MORFOLOGI, KELAINAN

dan HITUNG TROMBOSIT

OLEH :
PUTU RINA WIDHIASIH
(P07134014002)

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA

POLITEKNIK KESEHATAN DENPASAR
JURUSAN ANALIS KESEHATAN
TAHUN AKADEMIK 2015/2016

I.

Tanggal Praktikum

: 29 Mei dan 5 Juni 2016

Materi Praktikum

: Morfologi, Kelainan dan Hitung Trombosit

TUJUAN
a. Tujuan Instruksional Umum

1. Mahasiswa dapat mengetahui morfologi dan kelainan trombosit.

2. Mahasiswa dapat menjelaskan cara menghitung jumlah Trombosit
darah probandus.
b. Tujuan Instruksional Khusus
1. Mahasiswa dapat melakukan cara menghitung Trombosit darah
probandus.
2. Mahasiswa dapat mengetahui jumlah trombosit /mm3 probandus pada
apusan darah
3. Mahasiswa dapat menginterpretasikan hasil jumlah Trombosit darah
II.
III.

probandus.
METODE
Metode yang digunakan adalah apusan darah
PRINSIP
Apusan darah diamati dengan mikroskop binokuler pada perbesaran objektif
100X dengan penambahan oil imersi. Penghitungan trombosit dilakukan pada

IV.

counting area dimana trombosit menyebar merata.

DASAR TEORI
Darah
Darah adalah jaringan cair yang terdiri atas dua bagian yaitu plasma darah dan

sel darah. Sel darah terdiri dari tiga jenis yaitu eritrosit, leukosit dan trombosit.
Volume darah secara keseluruhan adalah satu per dua belas berat badan atau kirakira lima liter. ( Evelyn C. Pearce, 2006)
Fungsi utama darah dalam sirkulasi adalah sebagai media transportasi,
pengaturan suhu, pemeliharaan keseimbangan cairan, serta keseimbangan basa
eritrosit selama hidupnya tetap berada dalam tubuh. Sel darah merah mampu
mengangkut secara efektif tanpa meninggalkan fungsinya di dalam jaringan, sedang
keberadaannya dalam darah, hanya melintas saja.
Darah berwarna merah, antara merah terang apabila kaya oksigen sampai
merah tua apabila kekurangan oksigen. Warna merah pada darah disebabkan oleh
hemoglobin, protein pernapasan (respiratory protein) yang mengandung besi dalam
bentuk heme, yang merupakan tempat terikatnya molekul-molekul oksigen.
Manusia memiliki sistem peredaran darah tertutup yang berarti darah mengalir
dalam pembuluh darah dan disirkulasikan oleh jantung. Darah dipompa oleh

jantung menuju paru-paru untuk melepaskan sisa metabolisme berupa karbon

dioksida dan menyerap oksigen melalui pembuluh arteri pulmonalis, lalu dibawa
kembali ke jantung melalui vena pulmonalis. Setelah itu darah dikirimkan ke
seluruh tubuh oleh saluran pembuluh darah aorta. Darah mengedarkan oksigen ke
seluruh tubuh melalui saluran halus darah yang disebut pembuluh kapiler. Darah
kemudian kembali ke jantung melalui pembuluh darah vena cava superior dan vena
cava inferior. Darah juga mengangkut bahan bahan sisa metabolisme, obat-obatan
dan bahan kimia asing ke hati untuk diuraikan dan ke ginjal untuk dibuang sebagai
air seni. ( Evelyn C. Pearce, 2006 )
Darah terdiri daripada beberapa jenis korpuskula yang membentuk 45%
bagian dari darah. Bagian 55% yang lain berupa cairan kekuningan yang
membentuk medium cairan darah yang disebut plasma darah.
a. Sel darah merah atau eritrosit (sekitar 99% dari jumlah korpuskula).
Eritrosit tidak mempunyai nukleus sel ataupun organela, dan tidak dianggap
sebagai sel dari segi biologi. Eritrosit mengandung hemoglobin dan
mengedarkan oksigen. Sel darah merah juga berperan dalam penentuan
golongan darah. Orang yang kekurangan eritrosit menderita penyakit anemia.
Keping-keping darah atau trombosit (0,6 - 1,0%), bertanggung jawab dalam
proses pembekuan darah.
b. Sel darah putih atau leukosit (0,2%)
Leukosit bertanggung jawab terhadap sistem imun tubuh dan bertugas untuk
memusnahkan benda-benda yang dianggap asing dan berbahaya oleh tubuh,
misal virus atau bakteri. Leukosit bersifat amuboid atau tidak memiliki
bentuk yang tetap. Orang yang kelebihan leukosit menderita penyakit
leukimia, sedangkan orang yang kekurangan leukosit menderita penyakit
leukopenia.
c. Plasma darah
Pada dasarnya adalah larutan air yang mengandung : albumin, bahan
pembeku darah, immunoglobin (antibodi), hormon, berbagai jenis protein,
berbagai jenis garam.
Trombosit
Morfologi

Trombosit adalah sel anuclear nulliploid (tidak mempunyai nukleus pada

DNA-nya) dengan bentuk tak beraturan dengan ukuran diameter 2-3 m yang
merupakan fragmentasi dari megakariosit. Keping darah tersirkulasi dalam darah
dan terlibat dalam mekanisme hemostasis tingkat sel dalam proses pembekuan
darah dengan membentuk darah beku. Trombosit tak berinti, berbentuk cakram
dengan diameter 1 4 mikrometer dan volume 7 8 fl. Trombosit dibentuk daam
sumsum tulang melalui fregmentasi sitoplasma megakariosit, yaitu sel besar dengan
nukleus banyak. Trombosit terus dibetuk dan dilepasan kedalam darah, tempat
trombosit bertahan hidup 9-10 hari tidak memiliki nukleus dan tidak sanggup
membuat protein, trombosit tetap dapat melakukan berbagai aktivitas sel-sel utuh,
trombosit mengkonsumsi oksigen dan mempunyai metabolisme aktif yang
tergantung pada enzim pembangkit energi dari satu atau dua mitokondria kecil
dalam sitoplasmanya. Pada sediaan apusan darah terpulas, tamak dua zona
konsentrik: zona perifer biru-pucat disebut hialomer dan daerah pusat yang lebih
tebal disebut granulomer. Yang mengandung granula azurofil keil-kecil. Pada
mirograf elektron. Hialomer tampak jarang- elektron dan tidak mengandung
organel. Granul azurofilnya menimbun substansi yang disintesis dalam megakariosit
sebelum dilepaskan. Didalam hialomer trombosit terdapat lebih banyak aktin dan
miosin bila dibandingkan jenis sel lain, kecuali otot. Dalam trombosit yang beredar,
trombosit terutama terdapat dalam bentuk monumer, tetapi pengaktifan trombosit
selama pembekuan agaknya mengalami polimerisasi aktin dan miosin menjadi
bentuk filamen yang diperlukan untuk kontraksi. Granulomer trombosit
mengandung beberapa ribosom dan sebaran partikel glikogen terdapat pula
bangunan bermembran berbetuk bulat atau memanjang yang merupakan potongan
kanalikuli yang bermuara pada 10 atau lebih temapat di permukaan. Bangunan ini
diduga merupakan jalur utama pemasukan solut an pengeluaran produk sekresi
setelah trombosit diaktifkan. Granul bermembran berdiameter 0,2 m dalam jumlah
bervariasi adalah ciri mencolok dari granulomer.
Struktur Trombosit

1. MEMBRAN SEL
2. MIKROTUBULUS
3. SITOPLASMA

Fungsi Trombosit
Trombosit memiliki banyak fungsi, khususnya dalam mekanisme hemostasis.
Berikut fungsi dari trombosit (A.V Hoffbrand et al, 2005):
1. Mencegah kebocoran darah spontan pada pembuluh darah kecil dengan cara
adhesi, sekresi, agregasi, dan fusi (hemostasis). Sitotoksis sebagai sel efektor
penyembuhan jaringan.
2. Menghentikan pendarahan jika terjadi luka dengan cara membekukan darah
disekitar daerah luka sehingga darah berhenti mengalir. Jika terjadi luka,
trombosit dalam darah pecah dan mengeluarkan enzim trombokinase. Enzim
trombokinase merangsang protrombin untuk membentuk thrombin dengan
bantukan vitamin K dan ion Ca. Trombin merangsang fibrinogen dalam plasma
darah untuk membentuk fibrin, yaitu berupa benang-benang yang membentuk
anyaman dan dapat menjaring darah supayaeritrosit dalam darah tidak keluar
lagi dan menutup luka.
Pembentukan Trombosit
Sel trombosit berasal dari fragmentasi sitoplasma megakariosit sumsum tulang.
Megakariosit mengalami pematangan dengan replikasi inti endomitotik yang
sinkron, memperbesar volume sitoplasma sejalan dengan penambahan lobus inti
menjadi kelipatan duanya. Pada berbagai stadium dalam perkembangannya (paling
banyakpada stadium inti delapan), sitoplasma menjadi granular dan trombosit
dilepaskan.
Produksi trombosit mengikuti pembentukan mikrovesikel dalam sitoplasma sel
yang menyatu membentuk membran pembatas trombosit. Tiap sel megakariosit
menghasilkan 1000-1500 trombosit. Sehingga diperkirakan akan dihasilkan 35.000/
l trombosit per hari. Jumlah sel trombosit yang bersirkulasi dalam darah tepi

sangat tergantung jumlah sel megakariosit, volume sitoplasma megakariosit, umur

trombosit dan sekuestrasi oleh limpa.
Trombopoetin adalah pengatur utama produksi trombosit, dihasilkan oleh hati
dan ginjal. Trombosit mempunyai reseptor untuk trombopoetin (C-MPL) dan
mengeluarkannya dari sirkulasi, karena itu kadar trombopoetin tinggi pada
trombositopenia akibat aplasia sumsum tulang. Trombopetin meningkatkan jumlah
dan kecepatan maturasi megakariosit. Jumlah trombosit mulai meningkat 6 hari

( Gambar 1. Pembentukan Trombosit)

Seri Trombosit
1. Megakaryoblas
Ukuran 20-50 m. Sitoplasma: berwarna biru, pada umumnya lebih gelap
daripada mieloblas. Mempunyai pseudopodia tumpul, kecil. Jumlahnya sedikit
sampai sedang. Pada umumnya berbentuk pita pendek mengelilingi inti. Semakin
banyak sel matur jumlah sitoplasma semakin banyak. Pada umumnya non granular.
Inti : Bentuk bulat, oval, atau berbentuk ginjal. Kromatin halus. Anak inti multipel,
pada umumnya berwarna biru.
2. Promegakaryosit
Ukuran 20-50 m. Sitoplasma: Pada umumnya banyak. Kurang basofil
daripada stadium blas. Mulai terbentuk granula. Inti : Kromatin menjadi lebih besar.
Tampak anak inti multipel. Bentuknya iregular, kadang-kadang tampak sedikit
lobulasi.
3. Megakaryosit
Ukuran 30-100 m. Sitoplasma: Jumlahnya banyak Warna pinkish blue.
Banyak granula. Pada umumnya batas tepinya irregular. Granula
mengadakan agregasi
nantinya dari sini akan

mulai

menjadi ikatan-ikatan kecil. Berupa tunas (bud off)

menjadi platelet atau trombosit. Inti : Kecil, bila

dibandingkan dengan ukuran selnya. Inti multipel mungkin masih tampak, atau inti
menunjukkan multilobulasi. Kromatin lebih kasar daripada stadium sebelumnya.
Tidak tampak anak inti.
4. Trombosit Atau Platelet

Ukuran : 1-4 m. Sitoplasma: Biru terang sampai ungu (purple) Ganula :

banyak. Inti : tidak ada
Terdiri dari 2 bagian :
1. Kromomer, bersifat granular dan lokasinya di sentra
2. Hyalomer, mengitari kromomer, bersifat non granular dan berwarna jernih
sampai biru terang
Hitung Trombosit
Bahan pemeriksaan yang dianjurkan untuk pemeriksaan hitung trombosit adalah
darah EDTA. Antikoagulan ini mencegah pembekuan darah dengan cara mengikat
kalsium dan juga dapat menghambat agregasi trombosit.
Metode langsung (Rees Ecker)
Hitung trombosit secara langsung menggunakan kamar hitung yaitu dengan
mikroskop cahaya. Pada hitung trombosit cara Rees-Ecker, darah diencerkan ke
dalam larutan yang mengandung Brilliant Cresyl Blue sehingga trombosit tercat
biru muda. Sel trombosit dihitung dengan menggunakan kamar hitung standar dan
mikroskop. Secara mikroskopik trombosit tampak refraktil dan mengkilat berwarna
biru muda/lila lebih kecil dari eritrosit serta berbentuk bulat, lonjong atau koma
tersebar atau bergerombol. Cara ini memiliki kesalahan sebesar 16-25%,
penyebabnya karena faktor teknik pengambilan sampel yang menyebabkan
trombosit bergerombol sehingga sulit dihitung, pengenceran tidak akurat dan
penyebaran trombosit yang tidak merata.
Metode fase-kontras
Pada hitung trombosit metode fase kontras, darah diencerkan ke dalam larutan
ammonium oksalat 1% sehingga semua eritrosit dihemolisis. Sel trombosit dihitung
dengan menggunakan kamar hitung standar dan mikroskop fase kontras. Sel-sel
lekosit dan trombosit tampak bersinar dengan latar belakang gelap. Trombosit
tampat bulat atau bulat telur dan berwarna biru muda/lila terang. Bila fokus dinaikturunkan tampak perubahan yang bagus/kontras, mudah dibedakan dengan kotoran
karena sifat refraktilnya. Kesalahan dengan metode ini sebesar 8 10%.
Metode fase kontras adalah pengitungan secara manual yang paling baik.
Penyebab kesalahan yang utama pada cara ini, selain faktor teknis atau pengenceran
yang tidak akurat, adalah pencampuran yang belum merata dan adanya perlekatan
trombosit atau agregasi.
Modifikasi metode fase-kontras dengan plasma darah

Metodenya sama seperti fase-kontras tetapi sebagai pengganti pengenceran

dipakai plasma. Darah dibiarkan pada suhu kamar sampai tampak beberapa mm
plasma. Selanjutnya plasma diencerkan dengan larutan pengencer dan dihitung
trombosit dengan kamar hitung seperti pada metode fase-kontras.
Metode tidak langsung
Cara ini menggunakan sediaan apus darah yang diwarnai dengan pewarna
Wright, Giemsa atau May Grunwald. Sel trombosit dihitung pada bagian sediaan
dimana eritrosit tersebar secara merata dan tidak saling tumpang tindih.
Metode hitung trombosit tak langsung adalah metode Fonio yaitu jumlah
trombosit dibandingkan dengan jumlah eritrosit, sedangkan jumlah eritrosit itulah
yang sebenarnya dihitung. Cara ini sekarang tidak digunakan lagi karena tidak
praktis, dimana selain menghitung jumlah trombosit, juga harus dilakukan hitung
eritrosit.
Penghitungan trombosit secara tidak langsung yang menggunakan sediaan apus
dilakukan dalam Trombosit: perkiraan jumlah dan morfologi
o FN-18 (10 x 100):
Perkiraan jumlah trombosit dalam darah:
jumlah trombosit dalam 18 lp x 1.000
o FN-22 (10 x 100):
Perkiraan jumlah trombosit dalam darah:
jumlah trombosit dalam 11 lp x 1.000
Hitung Trombosit Otomatis
Penghitung sel otomatis mampu mengukur secara langsung hitung trombosit
selain hitung lekosit dan hitung eritrosit. Sebagian besar alat menghitung trombosit
dan eritrosit bersama-sama, namun keduanya dibedakan berdasarkan ukuran.
Partikel yang lebih kecil dihitung sebagai trombosit dan partikel yang lebih besar
dihitung sebagai eritrosit. Dengan alat ini, penghitungan dapat dilakukan terhadap
lebih banyak trombosit. Teknik ini dapat mengalami kesalahan apabila jumlah
lekosit lebih dari 100.000/mmk, apabila terjadi fragmentasi eritrosit yang berat,
apabila cairan pengencer berisi partikel-partikel eksogen, apabila sampel sudah
terlalu lama didiamkan sewaktu pemrosesan atau apabila trombosit saling melekat.
V. ALAT DAN BAHAN
a. Alat

Mikroskop binokuler

b. Bahan Pemeriksaan:
Sediaan apusan darah

Oil imersi
Tisu lensa
VI.

CARA KERJA
1. Semua alat dan bahan yang diperlukan dipersiapkan
2. Mikroskop dihidupkan dengan menekan tombol on
3. Sediaan apusan darah yang telah diwarna atau dicat diletakkan di atas
meja mikroskop
4. Sediaan diamati pada pembesaran lensa objektif 10X untuk
menemukan lapang pandang
5. Pembesaran lensa objektif diubah ke pembesaran 100X dengan
penambahan oil imersi
6. Diamati sediaan apus darah, dicari daerah counting area (daerah

VII.
VIII.

pembacaan dimana pada daerah ini trombosit tampak tersebar merata

7. Hasil hasil penghitungan trombosit dinyatakan dalam %
NILAI NORMAL
Jumlah trombosit normal : 150.000 400.000 /l
HASIL PENGAMATAN
Identitas probandus
Nama
: Komang Sutantri
Umur
: 40 thn
Jenis Kelamin
: Perempuan
Jumlah trombosit
: 242.000/l

Preparat yang
digunakan

NB :
= Trombosit

= Giant Trombosit
LP 1
17
LP 10
13

IX.

LP 2
13
LP 11
11

LP 3
LP 4
LP 5
LP 6
15
14
16
14
LP 12 LP 13 LP 14 LP 15
14
12
22
11
TOTAL X 1000
JUMLAH TROMBOSIT

LP 7
13
LP 16
10

LP 8
LP 9
15
7
LP 17 LP 18
11
14
242 X 1000
242.000

PEMBAHASAN
Trombosit adalah fragmen atau kepingan-kepingan tidak berinti dari

sitoplasma megakariosit yang berukuran 1-4 mikron dan beredar dalam sirkulasi
darah selama 10 hari. Gambaran mikroskopik dengan pewarnaan Wright Giemsa,
trombosit tampak sebagai sel kecil, tak berinti, bulat dengan sitoplasma berwarna
biru-keabu-abuan pucat yang berisi granula merah-ungu yang tersebar merata.
Trombosit atau platelet sangat penting untuk menjaga hemostasis tubuh.
Adanya abnormalitas pada vaskuler, trombosit, koagulasi, atau fibrinolisis akan
menggangu

hemostasis

sistem

vaskuler

yang

mengakibatkan

perdarahan

abnormal/gangguan perdarahan (Sheerwood,2001).

Penegakkan diagnosis tentang penyebab utama gangguan perdarahan amat
penting dan hal ini dibutuhkan ketelitian yang cermat, efektif, dan efisien dalam hal
anamnesis, pemeriksaan fisik, dan pemeriksaan laboratorium yang semata-mata
untuk menghindari kesalahan diagnosis. Apapun penyebab gangguan perdarahan,
ternyata memberikan gambaran klinis yang hampir sama. Maka dari itu, hampir
semua kasus gangguan perdarahan membutuhkan pemeriksaan yang lanjut demi
tegaknya diagnosis penyakit tersebut (Candrasoma,2005).
Trombosit memiliki zona luar yang jernih dan zona dalam yang berisi
organel-organel sitoplasmik. Permukaan diselubungi reseptor glikoprotein yang
digunakan untuk reaksi adhesi & agregasi yang mengawali pembentukan sumbat
hemostasis. Membran plasma dilapisi fosfolipid yang dapat mengalami invaginasi
membentuk sistem kanalikuler. Membran plasma ini memberikan permukaan
reaktif luas sehingga protein koagulasi dapat diabsorpsi secara selektif. Area
submembran, suatu mikrofilamen pembentuk sistem skeleton, yaitu protein
kontraktil yang bersifat lentur dan berubah bentuk. Sitoplasma mengandung
beberapa granula, yaitu: granula densa, granula, lisosome yang berperan selama

reaksi pelepasan yang kemudian isi granula disekresikan melalui sistem kanalikuler.
Energi yang diperoleh trombosit untuk kelangsungan hidupnya berasal dari
fosforilasi oksidatif (dalam mitokondria) dan glikolisis anaerob
Kelainan Perdarahan ditandai dengan kecenderungan untuk mudah
mengalami perdarahan, yang bisa terjadi akibat kelainan pada pembuluh darah
maupun kelainan pada darah. Kelainan yang terjadi bisa ditemukan pada faktor
pembekuan darah atau trombosit. Dalam keadaan normal, darah terdapat di dalam
pembuluh darah (arteri, kapiler dan vena). Jika terjadi perdarahan, darah keluar dari
pembuluh darah tersebut, baik ke dalam maupun ke luar tubuh. Tubuh mencegah
atau mengendalikan perdarahan melalui beberapa cara.
Homeostatis adalah cara tubuh untuk mengentikan perdarahan pada
pembuluh darah yang mengalami cedera.
Hal ini melibatkan 3 proses utama:

Konstriksi (pengkerutan) pembuluh darah

Aktivitas trombosit (partikel berbentuk seperti sel yang tidak teratur, yang

terdapat di dalam darah dan ikut serta dalam proses pembekuan)

Aktivitas faktor-faktor pembekuan darah (protein yang terlarut dalam

plasma).
Kelainan pada proses ini bisa menyebabkan perdarahan ataupun
pembekuan yang berlebihan, dan keduanya bisa berakibat fatal.

Trombosit

Trombosit sukar dihitung karena mudah sekali pecah dan karena sukar
dibedakan dengan kotoran kecil. Dan ditambah dengan sifatnya yang cenderung
melekat pada permukaan asing (bukan endotel utuh) dan menggumpal-gumpal.
Ada dua cara yang lazim di pakai, yaitu cara langsung dan cara tidak langsung.
Pada cara tidak langsung jumlah trombosit dibandingkan dengan jumlah eritrosit,
sedangkan jumlah eritrosit itulah yang sebnarnya dihitung. Untuk mencegah
trombosit melekat pada permukaan asing, dianjurkan untuk menggunakan alat-alat
gelas yang dilapisi silikon atau alat-alat plastik.
Pada praktikum kali ini dilakukan hitung jenis trombosit dengan menggunakan
metode tidak langsung dalam sediaan hapusan darah tepi. Hapusan ini diwarnai

dengan menggunakan cat Giemsha dari sampel darah pasien di rumah sakit
Sanglah. Untuk mengevaluasi hapusan darah tepi agar dapat mengetahui hitung
jumlah trombosit dalam berapa lapang pandang sehingga jumlah trombosit dapat
ditentukan yaitu dengan melihat jenis mikroskop dari nilai FN dalam mikroskop,
dimana FN ini adalah berapa luas dari setiap lapang pandang yang dilihat dari jenis
mikroskop tersebut. Ada 2 jenis FN, ada FN 18 dan FN 22. Apabila FN 18 berarti
kita menghitung jumlah trombosit dalam 18 lapang pandang kemudian dikali 1.000.
Samentara jika FN 22 berarti kita menghitung jumlah trombosit dalam 11 lapang
pandang dikali 1.000. Setelah kita mengetahui jenis FN maka trombosit dapat
diamati dan dihitung jumlahnya. Langkah pertama yang dilakukan adalah pada
perbesaran 10x dicari lapang pandangnya kemudian ditambahkan oil imersi diamati
dan dihitung jumlah trombosit dengan perbesaran 100x, dimana kondensor harus
full, dan diafragma full dibuka dalam 18 lapang pandang.
Pada praktikum kali ini didapatkan jumlah trombosit dalam 18 lapang pandang
adalah 242. Untuk mengetahui jumlah trombosit dalam darah maka total trombosit
dalam 18 lapang pandang dikali 1000 sehingga didapatkan hasil jumlah trombosit
sebesar 242.000. Hasil pada hitung jumlah trombosit dengan alat otomatik sebesar
267.000, Perbedaan hasil ini dikarenakan sangat sulit untuk membedakan trombosit
dengan sisa cat, dan kotoran.
Pada prinsipnya semua hasil hitung trombosit baik normal maupun abnormal
yang diperiksa secara langsung harus dilakukan cross check dengan Sediaan Apusan
Darah Tepi. Cross check pada Sediaan Apusan Darah Tepi bertujuan untuk
mengetahui ada tidaknya perbedaan antara hitung trombosit secara langsung dan
estimasi.
Perbedaan mencolok antara hitung trombosit secara langsung dan estimasi dapat
disebabkan oleh 3 faktor :
1. Faktor pranalitik. Misalnya :
Sampel tertukar
cara sampling yang tidak benar
kesalahan mencantumkan identitas
2. Faktor analitik. Misalnya :
Cara pembuatan Sediaan Apusan Darah Tepi yang tidak memenuhi syarat
kesalahan alat hitung yang dipakai.

3. Faktor post analitik, biasanya terjadi saat penulisan hasil.

Sediaan Apusan Darah Tepi untuk estimasi jumlah trombosit harus dibuat sebaik
mungkin, sehingga terbentuk daerah baca yang baik. Trombosit harus terdistribusi
rata dan tidak menggerombol, apabila trombosit cenderung bergerombol harus
dibuat Sediaan Apusan Darah Tepi baru dengan cara terlebih dahulu mencampur
sampel darah secara baik.
Berdasarkan susunan populasi sel darah merah Sediaan Apusan Darah Tepi
dibagi menjadi 6 zona, yaitu:
Zona I disebut zona irreguler, di daerah ini sel darah merah tidak teratur dan
kadang ada yang padat bergerombol. Daerah ini meliputi kira-kira 3% dari

seluruh badan SADT.

Zona II disebut zona tipis, dimana distribusi sel darah merah tidak teratur,

saling berdesakan dan bertumpuk. Zona ini meliputi sekitar 14%.

Zona III disebut zona tebal, dimana sel-sel darah merah bergerombol dan

padat luas zona ini sekitar 45% atau hampir separo dari badan SADT.
Zona IV disebut juga zona tipis, yang sama kondisinya dengan zona II hanya

lebih tipis. Luasnya sekitar 18% dari SADT.

Zona V, zona reguler merupakan tempat sel-sel tersebar rata tidak saling
bertumpuk dan bentuk-bentuknya masih asli. Daerah ini meliputi sekitar 11%

dari badan SADT.

Zona VI juga disebut zona sangat tipis, terletak di ujung sediaan apus
sebelum ekor. Di sini sel-sel lebih longgar dan umunya berderet. Zona ini
luasnya sekitar 9% dari badan SADT. Metoda estimasi menurut Barbara
Brown, apabila pada zona V dengan pembesaran lensa obyektif 100 kali
ditemukan 1 trombosit maka dikalikan dengan 20.000. Faktor perkalian (f)
menurut Barbara Brown adalah 20.000.
Kelainan-kelainan Trombosit
Trombosit memiliki fungsi penting dalam mencegah dan menghentikan

perdarahan. Sel yang sangat kecil ini bisa anda anggap sebagai sumbat kecil (mikro)
yang bertugas setiap kebocoran yang terjadi di pembuluh darah.
Kelainan trombosit meliputi kuantitas dan kualitas trombosit.

Trombositopenia adalah

berkurangnya jumlah trombosit dibawah normal,

yaitu kurang dari 150.000 /l. Dalam

evaluasi

trombositopenia,

awal yang penting adalah melihat kembali apusan

darah

langkah

tepi

untuk

menyingkirkan pseudotrombositopenia, terutama pada pasien tanpa penyebab

trombositopenia yang jelas. Pseudotrombositopenia adalah suatu artefak in
vitro yang dihasilkan oleh aglutinasi

trombosit

melalui

antibodi-

antibodi (umumnya IgG, tetapi juga IgM an IgA) saat kandungan

kalsium

berkurang akibat penampungan darah dalam ethylenediamine

tetraacetic (EDTA); oleh karena itu apusan darah untuk menghitung jumlah
trombosit hendaknya dari darah yang ditampung
(tabung

dalam sodium

dengan tutup biru), heparin (tabung dengan tutup

idealnya

dari

darah

segar

hijau),

tanpa antikoagulan. Pemeriksaan

citrate
atau
fisik

menunjukkan pembesaran limpa, penyakit hepar kronik, dan kelainankelainan yang mendasari lainnya
Trombositopenia dapat terjadi karena beberapa keadaan :
o Penurunan produksi (megakariositopeni), terjadi bila fungsi sumsum tulang
terganggu .
o Meningkatnya destruksi (megakariositosis), terjadi akibat trombosit yang
beredar berhubungan dengan mekanisme imun.
o Akibat pemakaian yang berlebihan (megakariositosis), misalnya pada DIC
(Disseminated Intravasculer Coagulation), kebakaran, trauma.
o Pengenceran trombosit.
o Dapat terjadi oleh karena tranfusi yang dibiarkan dalam waktu singkat
dengan

memakai

darah

murni

yang

disimpan

sehingga

dapat

mengakibatkan kegagalan hemostatik pada resipien.

o ITP ( Idiopathic Trombocytopenia Purpura) atau Purpura Trombositopenia
Idiopatik merupakan suatu keadaan trombositopenia (kurangnya jumlah
trombosit) yang disebabkan oleh adanya antibodi anti-trombosit. Jadi
antibodi ini merusak trombosit, sehingga terjadi pengrusakan trombosit dan
menyebabkan

jumlahnya

perdarahan (purpura).

menurun

dan

menyebabkan

manifestasi

Gambar 2. Trombosit clumping

Perlu diperhatikan juga, kadang jumlah trombosit yang dihitung secara
otomatis oleh mesin menunjukkan hasil yang rendah, padahal jumlah yang
sebenarnya normal. Hal ini dapat terjadi karena adanya penggumpalan
(clumping) trombosit setelah darah dicampurkan dengan antikoagulan EDTA
yang menyebabkan trombosit tidak dapat disedot masuk ke dalam mesin.

Trombositemi/trombositosis

adalah peningkatan

jumlah

trombosit di

atas 350000/mm3atau 400000/mm3. Terdapat 3 kelainan utama penyebab

trombositemi, yaitu : kelainan klonal (Trombositemi esensial/primer dan
kelainan

mieloproliferatif

lain),

trombositosis

reaktif

terhadap

Trombositemi

primer

sering

familial (mutasi
berbagai

ditemukan

trombopoietin)

penyebab
secara

akut

tidak

dan

dan kronis.

sengaja

pada

pemeriksaan hematologi pada penderita yang asimtomatis. Trombositemi

esensial pertama kali dilaporkan oleh di Guglielmo pada tahun 1920 dan
Epstein dan Goedel pada tahun 1934. Pada saat itu, Trombositemi
esensial dianggap merupakan bagian dari penyakit mieloproliferatif yang
lain (Polisitemia vera, Lekemi mielositik kronik, Mielofibrosis dengan mieloid
metaplasia). Pada tahun1960, Trombositemi esensial ditentukan sebagai
suatu penyakit mieloproliferatif yang berbeda.
Peningkatan kadar trombosit biasanya merupakan akibat dari penyakit
akut atau kronis yang lain (trombositosis reaktif). Penyebab yang sering adalah
keganasan dan peradangan kronis, seperti arthritis rheumatoid. Penyebab yang
lain adalah defisiensi besi dan splenektomi. Kadar trombosit biasanya dalam
rentang 500.000-1.000.000/l, tapi bisa juga lebih tinggi. Bahkan dari kasus
bulan Agustus lalu, saya menemukan seorang pasien dengan kadar trombosit
lebih dari 2.000.000/l. Selain itu, kadar trombosit bisa meningkat akibat
adanya

peningkatan

produksinya

secara

otonom

pada

penyakit

mieloproliferatif, contohnya pada trombositosis esensial dan polisitemia vera.

Gambar 3. Jumlah trombosit yang meningkat disertai giant trombosit

Trombositopati adalah keadaan yang menggambarkan kelainan trombosit
terutama yang melibatkan platelet faktor 3 dan selanjutnya pembentukan
tromboplastin plasma. Hal ini dapat disebabkan oleh kelainan bawaan /
didapat. Separti, Hemofilia adalah suatu penyakit menurun yang dapat
menyebabkan darah sulit membeku. Ada Beberapa usaha untuk dapat
mengatasi penyakit hemofilia, antara lain yaitu mengonsumsi makanan atau
minuman yang sehat, menjaga berat tubuh jangan berlebihan karena berat
badan yang berlebihan dapat mengakibatkan pendarahan pada sendi-sendi di
bagian kaki, dan berhati-hati lah dalam kehidupan sehari-hari untuk
memperkecil risiko terluka. Darah pada seorang penderita hemofilia tidak
dapat membeku dengan sendirinya secara normal.
Proses pembekuan darah pada seorang penderita hemofilia tidak secepat
dan sebanyak orang lain yang normal. Ia akan lebih banyak membutuhkan
waktu untuk proses pembekuan darahnya. Penderita hemofilia kebanyakan
mengalami gangguan perdarahan di bawah kulit; seperti luka memar jika
sedikit mengalami benturan, atau luka memar timbul dengan sendirinya jika
penderita telah melakukan aktifitas yang berat; pembengkakan pada
persendian, seperti lulut, pergelangan kaki atau siku tangan. Penderitaan para
penderita hemofilia dapat membahayakan jiwanya jika perdarahan terjadi pada
bagian organ tubuh yang vital seperti perdarahan pada otak.
Masalah Klinis
Dalam banyak kasus, gangguan trombosit diyakini disebabkan oleh gangguan

autoimun (serangan, untuk alasan yang tidak diketahui, oleh sistem kekebalan tubuh
terhadap sel-sel sehat sendiri). Dalam hal ini, trombosit dihancurkan sebelum
waktunya karena mereka beredar dalam darah. Sebuah gangguan autoimun yang
umum disebut idiopatik thrombocytopenic purpura (ITP), dan trombosit yang cepat
hancur dalam eritematosus lupus sistemik, juga gangguan autoimun.

PENURUNAN JUMLAH : ITP, myeloma multiple, kanker (tulang,

saluran gastrointestinal, otak), leukemia (limfositik, mielositik, monositik),
anemia aplastik, penyakit hati (sirosis, hepatitis aktif kronis), SLE, DIC,
eklampsia, penyakit ginjal, demam rematik akut. Pengaruh obat: antibiotik
(kloromisetin, streptomisin), sulfonamide, aspirin (salisilat), quinidin,
quinine, asetazolamid (Diamox), amidopirin, diuretik tiazid, meprobamat
(Equanil), fenilbutazon (Butazolidin), tolbutamid (Orinase), injeksi vaksin,
agen kemoterapeutik.

PENINGKATAN
pembedahan),

JUMLAH :

paskasplenektomi,

Polisitemia
karsinoma

vera,

trauma

metastatic,

(fraktur,
embolisme

pulmonary, dataran tinggi, tuberculosis, retikulositosis, latihan fisik

berat. Pengaruh obat : epinefrin (adrenalin)
Beberapa jenis leukemia atau sumsum tulang diinvasi kanker dapat menimbulkan
penurunan jumlah trombosit dan fungsi.

Sejumlah infeksi, termasuk rubella, mononucleosis, infeksi darah bakteri,

malaria, hepatitis, tuberkulosis (TBC), dan human immunodeficiency virus

(HIV), bisa menyebabkan gangguan trombosit.

Berbagai macam obat yang mampu menyebabkan gangguan trombosit bagi
sebagian kecil orang. Beberapa obat ini sangat umum digunakan, termasuk
aspirin, ibuprofen, dan antibiotik seperti pen isilin. Lainnya termasuk
quinidine dan kina (digunakan untuk mengobati malaria) dan obat-obatan

terlarang intravena.
Pada anemia aplastik, suatu kondisi yang jarang tapi sangat serius, produksi
trombosit (sel darah dan lainnya) dalam sumsum tulang sangat ditekan. Hal
ini dapat disebabkan oleh radiasi atau obat kemoterapi (untuk kanker),
senyawa

emas

(digunakan

untuk

mengobati

arthritis),

antibiotik

kloramfenikol, atau paparan asap pelarut organik, termasuk benzena dan lem.
Hal ini juga kadang terjadi pada orang-orang dengan hepatitis akut, tetapi

dalam banyak kasus penyebabnya tidak dapat ditentukan.

Alkoholisme kronis atau kekurangan vitamin B tertentu dapat menyebabkan
kelainan trombosit.

Transfusi darah masih dapat menyebabkan kekurangan trombosit sementara,

yang dapat diperburuk oleh reaksi kekebalan terhadap darah donor yang

mengarah ke kerusakan trombosit.

Berbagai cacat genetik dapat menyebabkan kelainan bawaan trombosit.
Koagulasi intravaskular diseminata (DIC) melibatkan fungsi gangguan

trombosit dan penurunan langsung dalam jumlah trombosit.

Kemoterapi dan radiasi pengobatan untuk kanker atau leukemia bisa
menghancurkan trombosit.

Faktor yang dapat mempengaruhi temuan laboratorium

1. Kemoterapi dan sinar X dapat menurunkan hitung trombosit,
2. Pengaruh obat (lihat pengaruh obat),
3. Penggunaan darah kapiler menyebabkan hitung trombosit cenderung lebih
rendah,
4. Pengambilan sampel darah yang lamban menyebabkan trombosit saling
melekat (agregasi) sehingga jumlahnya menurun palsu,
5. Tidak segera mencampur darah dengan antikoagulan atau pencampuran yang
kurang adekuat juga dapat menyebabkan agregasi trombosit, bahkan dapat
terjadi bekuan,
6. Perbandingan volume darah dengan antikoagulan tidak sesuai dapat
menyebabkan kesalahan pada hasil :
a. Jika volume terlalu sedikit (= EDTA terlalu berlebihan), sel-sel eritrosit
mengalami krenasi, sedangkan trombosit membesar dan mengalami
disintegrasi.
b. Jika volume terlalu banyak (=EDTA terlalu sedikit) dapat menyebabkan
terbentuknya jendalan yang berakibat menurunnya jumlah trombosit.
7. Penundaan pemeriksaan lebih dari 1 jam menyebabkan perubahan jumlah
X. KESIMPULAN
Pada praktikum kali ini digunakan preparat indirect untuk mengamati,
mengidentifikasi dan menghitung jumlah dari trombosit. Pada praktikum kali ini
didapatkan jumlah trombosit sebesar 242.000/l berbeda dengan hasil dari alat

otomatis yaitu 267.000, hal ini dikarena susah untuk membedakan trombosit dengan
sisa cat.

DAFTAR PUSTAKA

Anonim.2015.MenghitungTrombosit.
[online].tersedia.http://medikalteknologi.blogspot.co.id/2015/06/menghit
ung-trombosit.html.[diakses 8 juni 2016 07.12]
Bakta, I Made. 2007. Hematologi klinik Ringkas. Jakarta. Buku Kedokteran EGC
Eka Yuliani.2013.Laporan Praktikum Hitung Kadar Trombosit.[online].tersedia :
http://switianiekayuliani.blogspot.co.id/2013/12/laporan-praktikumhitung-kadar-trombosit.html.[diakses 8 juni 2016, 07.33]
Pearce, Evelyn C. 1979. Anatomi Dan Fisiologi untuk Para Medis. 133,
Jakarta : Gramedia
Riswanto. 2013. Pemeriksaan Laboratorium Hematologi. Yogyakarta: Alfamedia
Kanal

Medika

Soebrata, R. Ganda, 1968. Penuntun Laboratorium Klinik. Jakarata : Dian Rakyat

Ratnaningsih, T. dan Setyawati, 2003, Perbandingan Antara hitung Trombosit
Metode Langsung dan Tidak Langsung Pada Trombositopenia, Berkala
Kesehatan Klinik, Vol. IX, No. 1, Juni 2003, RS Dr. Sardjito, Yogyakarta.
Sacher, Ronald A. dan Richard A. McPherson, alih bahasa : Brahm U. Pendit dan
Dewi Wulandari, editor : Huriawati Hartanto, 2004,Tinjauan Klinis Hasil
Pemeriksaan Laboratorium, Edisi 11, EGC, Jakarta.
Widmann, Frances K., alih bahasa : S. Boedina Kresno dkk., 1992,Tinjauan
Klinis Atas Hasil Pemeriksaan Laboratorium, edisi 9, cetakan ke-1,
EGC, Jakarta, hlm. 117-132.
Price.Sylvia A &Lloraine M.Wilson,2003. Patofisioogi klinik proses-proses
penyakit vol.1.)