DISUSUN OLEH :
ALLIFAH UMAMI KHOIRIDIYAH 201342201
FAJRIE PRASETYO 1913421004
RITA OKTAVIYANI HARIYANTI 2113423005
ZOLA PERMATASARI 2013422008
Puji syukur kami panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas limpahan berkatnya maka
dapat tersusun makalah karya tulis ilmiah ini. Kami juga mengucapkan terimakasih kepada Ibu Renny
Septiani Mokodongan, M.Si yang telah memberikan tugas ini kepada kami. Serta tim kelompok 3
kimia analisis yang menyusun makalah karya tulis ilmiah ini.
Penyusunan makalah karya tulis ilmiah ini dilakukan dengan melihat dan mengambil contoh
dari referen sisumber yang terpercaya dan diharapkan dapat membantu para pembaca dalam proses
belajar, sekaligus sebagai pengembangan ilmu pengetahuan.
Tentu penyusunan makalah karya tulis ilmiah ini masih jauh dari kata sempurna, maka dari
itu penyusun mengharapkan kepada pembaca untuk memberikan saran maupun kritikan yang
membangun.
KATA PENGANTAR............................................................................................................................2
DAFTAR ISI..........................................................................................................................................3
DAFTAR TABEL..................................................................................................................................4
BAB I PENDAHULUAN.......................................................................................................................5
A. Latar Belakang.............................................................................................................................5
B. Rumusan Masalah........................................................................................................................6
C. Tujuan Penilitian..........................................................................................................................6
D. Manfaat Penelitian.......................................................................................................................6
1. Manfaat Teoritis.......................................................................................................................6
BAB II TINJAUAN PUSTAKA...........................................................................................................7
A. Kacang Tanah..............................................................................................................................7
1. Definisi Kacang Tanah............................................................................................................7
2. Jenis Tanaman Kacang Tanah.................................................................................................8
BAB III METODE PENELITIAN.....................................................................................................10
A. Metode Penelitian......................................................................................................................10
B. Prinsip........................................................................................................................................10
C. Prosedur Kerja...........................................................................................................................10
1. Pengumpulan sampel.............................................................................................................10
2. Bahan kimia...........................................................................................................................10
D. Teknik Pengumpulan Data dan Analisa Data............................................................................11
BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN..................................................................12
A. Hasil Penelitian..........................................................................................................................12
BAB V...................................................................................................................................................14
KESIMPULAN...................................................................................................................................14
DAFTAR PUSTAKA...........................................................................................................................15
DAFTAR TABEL
Tabel 1 Tabel 4.1. Tingkat kontaminasi aflatoksin dalam sampel minyak kacang.............................12
Tabel 2 Tabel 4.2. Jumlah (%) sampel minyak kacang tanah dari Peshawar,.......................................13
Daftar Gambar
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Aflatoksin (AFs) adalah racun alami yang dihasilkan oleh jamur milik genus Aspergillus,
terutama A. flavus Dan A. parasiticus. Racun ini adalah metabolit sekunder, yang dapat menyebabkan
efek teratogenik, mutagenik, dan karsinogenik akibat kontaminasi makanan. Sebagian besar AF
(termasuk AFB1, AFB2, AFG1, dan AFG2) terutama ditemukan dalam makanan nabati seperti sereal,
biji-bijian, kacang-kacangan, teh, kakao, rempah-rempah, minyak nabati, dll. (Gnonlonfin et al., 2013;
Gong et al., 2016; Idris et al., 2010).
Ada beberapa metode kimia dan fisik yang dapat digunakan untuk degradasi atau
pengurangan AF dalam minyak nabati. Iradiasi UV dan gamma adalah metode fisik yang paling
dikenal untuk tujuan ini. Agen kimia seperti larutan alkali, ozon, dan air elektrolisis juga diusulkan.
Namun, kemanjuran metode biologis belum terbukti untuk dekontaminasi AF dalam minyak nabati
(Javanmardi et al., 2020; Pankaj et al., 2018).
Kontaminasi AF dalam makanan adalah salah satu masalah keamanan pangan terpenting di
dunia. Kacang tanah (Arachis hypogaea) adalah tanaman yang penting secara ekonomi, tumbuh di
banyak bagian dunia. Kacang digunakan dalam pengolahan minyak, makanan manusia, di sector
pertanian, dan pakanternak. AF dapat diproduksi selanjutnya di kernel karena invasi jamur terutama
oleh jamura flatoksigenik (Bankole et al., 2005; Mutegi et al., 2009). Produksi dan perdagangan
kacang tanah menghadapi berbagai tantangan karena jamur penghasil mikotoksin. Sebagian besar
pengolah makanan, petani, dan penjamah makanan kurang memiliki pengetahuan tentang efek
produksi jamurp atogen, khususnya prevalensi AF. Banyak negara berkembang dan maju telah
menetapkan batas maksimum AF yang diperbolehkan pada komoditas pangan yang berbeda (Chang et
al., 2013; Mutegi et al., 2009; Rushing and Selim, 2019; Soler et al., 2010).
Pengetahuan dalam bidang penelitian ini sangat minim di wilayah Peshawar, Pakistan.
Kesadaran dan data mengenai risiko kesehatan yang terkait dengan pemanfaatan kacang tanah dan
minyak kacang tanah yang terkontaminasi AF tidak dilaporkan di wilayah ini. Penelitian ini
memberikan informasi dasar tentang frekuensi dan tingkat kontaminasi AF pada produk kacang
terpilih di daerah ini. Jadi, tujuan utama survey ini adalah untuk mendeteksi AF pada minyak kacang
tanah yang dipasarkan di Peshawar, Pakistan menggunakan Kromatografi Lapis Tipis (KLT).
B. Rumusan Masalah
1. Apa pengertian aflatoksin secarau mum?
2. Apa penyebab aflatoksin pada minyak kacang tanah ?
3. Bagaimana cara menggunak ankromatografi lapis tipis?
4. Bagaimana menganalisis terjadinya flatoksin ?
C. Tujuan Penilitian
1. Mendeteksi aflatoksin dalam minyak kacang tanah yang dipasarkan di Peshawar, Pakistan.
2. Menganalisis terkontaminasinya aflatoksin
D. Manfaat Penelitian
Adapun beberapa manfaat yang dapat diambil dari penelitian ini antara lain :
1. Manfaat Teoritis
Hasil penelitian ini diharapkan dapat menambah wawasan ilmu pengetahuan tentang
bagaimana mendeteksi aflatoksin dalam minya kacang tanah yang dipasarkan di
Peshawar, Pakistan.
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Kacang Tanah
Jenis tanaman kacang tanah yang ada di Indonesia ada dua macam yaitu tipe tegak
dan tipe menjalar. Tipe tegak adalah jenis kacang yang tumbuh lurus atau sedikit miring
keatas, buahnya terdapat pada ruas-ruas dekat rumpun, umurnya genjah atau berumur
pendek. Dan selain itu kemasakan buahnya serempak. Sedangkan tipe menjalar adalah
jenis yang tumbuh kearah samping, batang utama berukuran panjang, buahnya terdapat
pada ruas-ruas yang berdekatan dengan tanah, dan umumnya berumur panjang.
Varietas kacang tanah yang biasanya ditanam petani di sebagian wilayah Indonesia
adalah varietas gajah dan varietas banteng, namun sebenarnya masih banyak varietas
kacang tanah yang dapat dipilih dan dijadikan perbandingan sehingga manghasilkan hasil
yang paling optimal.
B. Aflatoksin
Aflatoksin adalah racun yang secara ilmiah dihasilkan dari produk metabolisme jamur
Aspergillus flavus, dan Aspergillus parasiticus. Kedua jamur ini pada kondisi yang sesuai,
tumbuh pada banyak tanaman pangan. Aflatoksin adalah sebuah mycotoxin yaitu racun yang
dihasilkan oleh jamur dan dinamai berdasarkan jamur yang menghasilkannya. Istilah
“aflatoksin” berasal dari “A” untuk aspergillus dan “fla” untuk spesies flavus digabungkan
dengan kata toxin. Mempunyai pengaruh yang buruk pada kesehatan hewan dan manusia
dengan efek keracunan akut seperti kerusakan hati/liver dan kanker.
Tipe umum Aflatoksin adalah B1, B2, G1, G2, M1, dan M2, dengan Aflatoksin B1 yang
paling beracun, dan biasanya yang dominan. Aflatoksin B1 adalah karsinogen yang sangat
berbahaya bagi manusia dan hewan.
Keberadaan Aflatoksin dipengaruhi beberapa factor tertentu dari lingkungan; karena itu
luas area kontaminasi akan berbeda oleh lokasi geografi, pelaksanaan agrikultur dan
agronomi, dan kerentanan komoditi terhadap invasi jamur sebelum masa panen, penyimpanan
dan masa pengolahan. Aflatoksin telah mendapat perhatian besar daripada mycotoxin yang
lain karena efek karsinogeniknya yang berbahaya pada hewan dan efek toksilogis pada
manusia.
KLT biasanya digunakan pada analisis kualitatif untuk menentukan jumlah komponen
campuran, atau penentuan suatu zat. Sehingga KLT merupakan teknik analisis yang cukup
mudah sudah praktis. HPTLC (High Performance Thin-Layer Cromatography) digunakan
untuk analisis secara kuantitatif. HPTLC merupakan salah satu pengembangan KLT. Akan
tetapi peralatan HPTLC sangat mahal dan cukup rumit. Oleh karena itu, perlu adanya
pengembangan analisis kuantitatif kromatografi lapis tipis dengan biaya yang relatif murah
dengan hasil yang akurat (Hess, Amber.2004).
Data yang diperoleh dari analisis dengan KLT adalah nilai Rf, nilai Rf berguna untuk
identifikasi suatu senyawa. Nilai Rf suatu senyawa dalam sampel dibandingkan dengan nilai
Rf dari senyawa murni. Nilai Rf didefinisikan sebagai perbandingan jarak yang ditempuh oleh
senyawa pada permukaan fase diam dibagi dengan jarak yang ditempuh oleh pelarut sebagai
fase gerak (Adam Wiryawan. 2008).
Gambar 3. 1 KLT Gambar 3. 2 KLT
BAB III
METODE PENELITIAN
A. Metode Penelitian
Selama September 2020 hingga Februari 2021, sebanyak 60 sampel minyak kacang
diperoleh dari toko retail dan pasar; 20-masing-masing dari tiga wilayah berbeda di Peshawar
(Universitas, Kota, dan Cantt), Pakistan. AFB1, AFB2, AFG1, dan AFG2 ditentukan dengan
menggunakan Kromatografi Lapis Tipis. Analisis data dilakukan dengan menggunakan SPSS
21.0.
B. Prinsip
Kromatografi lapis tipis (TLC) didasarkan pada perbedaan afinitas atau distribusi
komponen yang terdapat dalam campuran antara fase diam (stationary phase) dan fase
bergerak (mobile phase). Fase diam pada TLC biasanya berupa lapisan tipis bahan adsorben,
seperti silica gel atau alumina, yang dituangkan pada permukaan kertas atau plat logam dan
pelarut yang sesuai dengan jenis sampel sebagai fase gerak.
C. Prosedur Kerja
1. Pengumpulan sampel
Analisis data dilakukan dengan menggunakan SPSS 21.0 (versi Window, IL, USA).
Prosedur ANOVA satu arah dilakukan untuk signifikansi pada tingkat kepercayaan 95%
untuk ratarata distribusi konsentrasi AF dalam minyak kacang tanah. Untuk pemisahan
rata-rata uji jarak berganda Duncan digunakan. Selama September 2020 hingga Februari
2021, 60 sampel minyak kacang diperoleh dari toko retail dan pasar. 20 masing-masing
dari tiga wilayah berbeda di Peshawar (Universitas, Kota, dan Cantt), Pakistan. Sampel
dibawa ke Laboratorium Mikotoksin, Pusat Teknologi Pangan, Kompleks Laboratorium
PCSIR Peshawar dan disimpan pada suhu 4°C sampai analisis.
2. Bahan kimia
Tingkat kontaminasi AF yang terkandung dalam minyak kacang tanah dari tiga
wilayah utama wilayah Peshawar ditunjukkan pada Tabel 1. Tingkat prevalensi AFB 1,
AFB2, AFG1, dan AFG2 adalah 70% (42 dari 60), 51,7% (31 dari Dalam penelitian ini,
Merck (Darmstadt, Jerman), BDH (Poole Inggris) dan Sigma Chemicals (ST. Louis,
USA) bahan kimia kelas analitik digunakan. Itu Biopure (Tecknopark Tullin, Austria)
standar AFB1 (2,02 μg/ml), AFB2 (0,500 μg/ml), AFG1 (2,02 μg /ml ), dan AFG2 (0,500
μg/ml ) yang digunakan dibuat konsentrasi 1 μg/ml dengan cara diencerkan dalam
benzena/asetonitril (98:2; v/v), dibungkus dengan aluminium foil, dan disimpan pada
suhu 4 °C hingga analisis.
3. Analisis AF
Dalam survei ini, kadar AF dalam sampel ditentukan dengan menggunakan KLT.
Sampel uji ditimbang seberat 50 g dan diekstraksi dengan 250 ml aseton/air (85:15; v/v)
menggunakan blender selama 3 menit. Kemudian, sampel disaring dengan menggunakan
kertas saring whatman. Sampel filtrat (150 ml) dikumpulkan; kemudian ditambahkan 170
ml natrium hidroksida 0,02 N, 30 ml besi klorida, dan 3 mg basa tembaga karbonat.
Larutan dicampur dengan baik dan dilakukan penyaringan lagi, kemudian 150 ml filtrat
dipindahkan ke corong pisah. Asam sulfat (H2JADI4) 0,03% ditambahkan ke filtrat.
Sampel diekstrak dua kali dengan 10 ml kloroform. Juga, 100 ml 0,02 M kalium
hidroksida ditambahkan ke lapisan bawah kloroform dan dipindahkan ke corong pisah
lainnya. Corong pisah diaduk pelan-pelan selama 30 detik dan menunggu pemisahan
lapisan. Kemudian, lapisan kloroform yang lebih rendah dipindahkan ke dalam vial.
Selanjutnya, 8 ml lapisan kloroform dipanaskan pada suhu 45oC sampai kloroform
menguap. Untuk KLT, residu dilarutkan ke dalam 200 µl benzena/ asetonitril (98:2 v/v).
TLC satu dimensi pada pelat gel silika pra-lapis (Merck, Jerman) dilakukan untuk
identifikasi dan kuantifikasi AF total. Ruang jenuh kloroform/xilena/ aseton (60:30:10;
v/v/v) disiapkan dan pelat dikembangkan di dalam ruang jenuh. Untuk perbandingan
sampel AF dan standar, digunakan titik sinar ultraviolet 365 nm. Menggunakan 50%
H2SO4 semprot dan reaksi asam trifluoroasetat (TFA), AF sesuai (Scott, 1984).
A. Hasil Penelitian
Tingkat kontaminasi AF yang terkandung dalam minyak kacang tanah dari tiga wilayah
utama wilayah Peshawar ditunjukkan pada Tabel 1. Tingkat prevalensi AFB1, AFB2, AFG1,
dan AFG2 adalah 70% (42 dari 60), 51,7% (31 dari 60), 3,3% (2 dari 60), dan 0%, masing-
masing (Tabel 1). Rata-rata AF total adalah 8,59 μg/kg berkisar antara 0,12 hingga 55
μg/kg.
Tabel 1 Tabel 4.1. Tingkat kontaminasi aflatoksin dalam sampel minyak kacang
Aflatoksin Area Peshawar Frekuensi dari Rentang (μg/kg) Rata-rata±SD (μg/kg)
kontaminasi
Aflatoksin B1
Universitas 13/20 0,30-18 5,58±5,27B
Kota 15/20 0,12-22 5,34±6,40B
Cant 14/20 0,30-25 7,69±7,96A
Aflatoksin B2
Universitas 10/20 0,6-10 2,64±2,38B
Kota 9/20 0,2-11 2,88±3,22B
Cant 12/20 0,2-22 4,69±5,60A
Aflatoksin G1
Universitas 0/20 ND ND
Kota 0/20 ND ND
Cant 2/20 2.4-7.4 4,90±1,65
Aflatoksin G2
Universitas 0/20 ND ND
Kota 0/20 ND ND
Cant 0/20 ND ND
Total aflatoksin
Universitas 13/20 0,30-27 7,02±7,37B
Kota 15/20 0,12-29 7,03±9,26B
Cant 14/20 0,30-55 11,73±10,72A
ND: Tidak Terdeteksi - Berarti yang diikuti huruf yang sama tidak berbeda nyata menurut
Duncan Multiple Range Test (DMRT) pada taraf nyata 5%.
Tabel 2 Tabel 4.2. Jumlah (%) sampel minyak kacang tanah dari Peshawar,
* Jumlah (%) sampel yang terkontaminasi dengan kadar aflatoksin B >2 μg/kg1 sesuai dengan
peraturan Uni Eropa.
* * Jumlah (%) sampel yang terkontaminasi dengan kadar aflatoksin B >20 μg/kg1 menurut
Badan Pengawas Obat dan Makanan.
* * * Jumlah (%) sampel yang terkontaminasi dengan kadar aflatoksin total >4 μg/kg menurut
peraturan UE. - Berarti dengan huruf superskrip yang berbeda dalam satu kolom berbeda nyata
pada tingkat signifikansi 5%
BAB V
KESIMPULAN
Bankole SA, Ogunsanwo BM, Eseigbe DA (2005). Aflatoksin di Kacang tanah panggang kering
Nigeria.Kimia Pangan. 89: 503- 506. [DOI: 10.1016/j.foodchem.2004.03.004]
Chang AS, Sreedharan A., Schneider KR (2013). Kacang dan produk kacang: perspektif keamanan
pangan.Kontrol Makanan. 32: 296-303. [DOI: 10.1016/j.foodcont.2012.12.007]
Peraturan Komisi. (2001). Menetapkan level maksimum untuk tertentu kontaminan dalam bahan
pangan. Peraturan Komisi (EC) No: 466/2001.
Diao E., Shen X., Zhang Z., Ji N., Ma W., Dong H. (2015). Keamanan evaluasi aflatoksin B1dalam
minyak kacang tanah setelah detoksifikasi iradiasi ultraviolet dalam reaktor fotodegradasi.Jurnal
Internasional Ilmu dan Teknologi Pangan.50: 41-47. [DOI: 10.1111/ ijfs.12648]
Elzupir AO, Suliman MA, Ibrahim IA, Fadul MH, Elhussein AM (2010). Kadar aflatoksin dalam
minyak nabati di Negara Bagian Khartoum, Sudan.Penelitian Mikotoksin. 26: 69-73. [DOI:
10.1007/ s12550-010-0041-z]
Gnonlonfin GJB, Hell K., Adjovi Y., Fandohan P., Koudande DO, Mensah GA, Sanni A., Brimer L.
(2013). Ulasan tentangkontaminasi aflatoksin dan implikasinya di negara berkembang: perspektif
Afrika sub-Sahara.Tinjauan Kritis dalam Ilmu Pangan dan Gizi. 53: 349-365. [DOI: 10.1080/
10408398.2010.535718]
Gong YY, Watson S., Routledge MN (2016). Paparan aflatoksin dan efek kesehatan manusia yang
terkait, tinjauan studi epidemiologi.Keamanan makanan. 4: 14-27. [DOI: 10.14252 /
foodsafetyfscj.2015026]
Idris YMA, Mariod AA, Elnour IA, Mohamed AA (2010). Penentuan kadar aflatoksin dalam minyak
nabati Sudan. Toksikologi Pangan dan Kimia. 48: 2539-2541. [DOI: 10.1016/j.fct. 2010.05.021]
Iqbal SZ, Asi MR, Zuber M., Akram N., Batool N. (2013). Afkontaminasi racun dalam kacang tanah
dan produk kacang tanah tersedia secara komersial di pasar ritel Punjab, Pakistan.Kontrol
Makanan. 32: 83-86. [DOI: 10.1016/j.foodcont.2012.11.024]
Javanmardi F., Khodaei D., Sheidaei Z., Bashiry M., Nayebzadeh K., Vasseghian Y., Mousavi
Khaneghah A. (2020). Dekontaminasi aflatoksin dalam minyak nabati: tinjauan
komprehensif.Ulasan Makanan Internasional. [DOI: 10.1080/ 87559129.2020.1812635]
Liu R., Jin Q., Huang J., Liu Y., Wang X., Mao W., Wang S. (2011). Fotodegradasi aflatoksin B1dalam
minyak kacang.Riset dan Teknologi Pangan Eropa.232: 843-849. [DOI: 10.1007/ s00217-011-
1452-6]
Hess, Amber. 2004. Digitally-Enhanced ThinLayer Chromatography : An Inexpensive, New Technique
for Qualitative and Quantitative Analysis
Mutegi CK, Ngugi HK, Hendriks SL, Jones RB (2009). Sebelumnyalence dan faktor yang terkait
dengan kontaminasi aflatoksin kacang tanah dari Kenya Barat.Jurnal Internasional Mikrobiologi
Pangan. 130: 27-34. [DOI: 10.1016/ j.ijfoodmicro.2008. 12.030]
Ndiaye B., Diop YM, Diouf A., Fall M., Thiaw C., Thiam A., Barry O., Ciss M., Ba D. (1999).
Pengukuran dan kadar aflatoksin dalam minyak kacang peras skala kecil yang disiapkan di wilayah
Diourbel dan Kaolack di Senegal.Dakar Mediline. 44: 202-205.
Qi N., Yu H., Yang C., Gong X., Liu Y., Zhu Y. (2019). Aflatoksin B1dalam minyak kacang dari
Western Guangdong, China, selama 2016-2017.Aditif Makanan dan Kontaminan: Bagian B. 12:
45- 51. [DOI: 10.1080/19393210.2018.1544173]
Qin M., Liang J., Yang D., Yang X., Cao P., Wang X., Ma N., Zhang L. (2021). Analisis spasial
paparan diet aflatoksin pada kacang tanah dan minyak kacang tanah di berbagai wilayah di Cina.
Riset Pangan Internasional.140: 109899. [DOI: 10.1016/j.foodres.2020.109899]
Bergegas BR, Selim MI (2019). Aflatoksin B1: ulasan tentang metabolisme lisme, toksisitas, kejadian
dalam makanan, paparan pekerjaan, dan metode detoksifikasi.Toksikologi Pangan dan Kimia.124:
81-100. [DOI: 10.1016/j.fct.2018.11.047]
Schwartzbord JR, Coklat DL (2015). Kontaminasi aflatoksin di Produk kacang Haiti dan jagung serta
keamanan minyak yang diproses dari kacang tanah yang terkontaminasi.Kontrol Makanan. 56:
114- 118. [DOI: 10.1016/j.foodcont.2015.03.014] Scott PM (1984).
Efek pengolahan makanan pada mycotoxin.Jurnal Perlindungan Pangan. 47: 489-499. [DOI:
10.4315/0362-028X-47.6.489]
Soler CMT, Hoogenboom G., Olatinwo R., Diarra B., Waliyar F., Traore S. (2010). Kontaminasi
kacang olehAspergillus flavus dan aflatoksin B1di lumbung desa dan pasar Mali, Afrika
Barat.Jurnal Pangan, Pertanian dan Lingkungan. 8: 195-203.
Mulyono, Tri., dkk. 2012. Pengembangan Analisis Pot Secara Kuantitatif Pada Metode Kromatografi
Lapis Tipis menggunakan LabVIEW