PERBANDINGAN IN YIYO DAN IN YI TRO TFCHh'IQ4'ES

PADA STUDI RUMINOLOGI'

FG HUE TER, ft. J. GIBBONS, JC SHAW, .\ n R. N. DOE' SGH

Bagian Peternakan dan Mikrobiologi, Dniversit yof Harlylnnd, € olIr.ye Park

RINGKASAN
Makalah ini membahas perbandingan dissimilasi bateri rumen in vivo dan in vitro dari
beberapa karbohidrat, asam amino, dan zat organik yang penting untuk metabolisme. Teramati
bahwa suksinat, De-aspartat, gluosa, dan maltosa mudah difermentasi oleh mikroorganisme
rumen, dan dihasilkan asam lemak volatil (YFA). Asam amino nL-lysine, DL-aIanine, dan
glieine tidak terdegradasi ke tingkat VFA yang cukup besar oleh bakteri rumen. Secara umum,
kesepakatan kualitatif antara eksperimen in vivo dan in vitro wash eell suspension (WC S)
diperoleh dengan DL-lysine, DL-alanine, dan glyeine, sedangkan studi in vivo menggunakan
Dmaspartate dan sueeinate setuju dengan studi in vitro WCS dari Sirotnak ct o/. (17, 18).
Dengan substrat glukosa dan maltosa, eksperimen WC S in vitro keduanya bervariasi dan tidak
sesuai dengan studi in vivo. Dengan demikian, teknik WCS tampaknya paling berguna untuk
mempelajari reaksi singkat satu atau dua langkah yang diperkirakan terjadi di rumen. Teknik
ini kehilangan signifikansi ketika mempelajari reaksi metabolisme multistep dan, dalam
kemudahan seperti itu, hasilnya harus ditafsirkan dengan hati-hati sampai diverifikasi oleh
percobaan in vivo, atau sampai studi lebih lanjut mengenai keterbatasan teknik WCS a, re
tersedia.

Investigasi lu vitro rumen 8ora memerlukan penggunaan salah satu, atau

kombinasi, dari metode berikut: Pemeriksaan mikroskopis, studi kultur murni bakteri,
studi enzim bebas belut 2 dari suspensi bakteri atau protozoa, dan berbagai jenis yang
disebut rumen buatan ('3). Karena penentuan asam lemak volatil ( YN'A) dalam rumen
, paling banter, hanyalah perkiraan kasar dari produksi dan tidak dapat digunakan
untuk studi yang tepat pada metabolisme bakteri rumen, Johns ct o/. (9d, Sijpesteijn
aIid Elsden (16), dan kemudian, Doetseh ct aI. (ñ) telah menggunakan buffered
washcd cell suspensions (WCS) dari bakteri rumen dalam upaya untuk menambahkan
persisi pada penelitian tersebut. Elsden (lb') menyatakan sebagai berikut keuntungan
untuk teknik ini : (a '1'he populasi dipelajari sebagai entitas di bawah kondisi yang
terkendali; (b) aksi enzimatik populasi dengan tidak adanya o1 substrat tambahan
dapat diabaikan; (cJ karena periode percobaan pendek dan pertumbuhan tidak
diizinkan, kemungkinan perubahan signifikan dalam komposisi atau populasi adalah
nihil, dan (d) pekerjaan skala kecil dimungkinkan yang memungkinkan penyelidikan
degradasi bahan mahal atau beracun.Teknik ini dan modifikasinya telah dijelaskan
oleh Doetsch

Studi ekstensif dilakukan oleh Doetsch ct a/. (^i), di mana teknik suspensi sel
yang dicuci digunakan untuk mempelajari reaksi katabolik bakteri rumen.
2'Pelarutan berbagai substrat dipelajari sehubungan dengan pelepasan gas dan
VFA. Studi serupa tentang asam amino, sintesis polisaeeharida, dan susu

Diterima untuk diterbitkan 6 Agustus 195 7.

' Lihat Artikel No. A641, Kontribusi No. 2824 dari Percobaan Pertanian Marylalid Stasiun.
6nl
652 F G.HUETER ET tL

pembentukan asam dilaporkan oleh Sirotnak ct a/. (17), Owa c/ A/. (d), dan Jurtshuk
dan Hueter (10). Studi selanjutnya dilakukan oleh Sirotnak ct aI. (18) tentang reaksi
disimilasi aspartat dari bakteri rumen 1. Hasilnya mengkonfirmasi temuan
sebelumnya dan, sebagai tambahan, menunjukkan jalur yang mungkin aye
klissimilasi atau aspartik asam.
Data yang dilaporkan dalam makalah ini berkaitan dengan perbandingan
dissirriilasi bakteri rumen in vivo dan in vitro dari beberapa karbohidrat, jaringan
amino, dan asam organik atau kepentingan metabolik. Tujuan untuk menentukan
sejauh mana disimilasi in vitro mewakili kejadian in vivo. Niat kami adalah untuk
membuat perbandingan simultan dan lebih langsung antara hasil in vivo dan in vitro
daripada beeii dorre sampai sekarang.

ExrEniiiENT.\L PROCEDA'RE

diiima/ /ecdiay. 'dua fistula permanen, nonlactatiig termasuk sapi tidak bunting
(.Tersey dan H olstein) digunakan sebagai hewan percobaan. Mereka diberi makan
sedikit di atas standar yang direkomendasikan Morrison {?4d oii ransum 8 pon jerami
falla dan 6 pon 16 Jo prarata dalam campuran konsentrat. Ransum konsentrat ini v•as
Perl dua kali sehari kecuali pada tanah liat percobaan eksperimental, ketika
pemberian makan iris pagi dihilangkan. Hay v as fr•d hanya di malam hari, dan
masuk jumlah yang dikontrol untuk memastikan konsumsi lengkap pada 12 tengah
malam sebelum uji coba. Pada hari-hari percobaan, air ditahan dari hewan mulai
jam 12 tengah malam dan berakhir jam 4:30 .i . ii., pada saat mereka diizinkan
mengakses air untuk waktu yang cukup 0.n jam. 3'dia sumber dari
ater kemudian dihapus, dan untuk memberikan waktu yang
cukup untuk itu menelan setelah mencapai keseimbangan dalam hewan,
selang waktu kira-kira 3.n jam. karena semua berutang sebelum dimulainya
persidangan. Setelah pagi penyiraman, hewan tidak menerima air lagi sampai akhir
masa percobaan. Sapi-sapi itu tetap ada pada waktu yang hampir sama dan berada
dalam kesehatan yang baik secara keseluruhan belajar.
•!«•! r!!• r J Sampel minuman keras rumen ( TERLALU ml. ) adalah olatainefl melalui
hiliran
dengan bantuan kanula logam dan selang karet yang dihubungkan ke pompa
aspirator. Sampel diambil sebelum administrasi anrl substrat pada interval setelah
penambahan substrat. Segera setelah diangkat, rumen li‹tuor itu disaring melalui tv•o
lapisan kain katun tipis, lalu disentrifugasi pada 1.000 XG selama lo min. untuk
menghilangkan sisa-sisa partikulat pakan. Sampel alikuot dari cairan supernatan yang
dihasilkan v•cre preservetl untuk analisis asam laktat dan asam Batty yang mudah
menguap. Sampel untuk penentuan asam taktis i v-erc preser› ed bv adrling (1,1 nil
dari 100 (b/v) asam trikloroaktat ke dalam 1 ml cairan rumen. Sampel untuk
penentuan VFA diawetkan dengan menambahkan 1 nihil. larutan mecuri‹ ‹:hl oride
jenuh sampai 9 ml. rumen minuman keras.
PI4 dari sampel rumen, bila ditentukan, v•as diukur dalam 2 sampai 3 menit. setelah
penghapusan. Meskipun pengukuran ini mungkin tidak mewakili intraruminal yang tepat
pH, tampaknya masuk akal untuk mengasumsikan bahwa muatan besar dalam cairan
rumen plc akan terdeteksi oleh ini prosedur.
Untuk studi disimilasi in vitro, suspensi sel disiapkan seperti yang dijelaskan oleh
Doetsch e/ o/. (.Hai"). Suspensi sel ini adalah matte dari rumen minuman keras
 KOMP AR SAYA MENABUR DARI "YAITU GHNI QUE S DI DALAM R ISK SAYA MOL
OGY 653

dari hewan percobaan, di mana studi in vivo atau substrat yang sama dibuat secara
bersamaan. Dua disimilasi suspensi sel yang berbeda dilakukan untuk setiap studi in
vitro. Suspensi satu sel, selanjutnya disebut sebagai 0 jam. suspensi, disiapkan
segera sebelum menambahkan substrat ke dalam rumen. Suspensi sel lainnya,
selanjutnya disebut sebagai 5 jam. suspensi, disiapkan dari cairan rumen sapi yang
sama 5 jam. setelah pemberian ke rumen substrat yang sedang dipelajari. Bakteri
dalam 0 jam. Suspensi tidak memiliki kontak sebelumnya dengan substrat, sedangkan
suspensi 5 jam. suspensi diekspos selama ñ jam. ke substrat tertentu yang sedang
diselidiki. Minuman fermentasi studi disimilasi in vitro disimpan untuk penentuan
VFA. Sampel diawetkan seperti biasa dijelaskan.
Asam laktat cairan rumen ditentukan dengan metode Barker dan Summerson (1)
dan VFA dengan metode Keeney (11). Pengukur pH Beckman, Model H-2,
menggunakan eletrodes gelas standar, digunakan untuk mengukur pH rumen
minuman keras.
Semua substrat yang digunakan dalam penelitian in vivo diencerkan dengan air
hingga volume 1,3 hingga 2,0 liter, diberikan melalui rumen hiliran. Substrat berikut
digunakan untuk studi in vivo: natrium suksinat, asam DL-aspartat, asam de-aspartat
dinetralkan hingga pH 6,9 dengan Na,C O3, D-glukosa, maltosa, De-lisin, dan
campuran glisin ditambah DL-dlanin. Untuk membandingkan hasil in vivo dengan in
vitro, disimilasi in vitro dilakukan pada substrat yang sama, dengan pengecualian
suksinat dan aspartat. Disimilasi atau ini substrat terakhir oleh WCS telah dipelajari
secara detail oleh Sirotnak r/ o/. (DI, 48) ; karenanya, terjadi kerusuhan termasuk.
HASIL

Sodiiim sucrinate omd DC-aspartic aci‹f. Hasil dari studi vivo dengan sodium
sucoinate anrl DL-aspartic acid dirangkum ( Tabel 1) . Sebagai kontrol, analisis
cairan rumen untuk seekor sapi yang pakannya telah ditahan untuk
18 jam. mendahului periode pengambilan sampel ditampilkan. Akan dicatat
bahwa konsentrasi asam propionat dalam rumen meningkat kira-kira 1"i dan
9 persen molar, masing-masing, setelah penambahan o1 natrium suksinat dan asam
DL-aspartat yang dinetralkan. Penurunan terjadi pada konsentrasi cairan rumen trasi
asam asetat dan butirat ditambah fraksi asam yang lebih tinggi setelah pemberian
natrium suksinat. Penurunan juga terjadi pada konsentrasi asam asetat cairan rumen
sapi yang menerima asam EiL-aspartat yang dinetralkan, dengan penurunan asam
butirat bersamaan yang tampak hampir sama dengan peningkatan asam valerat dan
asam yang lebih tinggi. Peningkatan valerik dan fraksi asam yang lebih tinggi
mungkin disebabkan oleh • peningkatan asam Batty rantai cabang yang
menghasilkan Irom reaksi tipe Stiekland, seperti yang disarankan oleh El-Shazly
(7).
Acld Dr-aspartik yang tidak dinetralkan tidak larut menjadi VFA. Memang,
konsentrasi dari YFA total menurun lebih cepat daripada sapi yang dipuasakan,
mungkin karena pH yang rendah cairan rumen. Tidak ada perubahan yang konsisten
atau ditandai terjadi dalam konsentrasi relatif dari berbagai berlemak
 TABEL 1

Trial Samtiling Total Valerie plus AceticPropionieEutyrichigher aeids Rumen

XO. Troatnient ——(Motar "/e tot‹st DI"A) liquor
( ›D)
6.9
1Pre vio usly fafito‹l 18 li r.IN91.4J().113.*I.9 0,5 87.8 GS.7 16.0 13.4 1.8 7.0
2 78.2 (i8.fi 16.1 J:3.? *.1 6.9
5 75.2 U8.I) 15.9 13.8 *.8 G.8
8 54.8 15.3 1ñ.ti *.6 7.0
2 1 kg. sodi uin sueciii‹ito 0 21.3 18t' 11a'
0.ii 49.6 19.f 13.8
1.5 55 1 22.3 12.4
3.5 56.4 yaitu 216 109
3.o fi6.6 1.5
53.9
8 47.1 5 .4 32.4 10. 2
3 1 kg. DL-aspartie aeid (tidak netral) 0 47.9 fi8.2 15.0 I*.8 4.0 7.n
00 35.8 69.7 JS.J. 9.0 6.2 45
2 24.1 G'i.3 15.* 8.1 9.4 5.4
5 18.1 65.2 6.5 6.5
4 1 kg. nr asp a rti‹: acirl (uneutr:r1ized) 0 dasi.5 6b0 157 13.0 7.n
0,5 50.ti 68.2 lñ.8 11.7 5.7
2 ./9.2 17.2 13.4 fi.5
fi5.0 1fi.8 11. S 7.0
5 1 kg. nr-aspartic aeid (neutra lizeil 0 70.7 6fi.S 15.3 saya,5. °.8 6.5
1
hingga pH 6,9 dengan NacGO ) 0,5 fi0.3 fi7.0 15.J 14.2 J.5 7.1
58.4 fi5.1 J8.8 13.5 3.1 7.2
64.2 6*.7 22.5 10.9 3.9 7.2
8 69.4 62? 24.4 9.T 7.3
• Termasuk valerie dan lainnya yang lebih tinggi aids.
 C OM PAR IS 0 N OF TE CHNI QUES IN RUGI IN OL HAI GY 655

asam. Namun, deainination memang terjadi. 'Saya ini setuju dengan temuan dari
Sirotnak ct n/. (18). Asam laktat tidak diamati dalam cairan rumen ini sampel.
Glukosa. Data disimilasi n-glukosa ditunjukkan ( Tabel 2) . Perubahan in vivo
utama adalah peningkatan rumen propionie, butirat, dan konsentrasi asam laktat, dan
penurunan pH cairan rumen dan konsentrasi amonia bebas. Saya alergi konsentrasi
asam tidak mengalami perubahan yang berarti. Penurunan besar dalam konsentrasi
amonia bebas dari cairan rumen menambahkan konfirmasi terhadap pandangan
bahwa pemanfaatan amonia adalah ditingkatkan dengan adanya karbohidrat yang
tersedia. Peningkatan konsentrasi asam propionat juga diamati selama disimilasi
glukosa oleh WCS. Kehadiran sejumlah besar glukosa iii rumen tampaknya
mempengaruhi aktivitas bakteri, karena WCS disiapkan selama berjam-jam. setelah
pemberian glukosa menyerang substrat ini lebih keras dan dengan produksi asam
propionat yang lebih besar daripada WCS tanpa paparan sebelumnya substrat.
Maltosa. Dalam › disimilasi maltosa ivo (Tabel 3) tidak menghasilkan perubahan
yang berarti dalam proporsi relatif YFA. Total konsentrasi I^FA meningkat agak
nyata- dalam banyak kasus. 'ini dibuktikan dengan membandingkan data maltosa
dengan sapi kontrol (ditunjukkan dalam 'fabel 1) . Selama uji coba ini, terjadi
peningkatan asam laktat yang relatif besar, yang bila digabungkan dengan
peningkatan total YFA, menghasilkan penurunan pH rumen yang nyata. Dia akan
dicatat bahwa konsentrasi kering laktat setelah pemberian maltosa jauh lebih besar
daripada glukosa pada Trial 6 (Tabel 2) . Pengamatan ini sejalan dengan hasil
Robinson e/at. (15).
Hasil dari disimilasi in vitro maltosa oleh suspensi sel mirip dengan hasil iii vivo. 7
'proporsi asam asetat lebih rendah, dan asam propionat dan butirat lebih tinggi, daripada
dalam kasus percobaan in vivo. Por evaluasi yang tepat, bntyrie ditambah fraksi asam
yang lebih tinggi dalam disimilasi oleh suspensi sel harus dibandingkan dengan
gabungan fraksi butyrie dan asam valerie dari percobaan in vivo. Satu pengecualian
utama dicatat adalah peningkatan besar dalam konsentrasi asam propionat o1 itu 0 jam.
Disimilasi U'CS dengan tambahan maltosa ( Trial 12).
DL-/ysiae. 'data in vivo dan in vitro (Tabel 4) menunjukkan bahwa sedikit
atau tidak ada YFA yang diproduksi dari De-lysine. Sirotnak dkk. (47),
menggunakan r-lisin, memperoleh hasil yang serupa. Akan terlihat bahwa terjadi
penurunan VFA total dalam rumen (penyerapan) dan peningkatan pH rumen.
Hanya sedikit peningkatan yang dicatat dalam asam laktat rumen konsentrasi.
G/ c*ae plus DL-clarion. Data in vivo disediakan sedikit atau tidak ada bukti
produksi YFA dari campuran glisin dan nc-alanin, meskipun terdapat produksi
amonia (deaminasi) yang besar dan beberapa produksi asam laktat. Dissimilasi in
vivo dan in vitro campuran glisin dan DL-alanin sangat cocok, karena keduanya
menunjukkan bahwa campuran tersebut, jika difermentasi sama sekali bx *
mikroorganisme rumen , penghasil VFA dalam jumlah yang dapat diabaikan. pH
cairan rumen yang seragam selama uji coba ini berfungsi sebagai pendukung bukti-
denec untuk pernyataan sebelumnya. Pengamatan ini memverifikasi hasil Sirotnak
ef di. (Dia").
 Minu
man
keras
rumen
Trial Penyederhanaan Total Valerie p1u8
Rumen Rumen bebas minuman keras No. Waktu perawatan VPA Aeetie Propionic
Cutyrie liigheracids liquor laetieaeid amonia
6 1.3 kg. g1ueoseadde‹l I *-) f»>""*7 I ° °• % ° ° !" 1 IP 7 Lt '>!1
inrivo 0 572 ti8o 130 143 42 ?l 00 72
115 500 531 160 181 28 66 25 43
z" IZ." 57.6 *1.5 18.9 J.0 ti.3 3.2 4.5
5 695 57il 215 185 21 69 00 10
7 1 5 kg. lem ditambahkan
III VIV0 u I.tj1..5 67.8 16.6 J 1.9 3.7 ti.6
0.5 89.5 61.8 19.3 16.1 2.8 6.0
2 105.0 57.6 19.4 21.2 4 .S 5.0
5 93.0 56.3 19 3 21 8 ?..6 G5
B‘ In vitro WCS from
Trial 6 0 hr. 15.0 ti8.0 13.5 9.1 9.4 Control, no eubetrate
Olir. 19.5 ti5.0 16.8 10.4 7.3 400 o2f glucose added
5 hr. 12.6 58.5 20.1 14.1 7.3 Control, no substrate
5 hr. 35.5 60.9 28.0 8.2 2.9 400 pñf glucose added

' Dissimilasi oleh WCS dibuat dari cairan rumen yang diperoleh sebelum (0 jam.) dan setelah (5 jam.) penambahan glukosa pada Trial 6 abore.
uji coba Mengambil sampel 'Iota1 Valerie ditambah
Tidak. Perawatan Rumen Bumen waktu minuman keras VFA Acetic P ropionik
Tapi yaitu lebih tinggi asam-asam cair laetik a cid

9 1,5 kg. maltosa tinggal di vivo (jam.) (q3I/ml) —(M.olar "/c total KI"B) (pB) ( m/mt)
0 101,3 64,2 17,5 11,3 7,0 6,6 0,0
0,25 85.(i 51,8 18,4 14,1 5,7 fi.1 11,0
0,5 91,5 ñ3,1 19,3 13,2 4,4 6,0 13,0
2 140,' 2 62,0 lb.1 16,1 3,8 5,6 4,5
3 125,8 G2.7 16,9 d6.4 4,0 5,9 0,4ii
10 1,5 kg. maltosa alldeal di vivo
0 114,4 d2,4 16,3 15,2 6,1 6,7 0,0
0.23 100.8 60.G 19.0 J't.8 5.6 G.2 8.7
0,5 111,9 62,1 17.ti 14,8 5,5 6,0 11,6
2 T29.4 59.3 1R.4 17.6 4.7 5.8 5.1
5 I34.8 59.4 15.5 JR.8 6.3 C.0 0.11
11 1,5 kg. di altose a‹lrIet1 ii vivo
0 J22.1 59.9 20.8 14.2 5.1 6.0
0,25 121,5 61,4 20,7 18,6 4,5 ?.6
0,0 127,4 58,5 15,8 13,2 8,5 5,5
2 1 20,6 59,1 20,4 15,7 4,8 5,2
5 97,8 60,7 18.P 15,3 5,1 4,9
12 ' In vitro WGS f rorn Trial 9
0-lir. 29.1 55.7 18.7 25.6“ Kontrol, no substrat
0 jam. 46,2 52,9 28,2 18,9 200 q3f maltosa ditambahkan
5 jam. 34.1 52.0 24.9 23.1 200 pdf maltosa ditambahkan
3* WGS in vitro dari Tria 10
0 jam. 21,1 53,5 23,0 23,5 ' Gontrol, tidak substrat
0 jam. 30,5 55,2 22,6 22,2 200 q3f maltosa ditambahkan
5 jam. 34,0 53,5 23,0 23,5 200 p3f maltosa ditambahkan
Disimilasi oleh WGS yang dibuat dari cairan rumen diperoleh bijih bet (0 jam) dan setelah (5 jam) penambahan maltosa pada Percobaan 9
di atas. Dissimilasi oleh WCS yang dibuat dari cairan rumen diperoleh bijih bet (0 jam) dan setelah (5 jam) penambahan maltosa pada
percobaan 10 di atas.
' Termasuk des valerie; temukan asam tinggi lainnya.
Tiat Sampling Total Valerie ditambah Rumen
No. Treatment time Rumen
VFA minuman keras
Acetic Propionie Butyrie higher aeida liquor laetie acid

14 1.5 kg. 4 . lyeino a‹1ded in vivo 0 50.4 tiil.ti 21.4 8.5 0.5 7.4 0.0
0.5 54.2 71.1 lS.l 10..i tL3 7.0 0.18
49.9 73.4 17.8 8.5 0.3 7.2 0.0
5 42.5 7g.li Jg.0 1.7 0.6 7.4 0.0

15 1.5 kg. oc-ly8ine added in vivo 0 36.0 I!LS NJ.O 0.0

35.5 65.4 18.3 11.6 4.7 0.33
33.8 66.0 18.1 12.6 3.3 7.1 0.0
5 33.5 65.0 17.8 14.7 2.5 7.0 0.0

0 lir. 17.0 66.3 S.4‘ Control, 1›u substrate

0-hr. 16.0 14.1 i.'00 y3f oL lysine added

5 hr. 17.0 66.8 1?.ti 15.ti Control, no substrate

5-hr. 17.0 73.6 16.3 10.1 200 p4f nL-lysine added

• Diaaimilation8 oleh WCS dibuat dari cairan rumen yang diperoleh sebelum (0 jam) dan setelah (5 jam) menambahkan nL-lysine di Trial
14 abore. ' Termasuk valerie dan yang lebih tinggi lainnya asam.
 PERBANDINGAN SOA TL GUI II PERTANYAAN DI RUM I
NO ISO GY 659

DlSCLSGION
Dalam tiga percobaan, hasil in vivo dan in › itro hampir sama secara kualitatif.
Perbedaan kuantitatif yang ada antara hasil in ivo dan in vitro dapat disebabkan oleh
konversi intra antara YPA dan penyerapan yang terjadi selama uji coba in vivo.
Hasil fermentasi suceinate in vivo serupa dengan hasil in vitro yang dilaporkan oleh
Doetseh ct ct. {4d . Kegagalan untuk memperoleh fermentasi yang jelas dari asam
aspartat dalam viä o dikaitkan dengan pH isi rumen yang tidak normal disebabkan
oleh De-aspartie aeld. Keasaman yang sangat tinggi (sekitar pH 4,5) dapat
mempengaruhi metabolisme bakteri rumen dan mengganggu disimilasi normal.
Ketika asam aspartat dinetralkan sebagian menjadi pH 6,9 dengan Na t C O „ itu
diserang oleh mikroorganisme rumen dan mengakibatkan peningkatan tajam YFA,
terutama asam propionie. Hasil in vivo dari asam aspartie yang dinetralkan sebagian
mirip dengan hasil in vitro dari WCS yang dilaporkan oleh Sirotnak e/at. (18).
Menarik untuk dicatat bahwa uji coba in vivo dengan glukosa menunjukkan
bahwa adanya karbohidrat yang dapat difermentasi meningkatkan pemanfaatan
amonia oleh mikroorganisme rumen. Tercatat juga bahwa fermentasi in vivo maltosa
dan glukosa menghasilkan produksi asam laktat, serta VFA. Asam laetie tercapai
konsentrasi maksimum dalam waktu 2 jam. setelah pemberian substrat dan dalam ñ
jam. hampir sepenuhnya menghilang dari rumen. Konsentrasi asam laetik yang tinggi
ini dapat dijelaskan dengan mengasumsikan bahwa ia adalah zat antara normal dalam
metabolisme karbohidrat dalam rumen, dan pembentukannya berlangsung lebih
cepat. tingkat daripada disimilasi dan / atau penyerapannya. Hasil serupa mengenai
produksi asam laktat telah dilaporkan oleh Waldo dan Schultz (19).
DL-lisin atau kombinasi glisin dan DL-alanin tidak difermentasi menjadi VFA
oleh mikroorganisme rumen. Hasil ini sesuai dengan hasil in vitro WCS dari
Sirotnak ct ct. (17). Namun, glyein e plus DL-alanine dideaminasi in vivo oleh
mikroorganisme rumen. Identitas dari senyawa yang dihasilkan belum diketahui.
Dilonggarkan dari. (12), Hitam ct di. ('2), dan Duncan e/ dari. (6) telah memberikan
bukti yang menunjukkan sintesis asam amino esensial oleh mikroorganisme rumen.
Mungkin reaksi dalam rumen yang melibatkan asam amino esensial sepenuhnya
bersifat asimilasi. Deaminasi proses akan membantu dalam memasok amonia
diperlukan untuk bakteri (ñlcDonald, 7,?), dan mungkin inang, sintesis protein.
Pengamatan yang dilakukan pada nilai pH cairan rumen selama uji in vivo
menunjukkan bahwa pH cairan rumen berhubungan langsung dengan konsentrasi
VFA total isi rumen. Diperkirakan bahwa pengukuran ini, meskipun tidak mewakili
pH intrarumen yang tepat, mencerminkan perubahan besar dalam nilai pH cairan
rumen.
Selama uji coba in vitro dengan glukosa (Trial 8, Tabel 2), perbedaan diamati antara
fermentasi glukosa yang ditambahkan pada 0 jam, dibandingkan ke ñ-hr., WCS. Perlu
dicatat bahwa peningkatan iii butyrie aeid terjadi selama in vivo dan percobaan in vitro.
Namun, dengan penambahan substrat, konsentrasi asam butirat in vitro pada 5 jam. WCS
tidak bisa mengimbangi dengan
b60 PG HU E'I'E RET AL

konsentrasi in vivo meningkat, meskipun peningkatan yang cukup besar memang

terjadi. Hasil ini menunjukkan bahwa pemberian in vivo dalam jumlah yang
relatif besar atau karbohidrat tertentu dapat mengubah aktivitas atau
mikroorganisme rumen. Efek karbohidrat tertentu pada produksi asam laktat dan
poJysakarida oleh bakteri rumen sapi telah dilaporkan oleh Robinson c/nI. (untuk)
dan Gibbons e/ aI. (8). Perubahan dapat terjadi karena satu atau lebih alasan
berikut: (a. populasi bakteri di mana satu atau lebih spesies telah meningkat
jumlahnya; (bj. peningkatan aktivitas metabolisme satu atau lebih spesies
mikroorganisme; atau (c ) pembentukan dari jalur shunt metabolik di hadapan
kelebihan substrat oleh satu atau lebih spesies rumen mikroorganisme.
Meskipun hasil kualitatif in vivo dan in vitro serupa, perbedaan kuantitatif
dicatat. A"ariations mungkin hasil dari perbedaan penyerapan produk akhir,
perubahan pH ditambah faktor in vivo lainnya, dan perubahan metabolisme bakteri.
Perbedaan ini juga bisa karena inaktivasi enzim dalam pengolahan suspensi sel,
pengecualian protozoa, penghilangan penting bactez-ia karena kepatuhan terhadap
berbagai bahan, kurangnya kofaktor untuk reaksi tertentu, asimilasi, dan/atau
pemanfaatan atau beberapa YFA, karena tidak adanya penyerapan.
Metode suspensi sel in vitro tampaknya berguna teknik untuk mempelajari
substrat beracun dan/atau mahal; untuk secara artifisial mengubah lingkungan kimia
dengan cara dan arah yang dapat diprediksi; untuk pemeriksaan farmakologis, dan
untuk studi percontohan untuk hewan selanjutnya eksperimen.

REFERENSI
(1) B tRKER, KB, -\hD SUM AIERSON, WH Penentuan Kolorimetri Lactie Acicl dalam Bahan Biologis. ,/.
Bto1. Uliciii., 138 : 535. 194'1.
(2) Br.icu, A., KU.IBERy M., añ D $ñII'1'H, A.II. Asam Karbonat dan Batty sebagai Prekursor Asam
Amino dalam Kasein. ./. Bio1. 6 hem., 197 : 365. 1952.
(3) LAKUKAN ca, fi. b"., AND BOBTN SOA, RQ The Baeteriology of the Bovine Rumen : A Review. J.
Wnii-y Sci., 36 : 115. 1953.
(4) DOETS ce, R.h'., fiOB INSON, BQ, Buoy u, RE, can Snow, JC Gatabolie Reaksi Suspensi Mixerl
dari Bovine ltunien Bakteri. J. Doirt/ Sci., 3s : 825. 1953.
Dosrsen, E.fi. , Siix r, JC, MGNE,IM, JJ, AifD JUR'PSnux, P., OR. Pengamatan Penggunaan
Suspensi MixecJ pada Bakteri Rumen Sapi sebagai ToehnlQVO Ahli Biologi Mikro Rumen.
Maryland Mgr. Ekst. Sta., dftsc. Put 1. 238 : 1. 1955.
(6) Due can, CW, AGR \AV-\I.-\, IP, Horror.AN, GF, AND. LuEC'KE, RW A Quantitative Sturly of Bunien
Synthesis iii the Bovine on h'atural and Purified Diets. 11. Amis:o Kandungan Asam Protein
Rumen Campuran. J.Ni ‹tuition, 49 : 41. 1953.
Er-Sri.\zLv, K. Degratlatiou Protein dalam Rumen Domba. II. Itu Aksi dari
Rumen Mikro-atau Ganisme pada Amino Acitls. Biokimia. J., 51 : 647. 1952.
( S ) Owa, fi . J., POETS CH, It. b'., AND SaAW, JG Kajian Lebih Lanjut Pro rsutan Poljsaecharide oleh
Bakteri Rumen Bovine . J. 77airy Sci., 38: 1147. 1955.
(9) Joe•s, AT Isolasi P>aeterium, Producing Propionie Acid, I from the Buinen of Sheep. J.Mendapat.
ñficrobIoI., 5 : 317. 1951.
(10) JUR'PSHUIT, P., OR., Ah'D HUE.TER, FG In Yitro Sturlies on Dissimilation of Purines and
Pyrimiclines by Boi•ine Rumen Bakteri. Maryland Agr. Ekst. Sta., Eltsc. Iya bt. 238 : 4. 1955.
(11) Kzsxsv, M. Direct Chroniatograpliie Penentuan Gi to Cr Fatty Aids dalam Rumen FluirJ.
Maryland Agr. Ekst. Sta., f2sc. Tekan b1. 238 : 23. 1955.
 PERBANDINGAN TEKNIK DI DALAM RUMINOLOOY 661

( 12) LOOS LI, J.K. , WILLIAM s, H.Ii. , 'Inoses, W.E. , FRRRIS, F.H. , xan Mzvxxno, L. A.
Sintesis Asam Amino di Bumen. ›Scisace, 110: 144. 1949.
(13) MoDONALD, IW Peran Amoniak dalam Pencernaan Luminal Protein. Biokimia. J.,
5t : 86. 1952.
(l4) Monnisox, FB Membutuhkan Pemberian Makan Akhir. edisi ke-21. Pub Morrison1. Pergi.,
Ithaca, NY
1949.
(15) Ros in son, BQ, Donson, RN, SIROTNAlc, FM, .AND KiiAw, JC Produksi Lactie Acid dan Zat
Pewarna Yodium oleh Bovine Rumen Baeteria. J. Doiry Sci., 38 : 13. 1955.
(16) SlJezszsiJx, AR, zm Epsom, SR 'Metabolisme Asam Sueeinie dalam Rumen Domba.
Bioclesem. J., 52 : 41. i9u2.
(17) Siaorsw, FM, Dozzsou, RN, Bnowu, RE, zn•n Snow, JC Asam Amino Metabolisme
Bakteri Rumen Bovine. J.Po +zp ›Sci., 36: 1117. 1953.
(18) SiROTN.\x, F. M., DOESSGH, BN, ROBINSON, RQ, zuD Lihat sv, JC Aapartate Reaksi
Disimilasi Rumen Baeteria. uf. Susu Sei., 31 : 531. 1954.
(19) WA DO, DB, xun ScriQL'ffi, LH Produksi Aeid Laktat di Rumen. J. Ilmu Susu, 38 : 605. 1955.