetik (Spiegel-Roy, 1996; Raza et al., 2003).
Aplikasi metode regenerasi dan mikropropagasi tanaman jeruk telah banyak
dilakukan untuk mendapatkan tanaman jeruk tanpa biji, bebas virus, penyelamatan
embrio (Grosser dan Gmitter, 2005; Ali dan Mirza, 2006). Embriogenesis somatik
merupakan salah satu proses regenerasi tanaman dari sel somatik melalui serangkaian
proses pertumbuhan dan perkembangan yang menyerupai embriogenesis zigotik
melalui pentahapan proembrio, embrio tahap globular, tahap hati, tahap torpedo, tahap
kotiledon, pematangan dan perkecambahan (Gray, 2005). Jenis eksplan, genotipe,
keadaan fisiologi, dan komposisi media merupakan faktor yang menentukan dalam
regenerasi tanaman melalui embriogenesis somatik (Ozcan et al., 2001). Media MS
dan MT merupakan media kultur yang banyak digunakan dalam induksi kalus dan
regenerasi kalus menjadi tunas pada tanaman jeruk dengan penambahan 2,4-D, BA,
NAA, GA3, atau kombinasinya (Ali dan Mirza, 2006).
Endosperma merupakan jaringan tanaman yang bersifat triploid, karena
berasal dari fertilisasi dua inti polar (♀) dan satu sperma (♂) (Berger, 2003).
Endosperma jeruk siam bertipe inti bebas (nuclear endosperm), dimana endosperma
primer hasil fertilisasi ganda melakukan pembelahan inti tetapi tidak langsung
membentuk dinding sel. Selulerisasi sel endosperma berlangsung bertahap sehingga
perkembangan sel-sel endosperma tidak seragam. Keberagaman ini juga terjadi
karena endosperma berfungsi sebagai nourishing cell dan pelindung kehidupan
embrio. Pada jeruk Siam Simadu, setelah fertilisasi ganda, sel-sel haploid antipodal
tidak terdegradasi dan perkembangan embrio nuselar yang tidak bersamaan dengan
embrio zigotik dapat mengkontaminasi jaringan triploid endosperma (Kosmiatin,
2013). Metode untuk meregenerasikan satu sel triploid menjadi tanaman triploid
diperlukan untuk menghindarkan terbentuknya regeneran yang miksoploid.
Tanaman triploid akan menghasilkan buah tanpa biji karena
ketidakseimbangan perpasangan kromosom saat meiosis (Hoshino et al., 2011).
2
 3

Keberhasilan embriogenesis somatik yang diinduksi dari jaringan endosperma

ditentukan oleh berbagai faktor (Hoshino et al., 2011). Faktor penentu
keberhasilannya antara lain tahap perkembangan jaringan endosperma dan formulasi
media. Pada jeruk manis (C. sinensis) dan mandarin (C. reticulata), kultur
endosperma yang diisolasi dari buah umur 12 minggu setelah antesis berhasil
menginduksi pembentukan kalus, tetapi regenerasi tunas triploidnya belum dilaporkan
(Usman et al., 2008).
Embriogenesis somatik pada jaringan diploid jeruk Siam Simadu sudah
dikuasai dengan eksplan embrio nuselar pada media dengan penambahan BA dan
bahan organik (Husni et al., 2010), dan embriogenesis dari jaringan endosperma
triploid jeruk Siam Simadu telah dilaporkan oleh Kosmiatin et al. (2014). Embrio
genesis somatik pada jeruk Kalamansi belum pernah dilakukan, oleh karena itu
penelitian ini dilakukan untuk mendapatkan formulasi media induksi kalus dan
regenerasi eksplan tanaman jeruk RGL menjadi tanaman baru triploid tanpa biji
melalui metode embriogenesis somatik pada jaringan endosperm. Metode tersebut
dapat diaplikasikan dalam perbaikan tanaman jeruk untuk merakit tanaman jeruk
unggul tanpa biji yang memiliki nilai ekonomi yang tinggi.

1.2. Tujuan Penelitian

Tujuan Umum Penelitian

 Mendapatkan tanaman baru triploid tanpa biji hasil induksi embriogenesis
somatik
 Menghasilkan formula baru sebagai protokol untuk menginduksi kalus dan
regenerasi embrio somatik melalui kultur endosperm jeruk Kalamansi tanpa
biji
.

3
 4

BAB II. TINJAUAN PUSTAKA

Jeruk kalamansi berasal dari Republik Rakyat Tiongkok, kemudian menyebar

luas hingga ke wilayah Asia Tenggara, Malaysia, Indonesia, dan wilayah-wilayah lain
hingga ke Florida, Panama. Jeruk kalamansi memasuki wilayah Florida pada tahun
1900 atau akhir tahun 1800 melalui Chile. Negara yang paling besar memproduksi
jeruk kalamansi saat ini adalah Filipina (International Development And
Manufacturing, 2006). Para ahli tanaman holtikultura percaya bahwa jeruk kalamansi
adalah perpaduan (hibrida) dari jeruk keprok dan jeruk mandarin, atau jeruk keprok
dan kumquat, atau kumquat dan jeruk mandarin (International Development And
Manufacturing, 2006). Secara teknis, para ahli di Tiongkok pernah mengatakan
bahwa jeruk kalamansi adalah perpaduan antara Citrus reticulata dan Citrus japonica.
Namun, menurut penelitian, perpaduan antara sub-spesies sitrus (sitrat) itu telah
dibudidayakan begitu lama sehingga membuat asal-usul jeruk tersebut kabur. Nama
awal dari jeruk kalamansi ini adalah Citrus madurensis Loureiro, sebuah nama yang
diberikan oleh seorang pria bernama Loureiro yang menemukan buah ini di pulau
Madura, dekat Pulau Jawa. Namun ia mengklarifikasinya setelah diketahui asal-usul
aslinya di kemudian hari.

Gambar 1. Jeruk Kalamansi Bengkulu

Buah jeruk kalamansi memiliki kulit dengan permukaan halus dan berpori
minyak, berwarna kuning, atau berwarna hijau kekuning-kuningan. Besar jeruk
kalamansi berdiameter antara 3–4 cm. Buah tersebut sangat kaya akan bulir-bulir
sitrat yang mudah dipisahkan dan mengandung vitamin C. Satu buah jeruk kalamansi
memiliki kandungan karbohidrat 3%, mineral 1%, asam askorbat 0,1%, dan asam
sitrat 3%. Kulitnya kaya akan minyak esensial dan asam askorbat (0,15%)

4
 5

(International Development And Manufacturing, 2006), namun kandungan biji dalam

buah masih cukup tinggi yaitu 6-13 butir.
Pembentukan tanaman triploid untuk produksi buah tanpa biji dapat dihasilkan
dari jaringan endosperma yang diregenerasi secara embriogenesis somatik.
Embriogenesis somatik adalah proses regenerasi tanaman melalui pembentukan
struktur seperti embrio yang diinduksi dari sel-sel somatik atau gamet (Dodeman et
al., 1997). Embrio somatik secara fisiologi dan morfologi memiliki tahapan
perkembangan embrio yang sama dengan embrio zigotik (Deo et al., 2010). Dalam
pemuliaan modern, embriogenesis somatik sangat penting karena dapat
meregenerasikan satu sel tanaman yang sudah dimanipulasi baik dengan transformasi
maupun mutasi menjadi tanaman lengkap, sehingga sel tanaman tersebut dapat
diregenerasikan menjadi tanaman lengkap (Manrique-Trujillo et al., 2013; Gray,
2005), dan mengekspresikan perubahannya. Hampir seluruh sel kompeten tanaman
dapat diinduksi menjadi sel embriogenik karena sel tanaman memiliki kemampuan
totipotensi sel (Mujib et al., 2005).
Endosperma merupakan jaringan tanaman yang bersifat triploid, karena berasal
dari fertilisasi dua inti polar (♀) dan satu sperma (♂) (Berger, 2003). Endosperma
jeruk siam bertipe inti bebas (nuclear endosperm), dimana endosperma primer hasil
fertilisasi ganda melakukan pembelahan inti tetapi tidak langsung membentuk dinding
sel. Selulerisasi sel endosperma berlangsung bertahap sehingga perkembangan sel-sel
endosperma tidak seragam.
Keberagaman ini juga terjadi karena endosperma berfungsi sebagai nourishing
cell dan pelindung kehidupan embrio. Pada jeruk Siam Simadu, setelah fertilisasi
ganda, sel-sel haploid antipodal tidak terdegradasi dan perkembangan embrio nuselar
yang tidak bersamaan dengan embrio zigoti dapat mengkontaminasi jaringan triploid
endosperma (Kosmiatin, 2013). Metode untuk meregenerasikan satu sel triploid
menjadi tanaman triploid diperlukan untuk menghindarkan terbentuknya regeneran
yang miksoploid. Tanaman triploid akan menghasilkan buah tanpa biji karena
ketidakseimbangan perpasangan kromosom saat meiosis (Hoshino et al., 2011;
Chaturvedi et al., 2008).
Keberhasilan embriogenesis somatik yang diinduksi dari jaringan endosperma
ditentukan oleh berbagai faktor (Hoshino et al., 2011). Faktor penentu
keberhasilannya antara lain tahap perkembangan jaringan endosperma dan formulasi
media. Pada jeruk manis (C. sinensis) dan mandarin (C. reticulata), kultur
5
 6

endosperma yang diisolasi dari buah umur 12 minggu setelah antesis berhasil
menginduksi pembentukan kalus, tetapi regenerasi tunas triploidnya belum dilaporkan
(Usman et al., 2008). Embriogenesis somatik pada jaringan diploid jeruk Siam
Simadu sudah dikuasai dengan eksplan embrio nuselar pada media dengan
penambahan BA dan bahan organik (Husni et al., 2010), tetapi embriogenesis dari
jaringan endosperma triploid jeruk keprok Kalamansi belum pernah dilakukan. Secara
khusus penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan formulasi media untuk induksi
kalus embriogenik, pendewasaan dan perkecambahan serta pemanjangan planlet dari
jaringan endosperma jeruk Kalamansi.

BAB III. METODA PENELITIAN

Penelitian akan dilakukan di Laboratorium Bioteknologi Fakultas Pertanian

Universitas Bengkulu, mulai September 2016 - Januari 2017 (Tahun I). Bahan
tanaman yang digunakan sebagai sumber eksplan ialah endosperm jeruk Kalamansi
yang diambil dari buah jeruk muda berumur ± 4-6 minggu setelah anthesisi. Media
yang digunakan dalam peneltian ini adalah media dasar MS dan MT (Murashige dan
Tucker 1969) yang dimodifikasi dengan perlakuan berbagai jenis dan konsentrasi ZPT
(Husni et al., 2010; Sunyoto et al, 2010; Kosmiatin et al., 2014). Kombinasi
perlakuan disajikan pada Tabel 1 berikut ini.
Tabel 1. Kombinasi perlakuan untuk induksi kalus embrionik
No Jenis Media ZPT
-1
1 MS 2 mL GA3
2 MS 2 mL-1 GA3 + 0,25 mL-1 BAP
3 MS 2 mL-1 GA3 + 0,5 mL-1 BAP
4 MT 2 mL-1 GA3
5 MT 2 mL-1 GA3 + 0,25 mL-1 BAP
6 MT 2 mL-1 GA3 + 0,5 mL-1 BAP

Buah jeruk muda yang berumur 6 minggu, 8 minggu, dan 12 minggu setelah
anthesis digunakan sebagai sumber eksplan endosperm. Sterilisasi bahan tanaman
dilakukan dengan cara mencelup dalam larutan alkohol 70% setelah dicuci bersih
menggunakan detergen. Kemudian dibakar dengan api bunsen sampai apinya mati.
Cara tersebut dilakukan sebanyak tiga kali dan diletakkan di cawan petri. Endosperm
diisolasi dari biji di bawah mikroskop untuk memisahkannya dari embrio zigotik dan

6
 7

nuselar. Endosperm ditanam dalam botol, masing masing jenis jeruk yang digunakan
dikulturkan dalam 10 botol media, 3 endosperm setiap botol. Semua kultur disimpan
di ruang kultur dengan penyinaran 100 μmol/m2/s selama 16 jam dengan suhu 23-
27oC. Pengamatan dilakukan terhadap jumlah dan persentase kultur yang steril,
jumlah eksplan dan persentase eksplan yang dapat membentuk kalus, dan tipe kalus
yang dihasilkan. Penentuan tipe kalus yang dihasilkan dilakukan dengan cara
mengamati kalus secara mikroskopik menggunakan mikroskop (zoom stereo),
sehingga struktur kalus yang dihasilkan dapat dibedakan yang bersifat embriogen.

7
 IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

Induksi Pembentukan Kalus Embriogenik dari Jaringan Endosperma Jeruk

Kalamansi

Jaringan endosperma yang diisolasi dari buah jeruk Kalamansi adalah 12-14
minggu setelah antesis, sel-selnya sudah mulai membentuk dinding sel dan
membentuk jaringan endosperma yang kompak (Kosmiatin, 2013). Respon
endosperma pertama kali terlihat melalui perubahan warna eksplan dari bening
menjadi putih susu pada umur 8 minggu setelah dikulturkan. Sel-sel endosperma
kemudian membelah yang ditandai dengan bertambah besarnya volume eksplan,
kemudian membentuk kalus. Respon pembentukan kalus embriogenik pertama kali
pada umur 14 minggu setelah kultur ditampilkan pada gambar 2.

Gambar 2. Induksi kalus embrionik jaringan endosperm (A. Jaringan endosperm 8

minggu setelah dikultur; B. Inisiasi pembentukan kalus pada umur 14 minnggu
setelah kultur; C. Kalus embrionik telah berkembang; D. Beberapa kalus
embrionik telah berwarna hijau)

Komposisi media tumbuh terbaik untuk merangsang terjadinya pembentukan

kalus ialah media MT yang diberi perlakuan 2 mL-1 GA3 + 0,25 mL-1 BAP,
kemudian diikuti oleh media MT yang diberi perlakuan 2 mL-1 GA3 + 0,25 mL-1
BAP. Kalus yang terbentuk pada MT bersifat kompak dan berwarna putih kuning
muda (Tabel 1). Komposisi media MS dan MT yang hanya diberi GA tanpa

8
 9

memberikan respons terendah. Eksplan yang dikulturkan pada media MT yang hanya
diperkaya GA membentuk kalus yang secara morfologi kelihatan kurang kompak,
tidak berwarna hijau, jumlahnya sedikit, dan hanya tumbuh dari jaringan di tepi
eksplan. Pada media yang diperkaya dengan BAP dan GA menunjukkan pertumbuhan
kalus lebih kompak dan berwarna hijau. George dan Sherrington (1984), Wang dan
Chang (1987), Sunyoto et al. (1997), dan Sunyoto et al. (2002) menyatakan bahwa
penggunaan ZPT dari golongan dan media yang sama berdampak lebih baik jika
dibandingkan dengan pemakaian ZPT secara tunggal. Bila konsentrasi antara auksin
dan sitokinin di dalam jaringan eksplan yang dikulturkan berada dalam keadaan
seimbang, maka kalus terbentuk lebih cepat. Hal ini terbukti pada perlakuan yang
diberi GA dan BAP, yang secara seimbang dapat menginduksi kalus lebih cepat.
Tabel 2. Kombinasi perlakuan untuk induksi kalus embrionik
No Jenis Waktu Warna Struktur
Media ZPT terbemtuk kalus Kalus
(MST*)
1 MS 2 mL-1 GA3 18 putih agak
kompak
2 MS 2 mL-1 GA3 + 0,25 mL-1 BAP 13 kuning remah
3 MS 2 mL-1 GA3 + 0,5 mL-1 BAP 14 kuning remah
4 MT 2 mL-1 GA3 16 putih remah
5 MT 2 mL-1 GA3 + 0,25 mL-1 BAP 13 Hijau agak
kuning kompak
6 MT 2 mL-1 GA3 + 0,5 mL-1 BAP 13 putih remah

Selama pembentukan kalus, sel-sel yang belum terdiferensiasi mengalami

pembelahan secara cepat hingga terbentuk kalus yang kompak dan berwarna kuning
kehijauan. Lamanya pembentukan kalus dan jumlah kalus yang terbentuk pada jeruk
kalamansi diduga karena pembentukan endosperm tidak sempurna atau endosperm
sudah tua sehingga kuran tidak dapat berdifrensiasi dengan baik. Menurut Mu dan
Liu (1979), endosperm tidak terbentuk secara utuh pada persilangan interspesies,
karena kuantitas dan atau kualitas DNA penyusun genotip kedua spesies yang
disilangkan pun berbeda.
Pertumbuhan dan perkembangan kalus endosperm diawali dengan
pemanjangan atau elongasi sel-sel endosperm yang secara berangsurangsur
membentuk klorofil pada umur 3 minggu setelah kultur (MSK). Proses tersebut
diduga disebabkan karena pengaruh laju serapan ZPT oleh kalus embrioid yang
bersentuhan dengan media. Zat pengatur tumbuh tersebut selanjutnya ditranslokasikan

9
 10

ke seluruh jaringan eksplan untuk merangsang pertumbuhan kalus embrioid.

Memasuki minggu ke-4, sel-sel endosperm mulai berproliferasi di bagian pinggir
eksplan membentuk kalus dengan cepat. Semua sel-sel endosperm berubah menjadi
sel-sel kalus setelah umur 6 minggu. Perkembangan kalus ke arah pembentukan
embrio terjadi pada umur kultur 10 minggu. Sel-sel kalus yang kompak berubah
menjadi bulatan-bulatan yang bergerombol menyerupai telur ikan. Bhojwana dan
Razdana (1983) menyebutnya sebagai fase pembentukan embrio globular yang
selanjutnya berubah menjadi tonjolan-tonjolan yang menjulur ke berbagai arah, tetapi
dari tonjolan-tonjolan itu belum jelas apakah akan terbentuk tunas atau akar. Pada
endosperm yang berasal dari kalus spesies yang berbeda mulai terbentuk pada 5 MSK,
tetapi tidak semua endosperm yang dikulturkan membentuk kalus dan membentuk
globular dan embrio. Menurut Graitter et al. 1990, endosperm jeruk manis kurang
respons terhadap media dasar MT atau MS yang hanya ditambah BAP, tetapi sangat
respons terhadap kedua media dasar tersebut apabila ditambah dengan kinetin atau
GA3 dan ME. Kinetin berperan mendorong morfogenesis sel. Adanya kinetin yang
ditambahkan ke media tumbuh mengakibatkan fase transkripsi dan translasi RNA
berlangsung lebih cepat (Duncan dan Widhom 1990 dalamWijayani 2002).
Sepuluh MSK, kalus yang terbentuk semakin banyak terutama pada
endosperm yang terbentuk berwarna lebih hijau dan mampu memproduksi embrio.
Dengan berjalannya waktu, embrio yang terbentuk membesar yang diikuti dengan
tumbuhnya tunas dan akar (Gambar 2).
Berdasarkan Tabel 1, pembentukan kalus embriogenik yang diinduksi dari
jaringan endosperma cukup tinggi. Hal ini menunjukkan bahwa keragaman dalam
eksplan tinggi, karena endosperma merupakan jaringan yang mempunyai tahapan
perkembangan sel dan fungsi sel yang berbeda sehingga setiap sel memberikan respon
yang berbeda terhadap formulasi media. Perbedaan respon juga terjadi karena
keberadaan proembrio nuselar (diploid) dengan ukuran kurang dari 16 sel dan sel-sel
haploid antipodal yang ikut terkulturkan dengan jaringan endosperma yang diisolasi
dari buah yang berumur 11-13 minggu setelah antesis.
Ketersediaan bahan organik yang tinggi dalam medium dapat meningkatkan
akumulasi asam amino sebagai penyusun protein, sehingga akumulasi protein juga
turut meningkat. Pembentukan protein terutama protein simpanan dalam sel
dibutuhkan untuk membentuk ES (Deo et al., 2010). Penambahan bahan organik (CH

10
 11

dan ME) pada tanaman Dianthusdapat meningkatkan 1.5 kali pembentukan embrio
somatik (Pareek dan Kothari, 2003).
Perbedaan respon juga terjadi karena keberadaan proembrio nuselar (diploid)
dengan ukuran kurang dari 16 sel dan sel-sel haploid antipodal yang ikut terkulturkan
dengan jaringan endosperma yang diisolasi dari buah yang berumur 11-13 minggu
setelah antesis. Keberadaan proembrio dan antipodal ini dapat diamati pada preparat
kering endosperma dengan bantuan mikroskop invertedperbesaran 200x, tetapi tidak
teramati dengan mikroskop binokular perbesaran 40x (Kosmiatin, 2013).
Kalus yang telah terbentuk perlu dipindahkan ke media regenerasi untuk
mengecambahkan dan mendewasakan sehingga terbentuk planlet.

V. KESIMPULAN DAN SARAN

Komposisi media MT yang diberi perlakuan 2 mL-1 GA3 + 0,25 mL-1 BAP,
kemudian diikuti oleh media MT yang diberi perlakuan 2 mL-1 GA3 + 0,25 mL-1
BAP merupakan formula terbaik untuk produksi kalus. Formula media tersebut dapat
menginduksi saat pembentukan kalus lebih cepat, persentase pembentukan kalus lebih
banyak, struktur kalus kompak, dan kalus yang terbentuk berwarna hijau.
Kalus yang telah terbentuk perlu dipindahkan ke media regenerasi untuk
mengecambahkan dan mendewasakan kalus embrionik sehingga terbentuk planlet.
Perlu dilakukan pelelitian lanjutan untuk regenerasi kalus embrionik pada media tanpa
zat pengatur tumbuh (ZPT) dengan formulasi berbagai vitamin dan bahan organik.

DAFTAR PUSTAKA

Ali, S. and B. Mirza. 2006. Micropropagation of rough lemon (Citrus jambhiriLush.):

Effect of explant type and hormone concentration. Acta Bot. Croat.
65(2):137-146.

Badan Litbang, 2005. Prospek dan arah pengembangan Agribisnis jeruk. Badan
Litbang Pertanian. Kementerian Pertanian.

Berger, F. 2003. Endosperm: the crossroad of seed development. Curr. Opin. Plant
Biol, 6:45-50.

11
 12

Chaturvedi, R., M.K. Razdan, S.S. Bhojwani. 2008. An efficient protocol for the
production of triploid plants from endosperm callus of neem,Azadirachta
indicaA. Juss. J. Plant Physiol. 160. 557–564.

Deo, P.C., A.P. Tyagi, M. Taylor, R. Harding, D. Becker. 2010. Factors affecting
somatic embryogenesis and transformation in modern plant Breeding. The
South Pacific J. Nat. Appl. Sci. 28:27-40.

Dodeman, V.L., G. Ducreux, M. Kreis. 1997. Zygotic embryogenesis versus somatic

embryogenesis. J. Exp. Bot. 48:1493-1509.

Gmitter, F.G., Jr., X.X. Deng, and C.J. Hearn. 1990. Induction of triploid citrus plants
from endosperm calli in vitro. Theor. Appl. Genet. 80:785-790.

Grosser, J.W. and F.G. Gmitter. 2005. Application of somatic hybridization and
cybridization in crop improvement, with citrus as a model. In Vitro Cell Dev.
Biol. Plant 39:360-364.

Gray, D.J. 2005. Propagation from nonmeristematic tissues: Nonzygotic

embryogenesis. p. 187-200. InR.N. Trigiano and D.J. Gray (eds.) Plant
Development and Biotechnology. CRC Press LLC.

Husni, A., M. Kosmiatin, I. Mariska, dan C. Martasari. 2008. Studi isolasi protoplas
pada jeruk siam. Prosiding Seminar Nasional Jeruk. Yogyakarta, 13-14 Juni
2007. 472 hlm.

Husni, A., A. Purwito, I. Mariska, Sudarsono. 2010. Regenerasi tanaman jeruk siam
melalui embryogenesis somatic. J. Agrobiogen 6:79-83.

Hoshino, Y., T. Miyashita, T.D. Thomas. 2011. In vitroculture of endosperm and its
application in plant breeding: Approaches to polyploidy breeding. Sci. Hort.
130:1-8.

International Development And Manufacturing. 2006. Kalamansi. http://www.in-

cosmetics.com/__novadocuments/2520.

Khan, S.R.A. 2008. Citrus quality to meet global demand (Agri Overview).
Website:http:www.pakissan.com. [7 Agustus 2008].

Kosmiatin, M. 2013. Pembentukan tanaman triploid jeruk siam simadu (Citrus

nobilisLour) melalui kultur endosperma. Disertasi. Sekolah Pascasarjana.
Institut Pertanian Bogor. Bogor.

Kosmiatin, M., A. Purwito., GA. Wattimena, I. Mariska. 2014. Induksi

Embriogenesis Somatik dari Jaringan Endosperma Jeruk Siam (Citrus
nobilisLour.) cv Simadu. J. Agron. Indonesia 42 (1) : 44 – 51.

Manrique-Trujillo, S., D. Díaz, R. Reano, M. Ghislain, J. Kreuze. 2013. Sweetpotato

plant regeneration via an improved somatic embryogenesis protocol. Sci.
Hort. 161:95-100.

12
 13

Mujib, A., S. Banerjee, P.D. Ghosh. 2005. Origin, development and structure of
somatic embryos in selected bulbous ornamentals: BAP as inducer.p. 15-24.
InA. Mujib, J. Samac (Eds.). Somatic Embryogenesis, Plant Cell Monogr (2).
Springer, Verlag-Berlin Heidenbergh.

Ozcan, S., Babaoglu, and M. Sancak. 2001. Somatic embryogenesis, Bitki

Biyoteknoloji. Doku Kulturu ve Uygulamari, Selcuk Univ. 5:71-88.

Raza, H., M.M. Khan, and A.A. Khan. 2003. Sedlessness in citrus. Int. J. Agri. Biol.
5(3):388-391.

Spiegel-Roy, P. and E.E. Goldschmidt. 1996. Biology of Citrus. Cambridge

University Press. 221 p.

Sunyoto, S. Purnomo, dan Makful. 2010. Formula Media Kultur Endosperm Jeruk
Hasil Persilangan Antarklon Siem dengan Keprok dan Jeruk Besar. J.
Hort.20(4):332-34.

Usman, M., B. Fatima, K.A. Gillani, M.S. Khan, M.H. Khan. 2008. Exploitation of
potential target tissues to develop polyploids in citrus. Pak. J. Bot.40:1755-
1766.

13
 14

LAMPIRAN-LAMPIRAN

14
 15

Lampiran 1. Biodata ketua dan anggota Tim Pengusul

1. Ketua Peneliti

A. Identitas Diri

1 Nama lengkap dan gelar Dr. Ir. Reny herawati, MP

2 Jenis Kelamin
3 Jabatan Fungsional
4 NIP
5 NIDN
6 Tempat dan tanggal lahir
7 email
8 Nomor Telepon/Faks/HP
9 Alamat Rumah
10 Alamat Kantor
11 Nomor telepon/ Faks
12 Lulusan yang telah dihasilkan
13 Mata Kuliah yang diampu
Perempuan
Lektor/IVa
19650101 198903 2 002
0001016527
Peringsewu, 1 Januari 1965
Reny.herawati70@gmail.com
0811190863
Perum Unib Permai, Blok III No.30, Jl. WR.
Supratman, Bengkulu
Fakultas Pertanian UNIB
Jl. Raya Kandang Limun Bengkulu 38371
(0736) 21170-psw 216
S1=27 orang
1. Kultur Jaringan Tanaman
2. Bioteknologi Tanaman
3. Fisiologi Pasca Panen
4. Pengendalian Gulma
5. Dasar-dasar Agronomi
6. Fisiologi Tanaman

B. Riwayat Pendidikan

Uraian S1 S2 S3
Nama Perguruan Universitas Bengkulu Universitas IPB
Tinggi Padjadjaran
Bidang Ilmu Agronomi Ekofisiologi Bioteknologi
Tanaman
Tahun Masuk- 1984-1988 1991-1994 2005 - 2010
Lulus
Judul Skripsi/Tesis/ Pengaruh tingkat Pertumbuhan Pembentukan
Disertasi kemasakan buah, gulma, galur padi gogo
kadar air, dan pertumbuhan tipe baru toleran
fungisida terhadap dan hasil Al dan tahan blas
viabilitas benih kedelai (Glycine melalui kultur
kakao (Theobroma max L.) pada antera
cacao L.) tanah ultisol
yang diaplikasi
zeolit dan

15
 16

Uraian S1 S2 S3
metolaklor
Nama 1. Ir. Teddy Suparno, 1. Dr. Ir. Oktap 1. Prof.Dr.Ir.
Pembimbing/ M.Sc. Ramlan Bambang S.
Promotor 2. Ir. Puji Harsono Madkar, M.Sc Purwoko, M.Sc
2.Dr. Ir. Amir 2. Dr.Ir.Nurul
Hamzah S. Khumaida, MSi
3.Prof. Dr. Ir. 3. Dr.Ir.Iswari S.
Husen S, M.Sc Dewi
4. Dr.Ir. Buang
Abdullah, M.Sc

C. Pengalaman Penelitian dalam 5 Tahun Terakhir

No Thn Judul Penelitian PENDANAAN Jabatan
Sumber Jumlah pada
penelitian
2 2010 Perakitan galur padi gogo Hibah Rp 36.960.000,- Ketua
toleran kekeringan dan tahan Bersaing I Peneliti
blas berdaya hasil tinggi DP2M
varietas lokal Bengkulu
melalui kultur antera
3 2011 Perakitan galur padi gogo Hibah Rp 38.000.000,- Ketua
toleran kekeringan dan tahan Bersaing II Peneliti
blas berdaya hasil tinggi DP2M
varietas lokal Bengkulu
melalui kultur antera
4 2012 Perakitan galur padi gogo Hibah Rp 38.000.000,- Ketua
toleran kekeringan dan tahan Bersaing III Peneliti
blas berdaya hasil tinggi DP2M
varietas lokal Bengkulu
melalui kultur antera
5 2012 Perakitan galur padi sawah Hibah Rp 40.000.000,- Anggota
toleran tanah masam hasil Bersaing I Peneliti
persilangan padi lokal DP2M
Bengkulu Pendek x IR 78581
6 2013 Seleksi galur dari populasi Hibah Rp 36.000.000,- Anggota
hasil persilangan Pendek x IR Bersaing II Peneliti
78581 dalam rangka DP2M
perbaikan sifat padi gogo
adaptif lahan masam
7 2014 Seleksi galur dari populasi Hibah Rp 50.000.000,- Anggota
hasil persilangan Pendek x IR Bersaing III Peneliti
78581 dalam rangka DP2M
perbaikan sifat padi gogo
adaptif lahan masam

16
 17

D. Pengalaman Pengabdian Masyarakat dalam 5 Tahun terakhir

No Tahun Judul Penelitian PENDANAAN

Sumber Jumlah
1. 2011 Pengembangan Varietas unggul Mandiri Rp.1.500.000,-
tahan untuk pengendalian penyakit
kresek (blas) pada pertanaman padi
sawah

E. Pengalaman Penulisan Artikel Ilmiah dalam Jurnal dalam 5 Tahun terakhir

VOLUM
NAMA E,
NO JUDUL ARTIKEL ILMIAH
JURNAL NOMOR,
TAHUN
1. Pembentukan galur haploid ganda padi gogo dengan Bulletin Vol.36
sifat-sifat tipe baru melalui kultur antera. Agronomi No. 3
(Herawati, R., B.S. Purwoko, N. Khumaida, I. S. (Terakreditas
Dewi, B. Abdullah) Th. 2008
i B)
2. Keragaman genetik dan karakterisasi morfologi Jurnal Vol.37
galur haploid ganda padi gogo dengan sifat-sifat Agronomi No. 2
tipe baru hasil kultur antera. Indonesia Th. 2009
(Herawati, R., B.S. Purwoko, I. S. Dewi) (Terakreditas
i B)
3. Characterization of Doubled Haploid Derived from Jurnal Vol. 38 No.3
Anther Culture for New Type Upland Rice Agronomi Th. 2010
(Herawati, R., B.S. Purwoko, I. S. Dewi) Indonesia
(Terakreditas
i B)
4. Penyaji Poster pada IPB-Ku Seminar on ”Food, Poster 2011
Energy, and Water” 11 Februari 2011, by Director
International Studies Centre, Kasetsart University,
Bangkok, Thailand
5. Poster 3rd International Seminar Regional Network Poster 2011
on Poverty Eradication
6. Induksi kalus dan Regenerasi Tanaman pada Kultur Jurnal Akta Vol 18, N0.1
Antera Persilangan Padi Indica Varietas Lokal Agrosia Th. 2015
Bengkulu. (Herawati, R, Rustikawati, Inoriyah, E) (ISSN)

7. Keragaman Genetik dan Karakter Agronomi Galur Jurnal Akta Vol 18, N0.2
Haploid Ganda Hasil Kultur Antera untuk Padi Agrosia Th. 2015
Sawah dengan Sifat-sifat Tipe Baru” (Reny (ISSN)
Herawati).
8. Development of New Type Upland Rice Lines for Proceeding ISBN.978602
Resistance to Blast Desease through Anther Internasional 9071184
Culture” (Reny Herawati, Bambang S. Purwoko, Seminar and Th. 2016
Iswari S. Dewi) Expo on

17
 18

VOLUM
NAMA E,
NO JUDUL ARTIKEL ILMIAH
JURNAL NOMOR,
TAHUN
“Promoting
Local
Resources for
Food and
Health” 12-
13 October
2015

F. Pemakalah Seminar Ilmiah (Oral Presentation) dalam 5 Tahun terakhir

No Nama Pertemuan Ilmiah/Seminar Judul Artikel Ilmiah Waktu dan
Tempat
1. Internasional Seminar and Expo on Development of New Type 12-13
“Promoting Local Resources for Upland Rice Lines for October 2015
Food and Health” Resistance to Blast Desease di Universitas
through Anther Culture” Bengkulu

Semua data yang saya isikan dan tercantum dalam biodata ini adalah benar dan dapat
dipertanggungjawabkan secara hukum. Apabila di kemudian hari ternyata dijumpai
ketidaksesuain dengan kenyataan, saya sanggup menerima resikonya.
Demikian biodata ini saya buat dengan sebenarnya untuk memenuhi persyaratan
dalam pengajuan Penelitian Mandiri
Bengkulu, September 2016
Ketua Pengusul

(Dr. Ir. Reny Herawati, M.P)

NIP. 19650101 198903 2 002

18
 19

A. Identitas Diri
1. Nama Lengkap (dengan gelar) Hesti Pujiwati, SP. MSi
2. Jenis Kelamin Perempuan
3. Jabatan Fungsional Lektor
4. NIP 1197711212006042001
5 NIDN 0021117703
6. Tempat dan Tanggal Lahir Magelang, 21 November 1977
7. E-mail hesti_pujiwati@yahoo.co.id
8. Nomor Telepon/HP 085379043434
9. Alamat kantor Fakultas Pertanian UNIB
Jl WR Supratman, Bengkulu
10. Nomor Telepon/Faks 0736-21170/0736-21290
11. Lulusan yang telah dihasilkan S1=7 orang
12. Mata kuliah yang diampu 1. Dasar-dasar Agronomi
2. Ekologi Tanaman
3.Fisiologi dan Penanganan Pasca Panen
4. Produksi Tanaman Pangan
5. Budidaya Tanaman Pagan Alternatif

B. Riwayat Pendidikan
S1 S2 S3
Nama Perguruan Universitas Bengkulu Institut Pertanian -
Tinggi Bogor
Bidang Ilmu Agronomi Agronomi -
Tahun Masuk 1996 2001 -
Tahun lulus 2000 2004 -
Judul Skripsi/Tesis/ Pengaruh Pemberian Pupuk Studi Penerapan Sistem -
Disertasi Sulfomug dan Pupuk Budidaya dan Cara
Kandang Terhadap Pengendalian Gulmab
Pertumbuhan dan Hasil pada Pola Pertanaman
Kedelai (Glycine max (L.) Tumpangsari Kacang
Merril) pada Tanah Ultisol Hijau (Vigna radiata)
dan Padi (Oryza sativa
L.)
Nama Pembimbing/ Ir. Dotti Suryati, M.Sc Dr. Munif Ghulamahdi -
Promotor Ir. Kanang S Hindarto, Dr. Sandra Arifin Aziz
M.Sc Dr. Harris Burhan

C. Pengalaman Penelitian
Ketua/ Besarny
Sumber
Tahun Judul Penelitian anggota a Dana
Dana
Tim
2006 Jenis Bahan Tanam dan Anggota Dipa 5 jt
Pemupukan P Pada Universitas

19
 20

Pertumbuhan dan Hasil Jarak Bengkulu

Pagar (Jatropa curcas L.)
2007 Pertumbuhan dan Hasil Jarak Anggota PHK A2 30
Pagar Pada Berbagai Pola
Tanam di Lahan Marginal
2009 Peningkatan Produktivitas Anggota Hibah 40 jt
Genotipe Baru Kedelai Berbasis Kompetitif
Mekanisme Adaptasi Sesuai
Mendapatkan hara Fosfor Prioritas
Nasional
2009 Pengembangan Galur Mandul Ketua Hibah 44 jt
Jantan dalam Rangka Bersaing
Mendukung Produksi Benih Dikti
Padi Hibrida Nasional
(Pemanfaatan Plasma Nutfah
Lokal dan Penggunaan Teknik
Iradiasi Sinar Gamma) Tahun I
2009 Keragaan Pertumbuhan Ketua Dipa 7 jt
Vegetatif dan Generatif Padi Universitas
Lokal di Propinsi Bengkulu Bengkulu
2010 Pengembangan Galur Mandul Ketua Hibah 44 jt
Jantan dalam Rangka Bersaing
Mendukung Produksi Benih Dikti
Padi Hibrida Nasional
(Pemanfaatan Plasma Nutfah
Lokal dan Penggunaan Teknik
Iradiasi Sinar Gamma) Tahun II
2010 Pemurnian Padi Kultivar Lokal: Ketua Dipa 9 jt
Pertumbuhan dan Hasil Padi Universitas
Lokal Bengkulu
2011 Pengembangan Galur Mandul Ketua Hibah 50 jt
Jantan dalam Rangka Bersaing
Mendukung Produksi Benih Dikti
Padi Hibrida Nasional
(Pemanfaatan Plasma Nutfah
Lokal dan Penggunaan Teknik
Iradiasi Sinar Gamma) Tahun
III
2012 Seleksi galur dari populasi hasil Ketua Hibah 46,5 jt
persilangan Pendek x IR 78581 Bersaing
dalam rangka perbaikan sifat Dikti
padi gogo adaptif lahan masam
D. Pengalaman Pengabdian Kepada Masyarakat
Tahun Jenis/Nama Kegiatan Tempat
2010 Pemanfaatan Produk Pertanian Dengan Desa Harapan Makmur
Pembuatan Kue-kue yang Bergizi dan Kabupaten Bengkulu Tengah
Sehat Guna Menunjang Pendapatan
Keluarga di Desa Harapan Makmur
Kabupaten Bengkulu Tengan
2010 Peningkatan Produktivitas Lahan Sawah Desa Tanjung Terdana Kec.
20
 21

dengan Sistem Budidaya Padi Intensif di Pondok Kubang Kabupaten

Desa Tanjung Terdana Kec. Pondok Bengkulu Tengah
Kubang Kabupaten Bengkulu Tengah
2009 IbM Kelompok Tani Jarak Pagar di Desa Desa Padang Serai, Bengkulu
Padang Serai Bengkulu
2009 Pelatihan Pengolahan Ubi kayu pada Desa Pekik Nyaring Kecamatan
Petani di Desa Pekik Nyaring Pondok Kelapa Kabupaten
Kecamatan Pondok Kelapa Kabupaten Bengkulu Utara
Bengkulu Utara
2009 Penerapan Aneka Olahan Beras Ketan Desa Rimbo Recap Kabupaten
untuk Meningkatkan Keterampilan Rejang Lebong
Petani di Desa Rimbo Recap Kabupaten
Rejang Lebong
2008 Teknologi Penyediaan Bibit Okulasi Desa Kembang Seri, Kec.
Karet Untuk Meningkatkan Ketrampilan Talang Empat, Kab. Bengkulu
dan Pengetahuan Petani di Desa Utara
Kembang Seri, Kec. Talang Empat, Kab.
Bengkulu Utara

2007 Teknologi pengolahan cabe dan tomat Desa Sumber Urip, kec. Selupu
menjadi saos untuk meningkatkan nilai rejang
ekonomi dan pendapatan petani di desa
sumber urip, kec. Selupu rejang

E. Publikasi Artikel Ilmiah dalam Jurnal

Volume, Nomor, Nama
No Judul Artikel Ilmiah
Tahun Jurnal
1. Pertumbuhan dan Hasil Jarak Pagar Edisi Khusus Jurnal
pada Berbagai Pola Tanam di Lahan Dies Natalis ke- Ilmu-ilmu
Marjinal 26 UNIB No. 3, Pertanian
2007
2. Produktivitas Lahan dan NKL pada Vol. 12 No. 1 Jurnal Akta
Tumpang Sari Jarak Pagar dengan Januari-Juni 2009 Agrosia
Tanaman Pangan
3. Studi Keragaan Padi Lokal di Propinsi Edisi September Jurnal
Bengkulu pada Vase Vegetatif dan 2009-Februari Saintifik
Generatif 2010 Vol. VII
No.1
4 The Application of Peaty Mineral Soil Volume 17 No 3, Journal
Water in Improving the Adaptability of Oktober 2015 Agrivita ,
Black Soybean toward Aluminium
Stress on Tidal Mineral Soil with
Saturated Water Culture

21
 22

Semua data yang saya isikan dan tercantum dalam biodata ini adalah benar dan dapat
dipertanggung jawabkan secara hukum. Apabila dikemudian hari ternyata dijumpai
ketidaksesuaian dengan kenyataan, saya sanggup menerima sanksi.

Demikianlah biodata ini saya buat dengan sebenarnya untuk memenuhi salah satu
persyaratan dalam pengajuan Penelitian Mandiri

Bengkulu, September 2016

Pengusul,

Hesti Pujiwati, SP.MSi

NIP. 197711212006042001

22