2, September
2017 http://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALKEPERAWATAN e-ISSN 2597-7172, p-
ISSN 2442-8108
ABSTRAK
keseimbangann osmotik merupakan kekuatan yang besar untuk osmotik merupakan kekuatan
memindahkan air agar dapat melintası membran sel. Bila cairan intraseluler dan Ekstra seluler dalam
keseimbangan & osmotik maka Perubahan yang relatif kecil pada konsentrası zat terlarut dalam cairan
ekstraseluler dapat menyebabkan perubahan luar biasa dalam voluing sel・ Macam -Inacam keseimbangan
cairan osmotik Yaittu cairan dapat melewati isotonik, jika suatu zat terlarut tidak dapat melewati sehingga
terjafi keseimbangan .Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui apakah ada pengaruh pemberian vitamin
E terhadap penurunan fragilitas osmotik dan krenasi eritorosit mencit (Mus musculus, L.) jantan dewasa
yang dipapari tuak. Apakah pengaruh radikal bebas yang ditimbulkan pemberian tuak yang mengandung
alkohol dapat ditangkal dengan pemberian vitamin E sebagai antioksidan.pada kondisi stress
oksidatif,radikal bebas akan menyebabkan terjadinya peroksidasi lipid membran sel dan merusak
organisasi membran sel. Penelitian ini menggunakan mencit jantan dewasa (Mus musculus, L.) sebanyak
30 ekor yang dibagi dalam 6 kelompok perlakuan.Kelompok pertama sebagai kontrol negatif yang diberi
dengan air aquades 0,5cc selama 30 hari,kelompok kedua diberi tuak yang yang terdapat kandungan
alkohol 20% sebanyak 0,5 ml/hari/ekor secara oral 15 hari pertama dan dilanjutkan dengan pemberian
aquades 0,5 ml/hari/ekor/oral 15 hari berikutnya, kelompok ketiga diberi tuak yang terdapat kandungan
alkohol 20% sebanyak 0,5 ml/hari/ekor secara oral selama 30 hari,kelompok 4 diberi tuak yang terdapat
kandungan alkohol 20% sebanyak 0,5 ml/hari/ekor secara oral selama 15 hari kemudian 15 hari
berikutnya dilanjutkan dengan pemberian vitamin E 0,25mg/gBB/h,kelompok 5 diberi tuak yang terdapat
kandungan alkohol 20% sebanyak 0,5 ml/hari/ekor secara oral selama 15 hari kemudian 15 hari
berikutnya tetap diberi tuak yang terdapat kandungan alkohol 20% sebanyak 0,5 ml/hari/ekor secara oral
yang diselingi waktu 1 jam dengan pemberian vitamin E 0,25mg/gBB/h,dan kelompok ke 6 diberi tuak yang
terdapat kandungan alkohol 20% sebanyak 0,5 ml/hari/ekor secara oral yang di selingi dengan waktu 1
jam dilanjutkan dengan pemberian vitamin E 0,25mg/gBB/oral selama 30 hari.Penelitian ini telah
mendapat persetujuan dari komite etik penelitian USU.
Kata kunci: Tuak, Alkohol, Fragilitas Osmotik Eritrosit, Vitamin E, Mencit Jantan.
jika diminum terlalu banyak dapat
PENDAHULUAN menyebabkan mabuk (Ikegami,1992).
Tuak merupakan hasil sadapan yang Alkohol juga terlibat sebagai penyebab dari
diambil dari mayang enau atau aren (Arenga beberapa sindroma hemolitik, beberapa di
pinnata) sejenis minuman yang merupakan antaranya berkaitan dengan hiperlipidemia dan
hasil fermentasi dari bahan minuman/buah penyakit hati yang parah (Masters, 2002).
yang mengandung gula. Tuak telah dikenal di Menurut Lailanita (2002), minuman
Indonesia sejak zaman dahulu dan beralkohol dapat menyebabkan fragilitas
mengandung alkohol (etil alkohol), sehingga eritrosit. Fragilitas eritrosit merupakan reaksi
membran eritrosit untuk melawan tekanan
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License. 189
Jurnal Ilmiah Keperawatan Imelda Vol. 3, No. 2, September 2017
http://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALKEPERAWATAN e-ISSN 2597-7172, p-ISSN 2442-8108
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License. 190
Jurnal Ilmiah Keperawatan Imelda Vol. 3, No. 2, September 2017
http://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALKEPERAWATAN e-ISSN 2597-7172, p-ISSN 2442-8108
(t-1) (n-1) ≥ 15. Dimana: t adalah jumlah rugosum L), tuak asli, tuak yang siap
perlakuan (dalam penelitian ini ada 6 dipasarkan, masing-masing sebanyak 2 liter.
kelompok perlakuan) dan n adalah jumlah Kemudian dibawa ke Laboratorium
ulangan perkelompok, maka jumlah n yang Biokimia/Kimia Bahan Makanan Universitas
diharapkan secara teoritis adalah 5 (6-1), Sumatera Utara untuk ditentukan kadar alkohol
sehingga jumlah keseluruhan hewan coba yang yang dikandungnya.
diperlukan dalam penelitian ini adalah 30 ekor
mencit jantan dewasa yang dipilih dari hasil Variabel Penelitian
perbanyakan untuk keperluan penelitian. 1. Variabel Independen: 1) Tuak (alkohol
Mencit ditempatkan ke dalam kelompok secara 20%): 2) Vitamin E (Merck).
random. 2. Variabel Dependen: 1) Fragilitas osmotik
eritrosit; 2) Hemolisis dan krenasi
Bahan dan Alat Penelitian Bahan Penelitian (keriput).
Hewan coba yang akan digunakan dalam
penelitian ini adalah mencit jantan (Mus Pelaksanaan Penelitian dan Pengamatan
musculus, L) strain DD Webster dewasa sehat Pelaksanaan Penelitian
yang berumur 8 - 11 minggu dengan berat 2035 Mencit ditempatkan di dalam kandang
gram. Mencit jantan dewasa merupakan hasil yang terbuat dari bahan plastik dengan ukuran
pengembangan hewan yang diperoleh dari 30 x 20 x 10 cm yang ditutup dibagian atasnya
Fakultas Matematika Ilmu Pengetahuan Alam dengan kawat kasa. Dasar kandang dilapisi
(FMIPA) Biologi Universitas Sumatera Utara dengan sekam padi setebal 0,5 s.d 1 cm dan
Medan, sebanyak 30 ekor mencit jantan diganti setiap 3 hari. Cahaya ruangan dikontrol
dewasa yang dipilih dari hasil perbanyakan persis 12 jam terang (pukul 06.00 s.d 18.00
untuk keperluan penelitian. Bahan Kimia yang wib) dan 12 jam gelap (pukul 18.00
dipergunakan dalam penelitian ini adalah, s.d 06.00 wib). Pakan (pelet komersial) dan
antara lain: Sediaan Vitamin E murni (Merck), minuman air leiding/aquades disuplai setiap
NaCl fisiologis, NaCl 3 %, NaCl 0,9 % larutan hari.
ureum 1,8 % dalam NaCl 0,9 %, larutan ureum
1,8 % dalam aquades ,antikoagulans (EDTA). Etika Penggunaan
Penggunaan dan penanganan hewan di
Alat-alat Penelitian laboratorium penelitian dilakukan dengan
Alat utama yang dipergunakan dalam aturan etika penelitian hewan. Penelitian
penelitian ini, antara lain: Jarum oval hewan yang diatur dalam Deklarasi Helsinki
(Gavage), spuit 1 ml, bak bedah dan dissecting untuk memperoleh “ethical clearance” dari
set, gelas arloji, timbangan, vertex mixer, labu komite etika dan komite ilmiah penelitian
ukur, labu Erlen Meyer, buret, objek glas, STIKes Imelda Medan, Sumatera Utara
mikroskop cahaya, tabung reaksi beserta Medan.
raknya.
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License. 191
Jurnal Ilmiah Keperawatan Imelda Vol. 3, No. 2, September 2017
http://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALKEPERAWATAN e-ISSN 2597-7172, p-ISSN 2442-8108
0
6 bulan 12 bulan
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License. 192
Jurnal Ilmiah Keperawatan Imelda Vol. 3, No. 2, September 2017
http://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALKEPERAWATAN e-ISSN 2597-7172, p-ISSN 2442-8108
pemberian tuak dengan pemberian vitamin E warna merah transparan pada semua
sebanyak 25 mg/hari/ekor secara oral; 6) bagian, selanjutnya tentukan kadar
Kelompok 6 (P5) = Kelompok perlakuan fragilitas eritrosit (Dharmawan, 2002).
kelima, terdiri dari 5 ekor mencit jantan dewasa 2. Hemolisis dan keriput: Diambil 3 tabung
yang diberi tuak (alkohol 20%) Prosedur reaksi lalu dibuat label A, B, dan C,
Pemeriksaan dan Pengamatan masing-masing tuangi 0,5 ml darah
Setelah perlakuan selama 12 bulan, mencit kemudian tambahkan pada tabung
masing-masing hewan percobaan dikorbankan B: 3 ml NaCl 3 %; C 3 ml aquades,
dengan cara dislokasi leher, selanjutnya homogenkan hingga tercampur rata
dibedah dan pengambilan sampel dara, (perhatikan warna darah sekarang) dan
kemudian dilakukan pengamatan sebagai tabung A dibiarkan sebagai
berikut: kontrol,tuangkan dari tabung A, B, dan C
1. Test fragilitas: Diambil 6 buah tabung masing-masing 1 ml. ke dalam 3 buah
reaksi yang bersih lalu diberi kanta gelas arloji, tempatkan di atas benda
penomoran yaitu nomor 1 sampai hitam (gelas arloji mana yang benda hitam
6,kemudian dimaasukkan kedalam tadi tampak). Selanjutnya tempatkan
masing -masing tabung reaksi tersebut diatas benda putih (kertas yang ada
larutan NaCl 5% sebanyak 0.8; 0,7; 0.6; tulisannya), perhatikan gelas arloji mana
0.5; 0.4; dan 0.3 mldengan memakai pipet yang tulisannya bisa dibaca, masing-
hisap kap. 1 ml.3., lalu aquadest masing setetes contoh darah diambil
ditambahkan ke masing-masing tabung dengan lidi dari gelas arloji tadi di atas
reaksi 4.2; 4.3; 4.4; 4.5; 4.6; dan 4.7 ml gelas benda dan tutup dengan gelas cover.
yang menggunakan pipet hisap kap. 5 Lihat di bawah mikroskop dengan
ml,.sehingga volume larutan dalam tiap pembesaran 400X, lalu perhatika hasilny
tabung masing-masing menjadi 5 ml. (tidak ada eritrosit, keriput dan atau
Selanjutnya dihomogenkan sehingga terlihat normal, dan gambar). Selanjutnya
tercampur dengan baik, kemudian darah diambildari tabung B 0,3 ml
ditempatkan di rak tabung. kadar NaCl tempatkan di tabung reaksi yang baru
dalam tiap tabung dihitung. Selanjutnya (kosong), tambah dengan aquades 3 ml
meneteteskan darah mencit sebanyak 3 homogenkan, darah diambil dari tabung
tetes ke dalam setiap tabung yang C, tempatkan pada tabung kosong
menggunakan pipet kap. 1 ml atau pipet 0,3 ml, tambah 3 ml NaCl 3%,
dropping. Lalu dihomogenkan sehingga homogenkan sehingga tercampur
tercampur dengan baik, tempatkan di rak dengan baik, selanjutnya tempatkan di
tabung (jangan sampai terjadi goncangan atas benda hitam dan putih, kemudian
pada tabung) ditunggu sampai 1 sediakan 2 tabung reaksi dengan label D
jam,,untuk mengamati pada lapis atas di dan E, masing-masing 0,3 ml darah m
setiap tabung. Jika ditemukan pada lalu tabung D tambahkan 3 ml larutan
tabung no. 1 lrt. Tampak 2 lapis, dimana ureum 1.6% dalam aquades dan tabung
lapis atas berwarna jernih (ini berarti E ditambah 3 ml larutan ureum 1.6%
darah tidak mengalami pecah dalam NaCl 0.9%.
membran/tidak hemolisis). Selanjutnya
diamati pada tabung mana yang lapis atas Analisis Data dan Pengujian Hipotesis
mulai berwarna merah (disinilah mulai Semua data dipresentasikan dalam
terjadinya pecah membran = titik bentuk rata-rata ± simpangan baku (rata-rata
fragilitas eritrosit). Bila pada tabung no. 6 ± SD). Dilakukan uji normalitas dan
terjadi hemolisis total maka ditandai homogenitas dari hasil penelitian didapatkan
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License. 193
Jurnal Ilmiah Keperawatan Imelda Vol. 3, No. 2, September 2017
http://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALKEPERAWATAN e-ISSN 2597-7172, p-ISSN 2442-8108
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License. 194
Jurnal Ilmiah Keperawatan Imelda Vol. 3, No. 2, September 2017
http://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALKEPERAWATAN e-ISSN 2597-7172, p-ISSN 2442-8108
dengan P3 atau asupan tuak (20% alkohol) Kemungkinan karena akumulasi alkohol dalam
selama 15 hari pertama dan hari ke 16 tuak yang terlalu banyak dan umur eritrosit
berikutnya diberikan vitamin E (25mg) sampai yang bertambah sesuai dengan lamanya
30 hari. Keadaan ini membuktikan adanya pemberian tual (30 hari). Kemudian juga, lama
pengaruh kuartif atau terapi dari vitamin E pemberian tuak telah melebihi siklus atau
pada eritrosit mencit sehingga adanya waktu paruh eritrosit dalam tubuh mencit,
penurunan persentase hemolisis yang terjadi sehingga penggantian eritrosit terganggu
yaitu dari 93,33±10,33% pada P2 menjadi karena adanya tuak yang diberikan. Seperti
33,33±10,33% pada P3. Kemungkinan hal ini hasil penelitian Evans (2000), yang
terjadi karen adanya kandungan alkohol pada menunjukkan bahwa umur eritrosit sangat
tuak dapat ditekan atau terjadi penekanan berpengaruh terhadap daya fragilitasnya.
aktivitas peroksidasi lipid pada membran sel Dalam uji fragilitas darah di laboratorium
eritrosit. Seperti pernyataan Wahyuningsih mulai terjadinya hemolisis awal (initial
(2009), bahwa vitamin E memiliki kemampuan hemolisis) ditentukan sebagai titik awal
untuk menghentikan peroksidasi lipid dengan fragilitas eritrosit, sedangkan apabila semua sel
cara menyumbangkan satu atom hidrogennya eritrosit mengalami lisis (total hemolisis)
dari gugus OH kepada lipid peroksil yang ditentukan sebagai fragilitas total, ketahanan
bersifat radikal sehingga menjadi vitamin E eritrosit untuk lisis dapat diukur dengan
yang kurang reaktif dan tidak merusak. Oleh meningkatkan konsentrasi larutan NaCl.
karena membran sel eritrosit kaya akan lipid Ketahanan sel darah merah untuk lisis ini
yang peka terhadap serangan radikal bebas dipengaruhi oleh volume dari sel darah merah.
yang disebabkan oleh alkohol dalam tuak,
maka yang lebih berperan untuk meminimalisir
dampak dari (ROS) Reactive Oxygen System
adalah vitamin E.
Hal ini sesuai dengan pendapat Indera
et.al., (2006), bahwa ROS dapat
mengakibatkan oksidasi pada
biomakromolekul penyusun membran eritrosit
dan begitu juga Suhartono et.al (2007) yang
menyebutkan radikal bebas dapat mengganggu
integritas sel dan dapat bereaksi dengan
komponen-komponen sel, baik komponen
struktural (molekul-molekul penyusun
membran) maupun komponen fungsional
(protein, enzim-enzim, DNA) dengan merusak
sel pada komponen protein, DNA dan
membran sel (poly unsaturated fatly acids),
sehingga membran selnya rusak dan
menyebabkan gangguan pada integritas sel.
Pemberian tuak yang berlalu lama
menyebabkan peningkatan persentase
hemolisis akibat fragilitas membran eritrosit.
Seperti yang terlihat pada P4
(60,00±12,65%), dimana tuak diberikan
selama 30 hari pada mencit dan berbeda tidak
nyata dengan P5 (53,33±16,33%).
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License. 195
Jurnal Ilmiah Keperawatan Imelda Vol. 3, No. 2, September 2017
http://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALKEPERAWATAN e-ISSN 2597-7172, p-ISSN 2442-8108
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License. 196
Jurnal Ilmiah Keperawatan Imelda Vol. 3, No. 2, September 2017
http://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALKEPERAWATAN e-ISSN 2597-7172, p-ISSN 2442-8108
sel dan berfungsi melindungi asam lemak pemberian Vitamin E dengan waktu yang
jenuh ganda dan komponen membran sel lain berbeda.
dari oksidasi radikal bebas dengan Ucapan terima kasih kepada Direktorat
memutuskan rantai peroksidase lipid dengan Kemenristekdikti yang telah memberikan
cara menyumbangkan satu atom hidrogen dari kesempatan kepada kami untuk mendapatkan
gugus OH pada cincinnya ke radikal bebas, hibah dosen peneliti pemula di tahun 2016 –
vitamin E berfungsi sebagai pelindung 2017.
terhadap peroksidasi lipid di dalam membran
(Suhartono, et.al., 2007).
Komposisi molekuler eritrosit lebih dari
setengahnya terdiri atas air (60%) dan sisanya
berbentuk substansi padat. Keseluruhan isi DAFTAR PUSTAKA
eritrosit merupakan substansi koloid yang Abdollahi M, Ranjbar A, Shadnia S, Nikfar S
homogen, sehingga sel bersifat elastis dan & Rezale A. (2004). Pestiscides and
lunak. Radikal bebas hanya berdampak pada Oxidative Stress: a review. Med
asam lemak terutama pada membran yang kaya sci.monit 10(6): 141-147.
fosfolipid sebagai asam lemak tak jenuh dan Almaster, S. (2004). Prinsip Dasar Ilmu Gizi.
juga protein yang dikenal sebagai peroksidasi Jakarta: Gramedia Pustaka Utama.
lipid yang menyebabkan terputusnya rantai Arief S. (2008). Radikal Bebas. Bagian Ilmu
asam lemak menjadi senyawa yang bersifat Kesehatan Anak Surabaya. On line at
toksik terhadap sel. ROS dapat mengakibatkan http://www.pediatrik.com/buletin/06224
oksidasi pada biomakromolekul penyusun 113752-x0zu6l.pdf [accessed 2 Februari
membran eritrosit (Indera et.al., 2006). 2008].
Chandrasoma, P dan Taylor, C. R. (2005).
KESIMPULAN Ringkasan Patologi Anatomi. Jakarta:
Pada penelitian ini ditemukan bahwa EGC.
dengan pemberian tuak yang terdapat alkohol Fleming, M., S. J. Mihic, dan R. A. Harris.
sebanyak 20% 0,5ml/hr/ekor, akan (2007). Etanol Dasar Farmakologi
menyebabkan kecendrungan terjadinya Terapi. Jakarta: EGC.
hemolisis darah, baik melalui fragilitas Gunawan, S. G. (2008). Farmakologi dan
osmotik eritrosit maupun krenasi. Hal ini Terapi. Jakarta: FKUI.
disebabkan karena tuak yang dipasarkan Guyton & Hall. (1997). Buku Ajar Fisiologi
dimasyarakat terdapat kandungan kadar Kedokteran. Terjemahan: Setiawan
alkohol 20% dapat menyebabkan terjadinya Irawati, Edisi Kesembilan. Jakarta: EGC.
gangguan hematologi. Namun pada penelitian Hariyatmi. (2004). Kemampuan Vitamin E
ini terbukti bahwa dengan pemberian Vitamin Sebagai Antioksidan Terhadap Radikal
E 0,25mg/gBB/hr/oral ditemukan penurunan Bebas Pada Lanjut Usia. Jurnal MIPA. 14
fragilitas dan krenasi eritrosit. (1): 52 – 60.
Huang H., Appel, L.J., Crot, K. D., Miller, E.
SARAN R., Mori, T. A. & Puddley, I. B. (2002).
Untuk mencegah terjdinya peningkatan Effects of Vitamin C and E On In Vivo
hemolisis darah baik melalui fragilitas dan Lipid Peroxidation: Results Of
krenasi eritrosi akibat radikal bebas maka Randomized Controlled Trial. Am J Clin
perlu asupa antioksidan yang memadai dalam Nutr, 76, 549-555.
tubuh dan diharapkan pada peneliti Kay I. (2002). Pengantar Fisiologi Hewan.
selanjutnya agar menambahkan dosis Terjemahan: Isnaeni W. Semarang:
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License. 197
Jurnal Ilmiah Keperawatan Imelda Vol. 3, No. 2, September 2017
http://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALKEPERAWATAN e-ISSN 2597-7172, p-ISSN 2442-8108
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License. 198