LEMBAR 

KERJA MIKROBIOLOGI 2019‐2020  NILAI: 
NIM: B1A018105   
NAMA: IQBAL AUNI RAHMAN   
ROMBONGAN: IV   
KELOMPOK: 2  ASISTEN: RAHMAH ADINDA 
 
ACARA: ENUMERASI MIKROORGANISME DAN  NUR A 
ENDOENZIM 
 
III. ENUMERASI (PENGHITUNGAN JUMLAH MIKROORGANISME) 
 
1. Hasil plate count 
a. Pour plate method (metode tuang) 
Volume larutan hasil   Jumlah bakteri 
Kode  Faktor  Jumlah 
Pengenceran  pengenceran yang  per ml sampel 
cawan  pengencer  koloni 
dimasukkan ke cawan (mL)  (CFU/mL) 
‐3 3
Tanah  10    10   1ml  265   2,65 x 105 
Akar  10‐4  104  1ml  178  17,8 x 105 
Tanah  10‐3  103   1ml  110   1,1 x 105 
Tani  10‐4  104  1ml  40  4 x 105 
Tanah  10‐3   103  1ml  82  8,2 x 104 
Ternak  10‐4  104  1ml  76  7,6 x 105 
Tanah  10‐3   103  1ml  173   1,73 x 105 
Sawah  10‐4  104  1ml  27  2,7 x 105 
 
b. Spread plate method (metode sebar) 
Volume larutan hasil   Jumlah bakteri 
Kode  Faktor  Jumlah 
Pengenceran pengenceran yang  per ml sampel 
cawan  pengencer  koloni 
dimasukkan ke cawan (mL)  (CFU/mL) 
‐3 3
Tanah  10    10    0,1 ml  35   3,5 x 105
Akar  10‐4  104  0,1 ml  17  17 x 105
Tanah  10‐3   103   0,1 ml  17  1,7 x 105
Tani  10‐4  104  0,1 ml  8  8 x 105
Tanah  10‐3   103   0,1 ml  84   8,4 x 105
Ternak  10‐4  104  0,1 ml  29  29 x 105
‐3 3
Tanah  10   10    0,1 ml  33   3,3 x 105
Sawah  10‐4  104  0,1 ml  15  15 x 105
 
c. Apa keuntungan dan kerugian dari prosedur plate count method? 
Prosedur  plate  count  method  dinagai  menjadi  dua  yaitu  pour  plate  method  dan  spread  plate 
method.  Keuntungan  dari  pour  plate  method  adalah  diperoleh  koloni  tunggal,  hanya  sel  yang 
masih  hidup  yang  dihitung,  beberapa  mikroorganisme  dapat  dihitung  sekaligus,  dapat 
membedakan jenis koloni aerob, anaerob obligat dan anaerob fakultatif. Kekurangan dari pour 
plate  method  yaitu,  hasil  perhitungan  tidak  menunjukkan  jumlah  sel  mikroorganisme  yang 
sebenarnya,  hasil  kemungkinan  dapat  berbeda  di  kondisi  dan  medium  yang  berbeda,  koloni 
mikroorganisme  harus  tumbuh  pada  medium  padat  dan  tidak  boleh  menyebar,  memerlukan 

Team Teaching Mikrobiologi 2019‐2020 1 
 
 LEMBAR KERJA MIKROBIOLOGI 2019‐2020  NILAI: 
NIM: B1A018105   
NAMA: IQBAL AUNI RAHMAN   
ROMBONGAN: IV   
KELOMPOK: 2  ASISTEN: RAHMAH ADINDA 
 
ACARA: ENUMERASI MIKROORGANISME DAN  NUR A 
ENDOENZIM 
 
bahan  yang  tidak  sedikit  serta  waktu  yang  lama  dan  mudah  terkontaminasi.  Kelebihan  spread 
plate method hasil lebih akurat, mikroorganisme yang tumbuh  dapat tersebar dengan merata, 
hemat  bahan  karena  medium  yang  digunakan  sedikit,  koloni  lebih  mudah  dihitung,  dan 
diperoleh  koloni  yang  terpisah.  Kekurangan  dari  spread  plate  method  adalah  tidak  selektif 
sehingga menghasilkan perhitungan yang kurang akurat, sulit mengetahui kontaminasi, kurang 
praktis karena harus membuat media padat terlebih dahulu,  dan waktu yang  digunakan lebih 
lama. 
 
d. Bagaimana  cara  melaporkan  apabila  pada  cawan  memiliki  koloni  sebanyak  560  koloni?  Atau 
sebanyak 15 koloni? 
Cara melaporkan apabila pada cawan memiliki koloni sebanyak 560 koloni adalah dengan cara 
too numerous to count  (TNTC). TNTC digunakan jika dalam satu  wadah cawan berisi lebih dari 
300 koloni, sedangkan apabila cawan memiliki 15 koloni maka dalam pelaporannya diberi tanda 
too few to count (TFTC), tanda tersebut digunakan jika dalam satu cawan berisi kurang dari 30 
koloni. Pada kasus tersebut terlihat bahwa tidak ada satupun yang memenuhi kriteria antara 30‐
300 koloni, maka selama masih dapat dihitung, data dapat digunakan namun tidak memenuhi 
standar.   
 
2. Hasil most probable number (MPN) 
LBDS 10 ml  LBSS 1 ml  LBSS 0,1 ml 
Sampel  Tabung  Tabung  Tabung  Pembacaan  Nilai MPN 
1  2  3  1  2  3  1  2  3 
1  +  +  +  ‐  +  +  ‐  ‐  +  3‐2‐1  150 
2  +  +  +  ‐  ‐  +  ‐  +  +  3‐1‐2  120 
3  +  +  ‐  ‐  +  +  ‐  +  ‐  2‐2‐1  28 
                       
                       
                       
                       
                       
 
a. Jelaskan fungsi media Laktosa dan tabung Durham yang digunakan dalam uji MPN? 
Fungsi dari media laktosa adalah untuk mendeteksi kehadiran koliform di dalam air selain itu juga 
media  ini  dapat  dijadikan  indikator  adanya  bakteri  yang  dapat  memfermentasikan  laktosa 
dengan  terbentuk  gas  sebagai  tandanya.  Fungsi  tabung  durham  adalah  digunakan  untuk 
menagkap gas yang dihasilkan akibat dari fermentasi laktosa menjadi asam dan gas.  
 

Team Teaching Mikrobiologi 2019‐2020 2 
 
 LEMBAR KERJA MIKROBIOLOGI 2019‐2020  NILAI: 
NIM: B1A018105   
NAMA: IQBAL AUNI RAHMAN   
ROMBONGAN: IV   
KELOMPOK: 2  ASISTEN: RAHMAH ADINDA 
 
ACARA: ENUMERASI MIKROORGANISME DAN  NUR A 
ENDOENZIM 
 
 
b. Mengapa bakteri coliform digunakan sebagai indikator dalam pencemaran air? 
Bakteri coliform digunakan untuk indikator pencemaran air karena densitasnya berbanding lurus 
dengan  kualitas  air.  Bakteri  ini  dapat  juga  dapat  mendeteksi  patogen  pada  air  seperti  virus, 
protozoa  dan  parasit.  Selain  itu  bakteri  ini  memiliki  daya  tahan  yang  lebih  tinggi  daripada 
patogen serta lebih mudah diisolasi dan ditumbuhkan. 
 
3. Hasil direct counting menggunakan Petroff‐Hauser chamber atau haemocytometer 
Jumlah sel 
Kotak  Kotak  Kotak  Rata‐rata  Jumlah 
No.  Sampel  Kotak  Kotak 
kanan  kanan  kiri  jumlah sel  sel/ml 
kiri atas  tengah 
atas  bawah  bawah 
1  Sampel sel  3  4  4  6  6  4,6  11,5 x 109
yeast 
                 
                 
 
a. Apakah fungsi dari Petroff‐Hausser chamber atau haemocytometer pada metode direct counting? 
Petroff‐Hausser  chamber  atau  haemocytometer  pada  metode  direct  counting  adalah  untuk 
menghitung  jumlah  sel  bakteri  serta  partikel  lainnya  dalam  suatu  volume  cairan  tertentu  secara 
mikroskopis dan langsung sehingga dapat dihitung jumlah sel dalam cairan secara keseluruhan.  
 
b. Sebutkan kelebihan dan kekurangan direct counting menggunakan Petroff‐Hausser chamber atau 
haemocytometer! 
kelebihan dan direct counting menggunakan Petroff‐Hausser chamber atau haemocytometer adalah 
peralatan  yang  diperlukan  tidak  banyak  serta  dapat  dilakukan  dengan  cepat,  namun  kekurangan 
dari  alat  ini  adalah  sulit  menghitung  sel  yang  berukuran  sangat  kecil  hal  ini  disebabkan  oleh 
ketebalan  haemocytometer  serta  terdapat  kecenderungan  sel  bergerombol  sehingga  sukar  untuk 
membedakan sel‐sel individu. 
 
 
 
 
 
 
 
 

Team Teaching Mikrobiologi 2019‐2020 3 
 
 MBAR KERJA M
LEM MIKROBIOLOGGI 2019‐2020 NILAI: 
NIM
M: B1A0181055   
NAMMA: IQBAL AU
UNI RAHMAN   
ROM
MBONGAN: IV V   
KELO
OMPOK: 2  AHMAH ADINDA 
ASISTEN: RA
 
ACA
ARA: ENUMER RASI MIKROORGANISME DAN  NUR A 
END
DOENZIM 
 
 
IV. AKTIVVITAS ENZIMATIS DAN FAK KTOR LINGKU
UNGAN 
 
A. AKTIV VITAS ENZIMATIS 
1. Aktivvitas enzimatiis ekstraseluleer 
     
Kontrol  Bakteri uji  Kontrol Baktteri uji K
Kontrol Bakteri uji

     
     
B. Protteolitik 
A. Amilolitik  C. Lipolitik 
 
2. Aktivvitas enzimatiis intraselulerr 
Baakteri uji  Control  Bakteri uji  Control 
       
  Positif:     Positif: 
   

 
 
  Negatif:  Negatif: 
 
 
 
 
 
 
Uji katalase 
U Uji oksidase 
 
 
 

Team Teach ogi 2019‐2020 4 
hing Mikrobiolo
 
 LEMBAR KERJA MIKROBIOLOGI 2019‐2020  NILAI: 
NIM: B1A018105   
NAMA: IQBAL AUNI RAHMAN   
ROMBONGAN: IV   
KELOMPOK: 2  ASISTEN: RAHMAH ADINDA 
 
ACARA: ENUMERASI MIKROORGANISME DAN  NUR A 
ENDOENZIM 
 
3. Jelaskan  mengapa  terbentuk  zona  jernih  di  sekitar  koloni  untuk  hasil  positif  uji  amlilotik  dan 
proteolitik! Bandingkan dengan hasil kelompok Anda! 
_______________________________________________________________________________ 
_______________________________________________________________________________ 
_______________________________________________________________________________ 
_______________________________________________________________________________ 
 
4. Apa  yang  menjadi  sebab  terbentuknya  zona  berwarna  kuning  pada  medium  dan  bintik  merah  di 
bawah koloni pada uji lipolitik? 
_______________________________________________________________________________ 
_______________________________________________________________________________ 
 
5. Uji  katalase  positif  akan  menghasilkan  gelembung  udara  di  atas  ulasan  bakteri.  Mengapa  hal 
tersebut dapat terjadi? 
Uji  katalase  positif  akan  menghasilkan  gelembung  udara  di  atas  ulasan  bakteri  karena  bakteri 
memiliki enzim katalase yang digunakan untuk memcah hidrogen peroksida (H2O2) yang terbentuk 
dari  proses  respirasi  aerob  dan  bersifat  toksik  terhadap  bakteri,  menjadi  dihidrogen  oksida  (H2O) 
dan oksigen (O2). 
 
6. Bagaimanakah  interpretasi  positif  dan  negatif  dari  uji  oksidase?  Apa  yang  menyebabkan 
terbentuknya warna biru gelap pada uji oksidase? 
Interprestasi  positif  dan  negatif  dari  uji  oksidase  dapat  diketahui  dengan  melihat  kerja  enzim 
oksidase.  Enzim  oksidase  berperan  penting  dalam  proses  transport  elektron  selama  respirasi 
aerobik. Sitokrom oksidase akan mengkatalisis oksidasi dan reduksi sitokrom oleh molekul oksigen. 
Kemampuan  bakteri  memproduksi  sitokrom  oksidase  dapat  dilihat  dari  reaksi  yang  dihasilkan 
setelah  pemberian  reagen  oksidase  tetramethyl‐p‐phenylenediaminedihydrocloride  pada  koloni 
bakteri. Reaksi positif ditandai dengan pembentukan warna biru kehitaman pada isolate sementara 
pada reaksi negatif ditandai denagn tidak adanya perubahan warna. 
 

Team Teaching Mikrobiologi 2019‐2020 5