Penetapan Kadar Campuran Metformin Dan Glibenklamid Dalam Sediaan Tablet Secara Spektrofotometri Ultraviolet Metode Panjang Gelombang Berganda

Universitas Sumatera Utara
Repositori Institusi USU http://repositori.usu.ac.id

Fakultas Farmasi Skripsi Sarjana
2018
Penetapan Kadar Campuran Metformin

dan Glibenklamid Dalam Sediaan Tablet
Secara Spektrofotometri Ultraviolet
Metode Panjang Gelombang Berganda
Hutagalung, Rona Disinta
http://repositori.usu.ac.id/handle/123456789/3975
Downloaded from Repositori Institusi USU, Univsersitas Sumatera Utara
PENETAPAN KADAR CAMPURAN METFORMIN DAN
GLIBENKLAMID DALAM SEDIAAN TABLET SECARA
SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET
METODE PANJANG GELOMBANG BERGANDA
SKRIPSI
OLEH:
RONA DISINTA HUTAGALUNG
NIM 131501087
PROGRAM SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2018

SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh

Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
OLEH:
RONA DISINTA HUTAGALUNG
NIM 131501087
PROGRAM SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2018

KATA PENGANTAR
Puji dan syukur ke hadirat Tuhan Yang Maha Esa atas segala berkat,
anugerah dan karuniaNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian
hingga akhirnya menyelesaikan penyusunan skripsi dengan judul “Penetapan
Kadar Campuran Metformin dan Glibenklamid dalam Sediaan Tablet secara
Spektrofotometri Ultraviolet dengan Metode Panjang Gelombang Berganda”.
Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat guna memperoleh gelar Sarjana
Farmasi dari Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini penulis ingin menyampaikan terima kasih yang sebesar-
besarnya kepada Ibu Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku Dekan Fakultas
Farmasi. Bapak Prof. Dr. Muchlisyam, M.Si., Apt., selaku pembimbing yang telah
membimbing dengan penuh kesabaran, tulus dan ikhlas selama penelitian hingga
menyelesaikan penulisan skripsi ini. Bapak Prof. Dr. Ginda Haro, M.Sc., Apt.,
dan Ibu Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku dosen penguji yang telah
memberikan masukan, arahan, kritik dan saran dalam penyusunan skripsi ini. Ibu
Dr. Aminah Dalimunthe, S.Si, M.Si., Apt., sebagai pembimbing akademik dan
seluruh staf pengajar Fakultas Farmasi.
Penulis menyampaikan rasa terima kasih yang tak terhingga dan
penghargaan yang sebesar-besarnya kepada kedua orang tua penulis yang tercinta,
Gunung Doli Hutagalung (Alm), Ibunda Ramianna Simanjuntak, abang Hotma
Halomoan Hutagalung A.md., abang Pdt. Refindo Hutagalung S.Th., abang Andri
Hutagalung, dan adik Ristauli Hutagalung serta seluruh keluarga besar saya yang
selalu menyemangati, dan telah memberikan dukungan terbesar, doa, serta materil
selama perkuliahan hingga penyelesaian skripsi ini.
iv
Pada kesempatan ini juga penulis ingin menyampaikan rasa terima kasih
kepada teman-teman seperjuangan di Laboratorium Penelitian, serta teman-teman
seangkatan Reguler 2013 yang telah banyak memberikan saran, dukungan, dan
doa selama penelitian dan penyusunan skripsi ini berlangsung.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih memiliki banyak kekurangan, oleh
sebab itu dengan segala kerendahan hati penulis bersedia menerima kritik dan
saran yang membangun untuk kesempurnaan skripsi ini. Semoga skripsi ini dapat
bermanfaat bagi kita semua.
Medan, April 2018

Penulis,
Rona Disinta Hutagalung

NIM 131501087
v
SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT
Saya yang bertanda tangan dibawah ini:

Nama : Rona Disinta Hutagalung
Nomor Induk Mahasiswa : 131501087
Program Studi : S1- Reguler
Judul Skripsi : Penetapan Kadar Campuran Metformin dan
Glibenklamid dalam Sediaan Tablet secara
Spektrofotometri Ultraviolet dengan Metode
Panjang Gelombang Berganda
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dari hasil
pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah diajukan oleh orang lain
untuk memperoleh gelar kesarjanaan di perguruan tinggi lain, dan bukan plagiat
karena kutipan yang ditulis telah disebutkan sumbernya didalam daftar pustaka.
Apabila di kemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena didalam skripsi
ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia mendapat
sanksi apapun oleh Program Studi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara,
dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing.
Demikianlah surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk dapat
digunakan jika diperlukan sebagaimana mestinya.
Medan, 11 Maret 2018

Yang membuat pernyataan
Rona Disinta Hutagalung

NIM 131501087
vi
ABSTRAK
Banyak obat yang terdapat di pasaran dalam kombinasi dua atau lebih zat
aktif, seperti obat antidiabetes. Oleh karena itu muncul kesulitan untuk
menganalisis kadar masing-masing senyawa dalam campuran yang spektrumnya
tersembunyi dalam suatu bentuk spektrum besar yang saling tumpang tindih.
Tujuan penelitian ini adalah untuk menetapkan kadar campuran metformin dan
glibenklamid pada sediaan tablet secara spektrofotometri ultraviolet dengan
metode panjang gelombang berganda.
Penelitian ini dilakukan dengan pengambilan sampel secara purposif.
Penetapan kadar metformin dan glibenklamid secara spektrofotometri ultraviolet
dengan metode panjang gelombang berganda, dilakukan dengan beberapa tahapan
yaitu menentukan spektrum serapan, menentukan lima titik panjang gelombang
analisis, menentukan nilai serapan (a), kemudian menghitung kadar dengan
menggunakan operasi matriks.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa kadar metformin dan glibenclamid
pada tablet G® dalam pelarut metanol adalah sebesar (104,655 ± 0,4377) %
untuk metformin dan (100,256 ± 0,9069) % untuk glibenklamid, serta memiliki
akurasi yang baik yaitu metformin berada pada rentang (104,65 – 105,09) % dan
glibenklamid berada pada rentang (100,256 – 101,16) % dan juga memiliki
presisi yang baik dengan koefisien variasi (%KV) sebesar 0,2628 % dan 0,3641
% masing-masing untuk metformin dan glibenklamid.
Hasil penelitian menunjukan bahwa kadar campuran metformin dan
glibenklamid pada sediaan tablet memenuhi persyaratan sesuai dengan
persyaratan umum yang tertera pada Farmakope Indonesia edisi V (2014).
Kata kunci: Metformin, Glibenklamid, Tablet, Spektrofotometri Ultraviolet,

Panjang Gelombang Berganda
vii
DETERMINATION OF MIXTURE
METFORMINE AND GLIBENCLAMIDE IN TABLET
BY ULTRAVIOLET SPECTROPHOTOMETRY WITH
MULTIWAVELENGTH METHOD
ABSTRACT
Many medicines that were found on the market are the combination of
one or more active substance, such as antidiabetic. Therefore difficulty appears for
analayzing level of each component in mixture that its spectrum is hidden in big
spectrum form that overlap each other. This research was aimed to determine
mixture level of metformine and glibenclamide in tablet by ultraviolet
spectrophotometry with multiwavelength method.
This research was done by taking sample on purposive. Determine amount
of metformine and glibenclamide by ultraviolet spectrophotometry with
multiwavelength method, it has done by some steps such as deciding absorption
spectrum, wavelengths specified five-point analysis, the value of the absorption
type (a). then calculate levels using matrix operations.
The results of research shown that the level mixture of metformine in
tablet G® in methanol solvent that were analyzed are (104.655 ± 0.4377) % and
glibenclamide are (100.256 ± 0.9069) % and this method has good accuracy for
metformine, it shown by its range between (104.65 – 105.09)% and glibenclamide
are between (100.256 – 101.16) % and also has a good precision with coefficient
of variation (%CV) is 0.2628 % and glibenclamide is 0.3641%.
The result showed that amount of metformine and glibenclamide in tablet
was fulfilled common requirement of Indonesia Pharmacopoeia V edition (2014).
Keywords: Metformine, Glibenclamide, Tablet, Spectrophotometery Ultraviolet,

multiwavelength
viii
DAFTAR ISI
Halaman
LEMBAR JUDUL .................................................................................. i
LEMBAR PENGESAHAN .................................................................... iii
KATA PENGANTAR ........................................................................... iv
SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT ........................................ vi
ABSTRAK ............................................................................................. vii
ABSTRACT ............................................................................................ viii
DAFTAR ISI ........................................................................................... ix
DAFTAR TABEL .................................................................................. xiii
DAFTAR GAMBAR ............................................................................. xiv
DAFTAR GAMBAR DALAM LAMPIRAN ........................................ xv
DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................... xvii
BAB I PENDAHULUAN ................................................................... 1
1.1 Latar Belakang ............................................................... 1
1.2 Perumusan Masalah ........................................................ 3
1.3 Hipotesis Penelitian ......................................................... 3
1.4 Tujuan Penelitian............................................................. 3
1.5 Manfaat Penelitian ........................................................... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ......................................................... 5
2.1 Uraian Bahan .................................................................... 5
2.1.1 Metformin HCl .................................................. 5
2.1.2 Glibenklamid ..................................................... 7
2.2 Spektrofotometri Ultraviolet-Visibel (Uv-vis) .............. 8
ix
2.2.1 Pengertian Spektrofotometri Ultraviolet-Visibel 8
2.2.2 Komponen Spektrofotometri.............................. 8
2.2.3 Proses Penyerapan Radiasi Pada

Spektrofotometri Ultraviolet-Visibel…………. 9
2.2.4 Hukum Lambert-Beer ........................................ 11
2.2.5 Kegunaan Spektrofotometri Ultraviolet-Visibel 12
2.3 Analisis Multikomponen .............................................. 12
2.4 Validasi Metode Analisis............................................... 15
2.4.1 Akurasi .............................................................. 15
2.4.2 Presisi ................................................................ 16
2.4.3 Linieritas........................................................... 16
2.4.4 Rentang............................................................. 16
BAB III METODE PENELITIAN.......................................................... 17
3.1 Jenis Penelitian ............................................................. 17
3.2 Waktu dan Tempat Penelitian....................................... 17
3.3 Alat ............................................................................... 17
3.4 Bahan ............................................................................ 17
3.5 Pengambilan Sampel .................................................... 17
3.6 Prosedur Penelitian ....................................................... 18

3.6.1 Pembuatan Larutan Induk Baku Metformin ..... 18
3.6.2 Pembuatan Larutan Induk Baku Glibenklamid . 18
3.6.3 Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum

Metformin…………………………………….. 19
3.6.4 Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum

Glibenklamid ..................................................... 19
3.6.5 Pembuatan Larutan Standar Metformin ............. 19
x
3.6.6 Pembuatan Larutan Standar Glibenklamid .... 19
3.6.7 Pembuatan Serapan Larutan Standar ............. 20
3.6.8 Penentuan Panjang Gelombang Analisis dari

Tumpang Tindih spektrum ............................. 20
3.6.9 Penentuan Spektrum Serapan Campuran

Baku Metformin dan Glibenklamid ................ 21
3.6.10 Penentuan Kadar Metformin dan

Glibenklamid dalam Tablet............................. 21
3.6.11 Penentuan Kadar Metformin dan

Glibenklamid dalam Campuran ...................... 22
3.6.12 Analisis Hasil .................................................. 23
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................. 25
4.1 Spektrum Serapan Maksimum Metformin dan

Glibenklamid…………………………………………. 25
4.2 Spektrum Serapan dalam berbagai Konsentrasi ............ 26
4.3 Penentuan Panjang Gelombang Analisis .................... 28
4.4 Hasil Penentuan Nilai Serapan pada 5 Panjang

Gelombang .................................................................... 29
4.5 Hasil Spektrum Serapan Campuran Baku Metformin

dan Glibenklamid .......................................................... 37
4.6 Hasil Perbandingan Sebelum dan Sesudah Adisi .......... 37
4.7 Hasil Penentuan Kadar Metformin dan Glibenklamid

Tablet Pada Sediaan ..................................................... 38
4.8 Perbandingan Hasil Penelitian Penetapan Kadar

Metformin dan Glibenklamid ........................................ 41
4.9 Hasil Uji Validasi .......................................................... 42
4.9.1 Hasil Uji Akurasi................................................... 42
4.9.2 Hasil Uji Presisi .................................................... 43
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ............................................... 44
xi
5.1 Kesimpulan ................................................................. 44
5.2 Saran ........................................................................... 44
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................. 45
LAMPIRAN .......................................................................................... 47
xii
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
4.1 Data perhitungan nilai serapan (a) metformin pengulangan I ....... 30
4.2 Data perhitungan nilai serapan (a) metformin pengulangan II ... 31
4.3 Data perhitungan nilai serapan (a) metformin pengulangan III .. 31
4.4 Data perhitungan nilai serapan (a) metformin pengulangan IV .. 32
4.5 Data perhitungan nilai serapan (a) metformin pengulangan V ... 32
4.6 Data perhitungan nilai serapan (a) metformin pengulangan V ... 33
4.7 Data perhitungan nilai serapan (a) glibenklamid pengulangan I 33
4.8 Data perhitungan nilai serapan (a) glibenklamid pengulangan II 34
4.9 Data perhitungan nilai serapan (a) glibenklamid pengulangan III 34
4.10 Data perhitungan nilai serapan (a) glibenklamid pengulangan IV 35
4.11 Data perhitungan nilai serapan (a) glibenklamid pengulangan V 35
4.12 Data perhitungan nilai serapan (a) glibenklamid pengulangan VI 36
4.13 Data Konsentrasi, Kadar dan Koefisien Variasi Metformin dan

Glibenklamid dalam tablet G® dengan analisis ........................... 40
4.14 Perbandingan Penelitian Penentuan Kadar metformin dan

glibenklamid ................................................................................. 41
4.15 Data hasil uji akurasil hasil matriks metfomin dan glibenklamid
pada tablet G® ……………………………………………………………………………… 42
xiii
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1 Struktur Metformin .................................................................. 5
2.2 Spektrum Metformin Hidroklorida .......................................... 6
2.3 Struktur Glibenklamid.............................................................. 7
2.4 Spektrum Glibenklamid ........................................................... 8
2.5 Spektrum absorbansi senyawa X dan Y ................................... 13
2.6 Spektrum absorbansi senyawa X dan Y, spektrum X

Bertumpang tindih pada spektrum Y ....................................... 13
2.7 Spektrum absorbansi senyawa X dan Y saling tumpang tindih 14
4.1 Spektrum serapan maksimum metformin konsentrasi 4 μg/mL 25
4.2 Spektrum serapan maksimum glibenklamid konsentrasi 8,7

μg/mL…………………………………………………………
. 26
4.3 Spektrum serapan metformin dengan konsentrasi 2 μg/mL -
6 μg/mL…………………………………………… ................ 26
4.4 Spektrum serapan glibenklamid dengan konsentrasi 4,7

μg/mL – 12,7 μg/mL…………………………………… ........ 27
4.5 Tumpang tindih spektrum serapan maksimun metformin

Konsentrasi 4 µg/ml dan glibenklamid 8,7
µg/ml……………………………………................................. 27
4.6 Spektrum tumpang tindih serapan maksimun metformin 4

μg/mL dan glibenklamid 8,7 μg/mL ....................................... 28
4.7 Lima titikpanjang gelombang analisis yang digunakan ........... 29
4.8 Spektrum Campuran Sebelum Metode Adisi Standar ............. 37
4.9 Spektrum Campuran Sesudah Metode Adisi Standar .............. 38
4.10 Spektrum Serapan Tablet G® ................................................... 39
xiv
DAFTAR GAMBAR DALAM LAMPIRAN
Gambar Halaman
1 Sampel Tablet G®........................................................ 47
2 Spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu 1800) ............. 49
3 Neraca analitik (Boeco) .............................................. 49
4 Sonikator (Branson 1510) .......................................... 49
5 Spektrum serapan metformin dengan konsentrasi 2,0-

6,0 μg/mL pengulangan 1 .......................................... 60



6,0μg/mL pengulangan 4 ........................................... 61


11 Spektrum serapan glibenklamid dengan konsentrasi

4,7-12,7 μg/mL pengulangan 1 .................................. 63





xv
17 Spektrum serapan baku campuran pengulangan 1 ...... 66
18 Spektrum serapan baku campuran pengulangan 2 ...... 66
19 Spektrum serapan baku campuran pengulangan 3 ..... 67
23 Spektrum serapan metformin dan glibenklamid

dalam Sampel Tablet G® pengulangan 1.…………... 69

dalam Sampel Tablet G® pengulangan 2…………… 69




xvi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1 Gambar Sampel Tablet G® ……………………………… 47
2 Komposisi Tablet G® ........................................................ 48
3 Gambar Alat ...................................................................... 49
4 Bagan Alir Prosedur Penelitian ....................................... 56
5 Perhitungan Kadar Teoritis dari Campuran Baku

Metformin dan Glibenklamid ............................................ 57
6 Spektrum serapan Metformin dengan konsentrasi 2,0-6,0

μg/mL yang dibuat sebanyak 6 kali pengulangan ............. 60
7 Spektrum serapan Glibenklamid dengan konsentrasi 4,7-

12,7 μg/mL yang dibuat sebanyak 6 kali pengulangan .... 63
8 Spektrum Serapan Baku Campuran Metformin dan

Glibenklamid yang di buat Sebanyak 6 kali pengulangan 66
9 Spektrum serapan Metformin dan Glibenklamid dalam

Sampel Tablet G® di buat sebanyak 6 kali pengulangan ... 69
10 Data Penimbangan dan Serapan dari Tablet G® ............... 72
11 Contoh Perhitungan Kadar Teoritis dari Metformin dan

Glibenklamid dalam Tablet G® ......................................... 73
12 Data Perhitungan Kadar Perolehan Operasi Matriks

Metformin dan Glibenklamid pada tablet G® ................... 75
13 Perhitungan Kadar Akurasi dari Perolehan Matriks

Metformin dan Glibenklamid ............................................ 77
14 Perhitungan Statistik Kadar MetforminDan Glibenklamid

Pada Sediaan Tablet G ®.................................................... 78
15 Perhitungan % KV (Koefisien Variasi) Metformin dan

Glibenklamid pada Tablet ................................................. 85
16 Sertifikat Pengujian Glibenklamid .................................... 86
17 Daftar Nilai Distribusi T .................................................. 87
18 Daftar Nilai Distribusi r ................................................... 88
xvii
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Obat adalah zat aktif berasal dari nabati, hewani, kimiawi alam maupun
sintetis dalam dosis atau kadar tertentu dapat dipergunakan untuk preventif
(pencegahan), diagnosa (mengetahui penyakit), terapi (pengobatan), dan
pemulihan terhadap suatu penyakit pada manusia maupun hewan. Zat aktif
tersebut dapat dipergunakan sebagai obat terlebih dahulu harus dibuat dalam
bentuk sediaan seperti pil, tablet, kapsul, sirup, suspensi, supositoria, dan salep
(Jas, 2007). Saat ini, sangat banyak beredar produk obat yang mengandung
kombinasi dua atau lebih bahan aktif. Kombinasi dimaksudkan agar obat dapat
lebih efektif mencapai sasaran terapi (Febriani, 2016).
Metformin adalah obat antidiabetes tipe 2 yang termasuk golongan
biguanid. Metformin bekerja dengan cara mengurangi produksi glukosa oleh hati
dan meningkatkan sensitivitas jaringan otot terhadap insulin. Sedangkan,
Glibenklamid bekerja dengan cara merangsang sekresi insulin dari granul sel-sel
langerhans pankreas rangsangannya melalui interaksinya dengan ATP- sensitive
K channel pada membran sel-sel sehingga terjadi sekresi insulin. Metformin dan
Glibenklamid merupakan kombinasi yang cocok untuk penderita Diabetes Miletus
tipe 2 yang tidak bisa dikontrol dengan single terapi, diet dan olahraga (Suherman,
2012).
Pada pembuatan obat, pemeriksaan kadar zat aktif merupakan persyaratan
yang harus dipenuhi untuk menjamin kualitas sediaan obat. Sediaan obat yang
berkualitas baik akan menunjang tercapainya efek terapi yang diharapkan. Salah
1
satu persyaratan kadar seperti yang tercantum dalam Farmakope Indonesia atau
buku standar lainnya (Ditjen POM R. I., 1979). Menurut Farmokope Indonesia
Edisi V tahun 2014, persyaratan kadar untuk tablet metformin dan glibenklamid
yaitu mengandung tidak kurang dari 95,0% dan tidak lebih dari 105,0% dari
jumlah yang tertera pada etiket.
Farmakope Indonesia Edisi V tahun 2014 merekomendasikan penggunaan
kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT) untuk menetapkan kadar kedua
komponen itu. Metode ini memerlukan alat dan biaya operasional yang relatif
mahal serta waktu analisis yang relatif lama. Mengingat hal itu, maka diperlukan
metode analisis alternatif yang memerlukan alat dan biaya operasional yang
murah, serta lebih mudah dalam pelaksanaanya, namun dapat memberikan hasil
dengan akurasi dan presisi yang baik (Kementerian Kesehatan R. I., 2014).
Pada penelitian sebelumnya telah dilakukan penetapan kadar campuran
metformin dan glibenklamid pada sediaan tablet dapat ditetapkan dengan KLT
densitometry secara simultan dengan fase gerak metanol, air dan asam asetat
glasial (6:4:0,25) (Andayani, dkk., 2015). Metode spektrofotometri secara panjang
gelombang berganda adalah salah satu metoda yang titik serapan dari campuran
obat ditentukan pengukuran pada berbagai panjang gelombang yang kurva
serapannya telah ditumpang tindihkan (Zainuddin, 1999).
Metode spektrofotometri ultraviolet (UV) digunakan untuk menganalisis
senyawa tunggal, dengan adanya modifikasi metode spektrofotometri ultraviolet
ini maka dapat digunakan untuk analisis multikomponen dalam rangka
pengawasan mutu dengan memodifikasi tersebut maka penetapan kadar campuran
obat dapat ditetapkan secara bersama-sama tanpa harus dipisahkan dan dengan
2
waktu yang singkat dengan alat dan biaya yang relatif lebih murah (Andrianto,
2009).
Berdasarkan uraian diatas, dalam penelitian ini akan dilakukan penetapan
kadar campuran metformin dan glibenklamid pada sediaan tablet secara
spektrofotometri ultraviolet dengan metode panjang gelombang berganda.
1.2 Perumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang diatas, maka perumusan masalah dalam penelitian
ini adalah sebagai berikut:
a. Apakah kadar metformin dan glibenklamid dalam sediaan tablet memenuhi
persyaratan kadar yang ditetapkan Farmakope Indonesia Edisi V tahun 2014?
b. Campuran metformin dan glibenklamid yang ditetapkan kadarnya secara
panjang gelombang berganda mempunyai akurasi dan presisi yang baik?
1.3 Hipotesis
Berdasarkan perumusan masalah diatas, maka dibuat hipotesis sebagai berikut:
a. Kadar metformin dan glibenklamid dalam sediaan tablet memenuhi
persyaratan kadar yang ditetapkan Farmakope Indonesia Edisi V tahun 2014
b. Campuran metformin dan glibenklamid yang ditetapkan kadarnya secara
panjang gelombang berganda mempunyai akurasi dan presisi yang baik
1.4 Tujuan Penelitian
Tujuan dilakukannya penelitian ini adalah:
a. Untuk mengetahui Kadar metformin dan glibenklamid dalam sediaan tablet
memenuhi persyaratan kadar yang ditetapkan Farmakope Indonesia Edisi V
tahun 2014
3
b. Untuk mengetahui akurasi dan presisi yang baik pada campuran metformin
dan glibenklamid yang ditetapkan kadarnya secara panjang gelombang
berganda
1.5 Manfaat Penelitian
Manfaat penelitian ini adalah untuk memberikan informasi bahwa kadar
campuran metformin dan glibenklamid dapat ditentukan dengan metode
spektrofotometri ultraviolet secara panjang gelombang berganda dalam sediaan
tablet.
4
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Uraian Bahan
2.1.1 Metformin HCL
Menurut Kementerian Kesehatan R. I., (2014), uraian tentang metformin
adalah sebagai berikut :
Rumus struktur :
Gambar 2.1 Rumus Bangun Metformin
Nama Kimia : N,N-dimetilimidodikarbonimidik diamida
Rumus Molekul : C4H11N5.HCl
Berat Molekul : 165,6
Kandungan : Mengandung metformin HCL, C4H11N5.HCL tidak kurang
dari 95,0% dan tidak lebih dari 105,0% dari jumlah yang
tertera pada etiket.
Pemerian : Serbuk hablur, putih, tidak berbau atau hampir tidak
berbau, higroskopik.
Kelarutan : Mudah larut dalam air, praktis tidak larut dalam aseton
dan dalam metil klorida, sukar larut dalam etanol.
Pada tahun 1959, zat ini adalah derivat-dimetil dari kelompok biguanida yang
berkhasiat memperbaiki sensitivitas-insulin, terutama menghambat pembentukan
5
glukosa dalam hati serta menurunkan kolesterol- LDL dan trigliserida.Lagipula
berdaya menekan nafsu makan dan berbeda dengan sulfonilurea- tidak
meningkatkan berat badan. Oleh karenanya terutama digunakan pada pasien
(sangat gemuk) (Tan dan Rahardja, 2007).
Efek sampingnya agak sering terjadi berupa gangguan lambung-usus,
antara lain anorekxia, terutama pada dosis diatas 1,5 g/hari (Tan dan Rahardja,
2007).
Dosis: 3 dd 500 mg atau 2 dd 850 mg d.c. Bila perlu setelah 1-2 minggu
perlahan-lahan dinaikkan sampai maksimal 3 dd 1 gr (Tan dan Rahardja, 2007).
Menurut Moffat, dkk., (2011), metformin hidroklorida dalam metanol,
memiliki panjang gelombang maksimum sebesar 236 nm (A11 = 1163b)
Gambar 2.2 Spektrum Metformin Hidroklorida
6
2.1.2. Glibenklamid
Menurut Kementerian Kesehatan R. I., (2014), uraian tentang metformin
adalah sebagai berikut :
Rumus Struktur :
Gambar 2.3 Struktur Glibenklamid
Nama Kimia : 1-[4-{2-(5-kloro-2-metoksibenzamido) etil} benzen
sulfonil] 3-sikloheksilurea [10238-21-8]
Rumus Molekul : C23H28CIN3O5S
Berat Molekul : 494
Kandungan : Mengandung glibenklamid C23H28CIN3O5S tidak kurang
dari 95,0% dan tidak lebih dari 105,0% dari jumlah yang
tertera pada etiket.
Pemerian : Serbuk hablur, putih atau hampir putih.
Kelarutan : Agak sukar larut dalam metilen klorida, sukar larut dalam
etanol, praktis tidak larut dalam air.
Pada Tahun 1969, derivat-klormetoksi ini adalah obat pertama dari
antidiabetika generasi ke-2 dengan khasiat hipoglikemisnya yang kira-kira 100
kali lebih kuat daripada tolbutamida. Seringkali ampuh dimana obat-obat lain
tidak efektif (lagi). Risiko 'hipo' juga lebih besar dan lebih sering terjadi. Pola
kerjanya berlainan dengan sulfonilurea yang lain, yaitu dengan single-dose pagi
7
hari mampu menstimulir sekresi insulin pada setiap pemasukan glukosa (sewaktu
makan). Dengan demikian selama 24 jam tercapai regulasi gula darah optimal
yang mirip pada normal.Dosis: Permulaan 1 dd 2,5-5mg, bila perlu dinaikkan
setiap minggu sampai maksimal 2 dd 10 mg (Tan dan Rahardja, 2007).
Menurut Moffat, dkk., (2011), glibenklamid dalam metanol, memiliki
panjang gelombang maksimum 229 nm.
Gambar 2.4 Spektrum Glibenklamid
2.2 Spektrofotometri Ultraviolet-Visibel (UV-Vis)
2.2.1 Pengertian spektrofotometri ultraviolet-visibel
Spekrofotometri ultraviolet-visibel merupakan salah satu teknik analisis
spektrofotometri yang menggunakan sumber radiasi elektromagnetik sinar
ultraviolet dan sinar tampak dengan memakai instrumen spektrofotometer
(Gandjar dan Rohman, 2007). Spektrofotometer digunakan untuk mengukur
energi secara relatif jika energi tersebut ditransmisikan, direfleksikan, atau
diemisikan sebagai fungsi dari panjang gelombang (Khopkar, 1985).
8
2.2.2 Komponen spektrofotometri
Spektrofotometer adalah alat yang terdiri dari spektrometer
dafotometer.Spektrometer menghasilkan sinar dari spektrum dengan panjang
gelombang tertentu dan fotometer adalah alat pengukur intensitas cahaya yang
ditransmisikan atau yang diabsorpsi (Khopkar, 1985).
Diagram spektrofotometer ultraviolet-visibel dapat dilihat pada Gambar
2.5.
Sumber Monokromator Sel Detektor Meter atau
pencatat
Penyerap
a. Sumber tenaga radiasi : sumber radiasi ultraviolet yang banyak digunakan
adalah lampu hidrogen dan lampu deuterium. Sedangkan untuk sumber
radiasi visible digunakan lampu tungsten (Sastrohamidjojo,1985).
b. Monokromator : digunakan untuk memperoleh sumber sinar yang
monokromatis (Khophar, 1985)
c. Sel absorpsi : pada pengukuran didaerah visible kuvet kaca dapat
digunakan, tetapi untuk pengukuran pada daerah ultraviolet kita harus
menggunakan sel kuarsa karena gelas tidak tembus cahaya pada daerah ini.
Umumnya tebal kuvetnya adalah 10mm. Sel yang biasa digunakan
berbentuk persegi (Khopkar, 1985).
d. Detektor : peranan detektor adalah memberikan respon terhadap cahaya
pada berbagai panjang gelombang (Khopkar, 1985).
2.2.3 Proses penyerapan radiasi pada spektrofotometer ultraviolet-visibel
Radiasi di daerah ultraviolet-visibel diserap melalui eksitasi elektron yang
terlibat dalan ikatan antara atom-atom pembentuk molekul (Gandjar dan Rohman,
2007; Watson, 2005).
9
Jika suatu berkas radiasi dikenakanpada larutan sampel maka intensitas
sinar radiasi yang diteruskan dapat diukur besarnya. Radiasi yang diserap oleh
cuplikan ditentukan dengan membandingkan intensitas sinar yang diteruskan
dengan intensitas sinar yang diserap jika tidak ada zat penyerap lainnya. Serapan
jika radiasi yang mengenai larutan sampel memiliki energi yang sama dengan
energi yang dibutuhkan untuk menyebabkan perubahan energi. Kekuatan radiasi
juga mengalami penurunan dengan adanya penghamburan dan pemantulan
cahaya, akan tetapi penurunan hal ini sangatkecildibandingkan dengan proses
penyerapan (Gandjar dan Rohman, 2007).
Sinar ultraviolet dan sinar tampak memberikan energi yang cukup untuk
terjadinya transisi electron (Gandjar dan Rohman, 2007). Elektron yang energinya
tertinggi dalam molekul, berada dalam tingkat energi elektron dasar, terdapat
dalam orbital δ, π, atau n, masing-masing mempunyai keadaan tereksitasi sesuai
dengan energi elektron terendah (Satiadarma, dkk., 2004).
Penyerapan sinarultraviolet dan sinar tampak dibatasi oleh sejumlah gugus
fungsional (yang disebut dengan kromofor) yang mengandung elektron valensi
dengan tingkat energi eksitasi yang relatif rendah. Elektron yangterlibat pada
penyerapan sinarultraviolet dan sinar tampak ini ada tiga, yaitu elektron sigma,
elektron phi, dan elektron bukan ikatan (non bonding electron) (Gandjar dan
Rohman, 2007).
Menurut (Gandjar dan Rohman, 2007), transisi-transisi elektronik yang
terjadi di antara tingkat-tingkat energi di dalam suatu molekul ada empat yaitu:
10
1. Transisi δ→δ*
Energi yang diperlukan untuk transisi ini besarnya sesuai dengan energi
sinar yang frekuensinya terletak di antara ultraviolet vakum (kurang dari 180 nm).
Jenis transisi ini terjadi pada daerah ultraviolet vakum sehingga kurang begitu
bermanfaat untuk analisis dengan cara spektrofotometri ultraviolet-visibel δ* anti
ikatan sigma π* anti ikatan phi n elektron non ikatan πikatan phi δ ikatan sigma.
2. Transisi n→δ*
Jenis transisi ini terjadi pada senyawa organik jenuh yang mengandung
atom-atom yang memiliki elektron bukan ikatan (elektron n). Energi yang
diperlukan untuk transisi jenis ini lebih kecil dibandingkan transisi δ→δ*
sehingga sinar yang diserap pun mempunyai panjang gelombang lebih panjang,
yakni sekitar 150-250 nm. Kebanyakan transisi ini terjadi pada panjang
gelombang kurang dari 200 nm.
3. Transisi n→π* dan transisi π→π*
Untuk memungkinkan terjadinya transisi ini, maka molekul organik harus
mempunyai gugus fungsional yang tidak jenuh sehingga ikatan rangkap dalam
gugus tersebut memberikan orbital phi yang diperlukan. Jenis transisi ini
merupakan transisi yang paling cocok untuk analisis dengan panjang gelombang
200-700 nm, dan panjang gelombang ini secara teknis dapat diaplikasikan pada
spektrofotometer ultraviolet-visibel.
2.2.4 Hukum Lambert-Beer
Hukum Lambert-Beer menyatakan bahwa intensitas yang diteruskan oleh
larutan zat penyerap berbanding lurus dengan tebal dan konsentrasi larutan
(Gandjar dan Rohman, 2007).
11
Hukum Lambert-Beer umumnya dikenal dengan persamaan sebagai
berikut:
A = a.b.c (g/liter) atau

A = ε.b.c (mol/liter) atau
A = A11.b.c (g/100 ml)
Keterangan: A = absorbansi
c = konsentrasi
a = absorptivitas
b = tebal kuvet (cm)
ε = absorptivitas molar
A11 = absorptivitas spesifik
2.2.5 Kegunaan spektrofotometri ultraviolet-visibel
Metode spektrofotometri memiliki beberapa keuntungan antara lain
kepekaan yang tinggi, ketelitian yang baik, mudah dilakukan, cepat
pengerjaannya, dan dapat digunakan untuk menentukan senyawa campuran
(Munson, 1984).
Data spektrum ultraviolet-visibel secara tersendiri dapat digunakan untuk
identifikasi kualitatif obat, tetapi sangat terbataskarena rentang daerah radiasi
yang relatif sempit hanya dapat menghasilkan sedikit sekali puncak absorpsi.
Penggunaan utama spektrofotometri ultraviolet-visibel adalah dalam analisis
kuantitatif. Apabila dalam alur radiasi spektrofotometer terdapat senyawa yang
mengabsorpsi radiasi, akan terjadi pengurangan kekuatan radiasi yang mencapai
detektor (Satiadarma, dkk., 2004; Gandjar dan Rohman, 2007).
2.3 Analisis Multikomponen
Sebuah spektrofotometri tidak dapat menganalisis suatu sampel. Alat itu
menjadi berguna setelah sampel itu diolah sedemikian rupa sehingga pengukuran
dapat ditafsirkan secara tak-kembar arti. Tetapi, dalam banyak hal tak perlu bahwa
tiap komponen individu dari suatu sampel yang kompleks dipencilkan satu dari
12
yang lainnya. Misalnya dalam spektrofotometri kadang-kadang mungkin untuk
mengukur lebih dari satu konstituen dalam suatu larutan tunggal. Andaikan suatu
larutan mengandung dua konstituen yang menyerap, X dan Y. Rumit tidaknya
situasi bergantung pada spectra serapan X dan Y (Day dan Underwood, 1986).
Menurut Day dan Underwood (1986), terdapat beberapa kemungkinan
yang terjadi pada spektrum absorban dua komponen sebagai berikut:
a. Kemungkinan I
Gambar 2.5 Spektrum absorban senyawa X dan Y
Pada Gambar 2.5 diatas menunjukkan terjadi kemungkinan Spektrum
tidak tumpang tindih pada dua panjang gelombang yang digunakan. X dan Y
semata-mata diukur masing-masing pada panjang gelombang λ 1 dan λ 2.
b. Kemungkinan II
Gambar 2.6 Spektrum absorban senyawa X dan Y, spektrum X bertumpang

tindih pada spektrum Y
13
Terjadi tumpang tindih satu cara dari Gambar 2.6 dimana Y tidak
mengganggu pengukuran X pada λ1, tetapi X memang menyerap cukup banyak
bersama-sama Y pada λ2. Konsentrasi X ditetapkan langsung dari absorban larutan
pada λ1, kemudian absorban yang disumbangkan oleh larutan X pada λ2 dihitung
dari absortivitas molar X pada λ2 yang telah diketahui sebelumnya. Sumbangan
imi dikurangkan dari absorban terukur larutan pada λ2 sehingga akan diperoleh
absorban yang disebabkan oleh Y, kemudian konsentrasi Y dapat diukur dengan
cara yang umum.
c. Kemungkinan III
Gambar 2.7 Spektrum absorban senyawa X dan Y saling tumpang tindih
Pada Gambar 2.7 spektrum X dan Y saling tumpang tindih secara
keseluruhan.Pada absorbansi maksimum dari komponen X pada λ1, komponen Y
memiliki absorbansi tersendiri. Begitu juga komponen Y pada λ2 ,komponen X
memiliki absorbansi sendiri.
Menurut Andrianto (2009) pada penetapan kadar campuran
multikomponen sulit dilakukan, sehingga untuk mengatasi hal itu diperkenalkan
analisis multikomponen menggunakan prinsip persamaan regresi berganda
melalui perhitungan matriks dengan metode pengamatan beberapa panjang
gelombang berganda.
14
Panjang gelombang dipilih berdasarkan spektrum tersebut mulai
memberikan serapan sampai hampir tidak memberikan serapan, dimana
konsentrasi larutan yang dipakai serapannnya memenuhi hukum Lambert dan
Beer yaitu 0,2-0,8. Penentuan panjang gelombang dengan memilih lima panjang
gelombang secara variabel bebas. Pada metode ini tidak diperlukan proses
pemisahan komponen zat aktif karena kadar komponen kedua zat dapat ditetapkan
secara bersama-sama (Andrianto, 2009).
2.4 Validasi Metode Analisis
Tujuan utama yang harus dicapai dari suatu kegiatan analisis kimia adalah
dihasilkannya data hasil uji yang absah (valid). Secara sederhana hasil uji yang
absah dapat digambarkan sebagai hasil uji yang mempunyai akurasi (accuracy)
dan presisi (precission) yang baik. Validasi adalah suatu tindakan penilaian
terhadap parameter tertentu pada prosedur penetapan yang dipakai untuk
membuktikan bahwa parameter tersebut memenuhi persyaratan untuk
penggunaannya (Harmita, 2004).
Parameter analisis yang ditentukan pada validasi adalah akurasi, presisi,
batas deteksi, batas kuantitasi, kelinieran, dan rentang (Gandjar dan Rohman,
2007).
2.4.1 Akurasi
Akurasi (kecermatan) adalah ukuran yang menunjukkan derajat kedekatan
hasil analisis dengan kadar analit sebenarnya. Rentang nilai % akurasi analit yang
dapat diterima adalah 90%-110% (Kementerian Kesehatan R. I., 2014).
Rentang ini bersifat fleksibel tergantung dari analit yang diperiksa, jumlah
sampel, dan kondisi laboratorium.Akurasi bisa juga dilakukan dengan perhitungan
15
matriks dari serapan komponen obat dan serapan campuran komponnen
(Andrianto, 2009).
2.4.2 Presisi
Presisi merupakan ukuran keterulangan metode analisis dan biasanya
diekspresikan sebagai simpangan baku relatif dari sejumlah sampel yang berbeda
signifikan secara statistik. Presisi bisa dinyatakan dalam koefisien variasi (KV)
dan dinyatakan memiliki presisi yang baik apabila KV < 2% (Gandjar dan
Rohman, 2007).
2.4.3 Linearitas
Linearitas suatu metode merupakan ukuran seberapa baik kurva kalibrasi
yang menghubungkan antara konsentrasi (X) dengan serapan (Y). Linearitas dapat
diukur dengan melakukan pengukuran tunggal pada konsentrasi yang berbeda-
beda.Data yang diperoleh selanjutnya dapat ditentukan nilai kemiringan (slope),
intersep, dan koefisien korelasinya (Gandjar dan Rohman, 2007; Watson, 2005).
Suatu koefisien korelasi -1≤ r ≤ 1 dianggap menunjukkan linearitas. Persamaan
suatu garis lurus menghasilkan Y = aX + b (Gandjar dan Rohman, 2007).
2.4.4 Rentang
Rentang adalah konsentrasi terendah dan tertinggi yang mana suatu
metode analitik menunjukkan akurasi, presisi dan linieritas yang cukup.Rentang
suatu prosedur dapat divalidasi lewat pembuktian bahwa prosedur analitik tersebut
mampu memberikan presisi, akurasi dan linieritas yang dapat diterima ketika
digunakan untuk menganalisis sampel (Ermer dan Mcb. Miller, 2005).
16
BAB III
METODE PENELITIAN
3.1 Jenis Penelitian
Penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental, dilakukan secara
spektrofotometri dengan metode panjang gelombang berganda yang merupakan
pengembangan dari metode spektrofotometri multikomponen terhadap analisa
campuran dua zat aktif, yaitu metformin dan glibenklamid pada sediaan tablet.
3.2 Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilakukan pada bulan Juli sampai dengan Oktober 2017 di
Laboratorium Penelitian Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
3.3 Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah Spektrofotometer
Ultraviolet-Visible (Shimadzu 1800) serta seperangkat Personal Computer (PC)
yang dilengkapi dengan software UV-Probe 2.42, kuvet 1 cm, alat-alat gelas
(Oberoi), lumpang dan alu, neraca analitik (Boeco Germany) serta alat-alat
lainnya yang diperlukan dalam penyiapan sampel. Beberapa alat yang digunakan
dapat dilihat pada Lampiran 3 halaman 49.
3.4 Bahan
Bahan-bahan yang digunakan adalah baku Metformin HCl (Dexa Medica)
dan Glibenklamid (Indofarma), metanol pa.
3.5 Pengambilan Sampel
Metode pengambilan sampel dilakukan secara purposif, yaitu ditentukan
atas dasar pertimbangan bahwa sampel yang diambil mempunyai karakteristik
17
yang sama dengan yang diteliti (Sudjana, 2005). Pengambilan sampel ditentukan
tanpa membandingkan sampel antara satu tempat dengan tempat yang lain, karena
pengambilan sampel dianggap homogen. Sampel yang digunakan dalam
penelitian ini adalah tablet Glucovance mengandung Metformin 250 mg dan
glibenklamid 1,25 mg. Gambar sediaan dan daftar spesifikasi sediaan tablet dapat
dilihat pada Lampiran 1 dan 2 halaman 47 dan 48.
3.6 Prosedur Penelitian
3.6.1 Pembuatan Larutan Induk Baku Metformin
Ditimbang dengan seksama 50,3 mg baku metformin, dimasukkan ke
dalam labu tentukur 50 mL, dicukupkan volume dengan pelarut metanol p.a
sampai garis tanda sehingga didapatkan larutan dengan konsentrasi 1006 µg/mL
(LIB I), kemudian dipipet 5 mL dari LIB I ke dalam labu tentukur 100 mL dan
dicukupkan dengan pelarut metanol p.a sampai garis tanda 50,3 µg/mL(LIB II).
Bagan alir prosedur penelitian dapat dilihat pada Lampiran 4 halaman 50.
3.6.2 Pembuatan Larutan Induk Baku Glibenklamida
Ditimbangdengan seksama 25,2 mg glibenklamid, dimasukkan ke dalam
labu tentukur 25 mL, dicukupkan volume dengan pelarut metanol p.a hingga garis
tanda tanda sehingga didapatkan larutan dengan konsentrasi 1008µg/mL (LIB I),
kemudian dipipet 2,5 mL dari LIB I ke dalam labu tentukur 25 mL dan ditambah
pelarut sampai garis tanda sehingga didapatkan larutan dengan konsentrasi
100,8µg/mL (LIB II). Bagan alir prosedur penelitian dapat dilihat pada Lampiran
4 halaman 51.
18
3.6.3 Pembuatan spektrum serapan maksimum Metformin
Dipipet 0,8 mL larutan induk baku (LIB II) metformin dimasukkan kedalam
labu ukur 10 mL, kemudian dicukupkan volumenya menggunakan pelarut
metanol sampai garis tanda dengan konsentrasi 4 µg/mL, kemudian diukur
serapannya panjang gelombang 200-400 nm.
3.6.4 Pembuatan spektrum serapan maksimum glibenklamid
Dipipet 0,9 mL larutan induk baku (LIB II) glibenklamid dimasukkan
kedalam labu ukur 10 mL, kemudian dicukupkan volumenya menggunakan
pelarut metanol sampai garis tanda dengan konsentrasi 8,7 µg/mL, kemudian
diukur serapannya panjang gelombang 200-400 nm.
3.6.5. Pembuatan Larutan Standar Metformin
Dipipet masing-masing 0,4; 0,6; 0,8; 1; 1,1 mL dari LIB II kedalam labu
ukur 10 mL, kemudian dicukupkan volumenya dengan menggunakan pelarut
methanol sampai garis tanda untuk mendapatkan larutan metformin konsentrasi 2;
3; 4; 5; 6 µg/mL secara berturut-turut. Dari larutan-larutan tersebut dibuat
spektrum serapannya. Bagan alir prosedur penelitian dapat dilihat pada Lampiran
4 halaman 52.
3.6.6Pembuatan Larutan Standar Glibenklamid
Dipipet masing-masing 0,5; 0,7; 0,9; 1,1; 1,3 mL LIB II kedalam labu ukur
10 mL, kemudian dicukupkan volumenya dengan menggunakan pelarut metanol
sampai garis tanda untuk mendapatkan larutan glibenklamid konsentrasi 4,7; 6,7;
8,7; 10,7; 12,7 µg/mL secara berturut-turut. Dari larutan-larutan tersebut dibuat
spektrum serapannya.Bagan alir prosedur penelitian dapat dilihat pada Lampiran 4
halaman 53.
19
3.6.7 Penentuan Serapan Larutan Standar
Larutan standar metformin dengan konsentrasi 2,0 μg/ml; 3,0 μg/ml; 4,0
μg/ml; 5,0 μg/ml; dan 6,0 μg/ml dan larutan standar glibenklamid dengan
konsentrasi 4,7 μg/ml; 6,7 μg/ml; 8,7μg/ml; 10,7 μg/ml; dan 12,7 μg/ml yang
masing-masing telah dibuat enam kali pengulangan, diukur serapannya pada
panjang gelombang 200-400 nm. Nilai serapankedua senyawa ditentukan dengan
menggunakan persamaan regresi yang dioperasikan pada data konsentrasi dan
absorbansi masing-masing komponen pada setiap panjang gelombang
pengukuran.
Dari persamaan regresi yang diperoleh:
y = ax + b
Keterangan:
y = harga serapan (A)
x = konsentrasi
a = koefisien regresi yang menunjukkan nilai serapan
b = konstanta
3.6.8 Penentuan panjang gelombang analisis dari tumpang-tindih spektrum
Dibuat larutan metformin dengan konsentrasi 4,0 μg/ml dan larutan
glibenklamid dengan konsentrasi 8,7 μg/ml, kemudian kedua larutan ini diukur
serapannya masing-masing pada panjang gelombang 200-400 nm. Selanjutnya,
spektrum serapan dari masing-masing komponen ditumpang tindihkan,
pembacaan spektrum ini dilakukan pada rentang panjang gelombang 220-260 nm,
karena pada rentang panjang gelombang ini metformin dan glibenklamid tumpang
tindih secara keseluruhan. Kemudian dipilih 5 titik sebagai panjang gelombang
yang akan digunakan, pemilihan panjang gelombang diambil dari spektrum
20
serapan komponen mulai memberikan serapan sampai hampir tidak memberikan
serapan. Bagan alir prosedur penelitian dapat dilihat pada Lampiran 4 halaman 54.
3.6.9 Penentuan spektrum serapan campuran baku metformin dan

glibenklamid
Ditimbang masing-masing 10 mg metformin BPFI dan glibenklamid BPFI,
masing-masing dimasukkan ke dalam labu tentukur 10 mL, dilarutkan dengan
pelarut metanol sampai garis tanda. Kemudian di pipet sebanyak 0,4 mL dari
larutan metformin (konsentrasi 1000 μg/mL) dan 0,87 mL dari larutan
glibenklamid(konsentrasi 1000 μg/mL). Kedua larutan dicampurkan ke dalam
labu tentukur 10 mL, dicukupkan dengan pelarut metanol sampai garis tanda.
Kemudian dari larutan tersebut dipipet1 mL, dimasukkan ke dalam labu tentukur
10 mL,dilarutkan dengan pelarut metanol sampai garis tanda. Diukur serapan pada
panjang gelombang 200-400 nm. Bagan alir prosedur penelitian dapat dilihat pada
Lampiran 4 halaman 55.
3.6.10 Penentuan kadar metformin dan glibenklamid dalam tablet
Ditimbang 20 tablet, kemudian digerus dalam lumpang sampai halus dan
homogen. Ditimbang seksama sejumlah serbuk setara 50 mg metformin
(penimbangan dilakukan sebanyak 6 kali pengulangan) dan dihitung kesetaraan
Glibenklamid yang terkandung didalamnya. Dimasukkan serbuk yang telah
ditimbang ke dalam labu tentukur 50 mL, dilarutkan dengan pelarut metanol p.a
dan dihomogenkan dengan sonikator selama 15 menit, dicukupkan sampai garis
tanda. Larutan tersebut disaring, lebih kurang 10 mL filtrat pertama dibuang,
filtrat selanjutnya ditampung. Kemudian dipipet sebanyak 0,1 mL dimasukkan ke
dalam labu tentukur 25 mL. Kemudian ditambahkan 4,3 mL larutan baku
glibenklamid (konsentrasi 50,3 µg/mL), di masukkan ke dalam labu tentukur 25
21
mL yang didalamnya terdapat 0,1 mL filtrat, lalu dicukupkan dengan pelarut
metanol p.a sampai garis tanda sehingga diperoleh larutan yang mengandung
metformin konsentrasi 3,9948 µg/mL dan glibenklamid 8,6801 µg/mL. Diukur
serapan pada panjang gelombang yang telah ditentukan. Bagan alir prosedur
penelitian dapat dilihat pada Lampiran 4 halaman 56.
Menurut Harmita (2004), dalam metode adisi standar (penambahan bahan
baku), sejumlah sampel yang dianalisis ditambah analit dengan kadar yang
diperlukan dari kadar analit yang diperkirakan, dicampur dan dianalisis kembali.
Selisih kedua hasil dibandingkan dengan kadar yang sebenarnya.
% Kadar sampel = x 100 %
Keterangan:
Ca = konsentrasi perolehan sampel setelah penambahan baku
Cb = konsentrasi baku yang ditambahkan
Cc = konsentrasi teoritis sampel sebelum penambahan baku
3.6.11 Perhitungan kadar Metformin dan Glibenklamid dalam campuran
Perhitungan kadar masing-masing komponen dalam campuran dilakukan atas
dasar serapan campuran (Ac) dan serapantiap komponen pada multi panjang
gelombang yang telah diketahui dari hasil pengukuran dengan menggunakan
persamaan matriks:
[c] = [[a] x [a1]]-1 x [a] x Ac]
Keterangan : [c] = konsentrasi komponen dari campuran

[a] = matriks serapansenyawa penyusun campuran
[a1] = transpose matriks serapan senyawa penyusun campuran
[[a] x[a1]]-1 = invers matriks dikalitranspose matriks serapan senyawa
penyusun campuran
[Ac] = matriks nilai serapan sampel
22
3.6.12 Analisis Hasil
Analisis hasil dilakukan untuk mengetahui validitas metode yang
digunakan dalam penelitian, berikut parameter yang diukur:
a. UjiAkurasi
Nilai akurasi dihitung dari hasil matriks kadar yang diperoleh
dibandingkan dengan kadar teoritis dikalikan % kadar sertifikat analisis. Akurasi
dikatakan baik jika berada dalam rentang 90,0-110,0% (Andrianto, 2009).
Akurasi dari hasil matriks diperoleh dengan rumus:
Akurasi dari hasil matriks = x % kadar sertifikat analisis
b.Uji Presisi
Penentuan presisi berdasarkan nilai koefisian variasi (KV) atau Coefficient
of variation (CV). Jika KV lebih kecil dari 2% maka dinilai mempunyai presisi
yang baik (Andrianto, 2009).
Koefisien variasi diperoleh dengan rumus: KV = x 100%
c. Analisis Data Penetapan Kadar Secara Statistik
Analisis data secara statistik menggunakan uji t. Untuk mengetahui apakah
data diterima atau ditolak digunakan rumus seperti di bawah ini :
t hitung =
Data perhitungan kadar metformin dan glibenklamid secara analisis
statistik dapat dilihat pada Lampiran 13 hal 78. Menurut Sudjana (2005), dasar
penolakan data jika t hitung ≥ t tabel dan t hitung ≤ -t table, untuk mencari kadar
sebenarnya dengan taraf kepercayaan 99% dengan derajat kebebasan dk =
n-1, digunakan rumus :
23
μ = ± t(1-1/2α)dk x
Keterangan :
μ = Interval kepercayaan
X = Kadar rata-rata sampel
X = Kadar sampel
t = Harga ttabel sesuai dengan dk = n-1
α = Tingkat kepercayaaan
dk = Derajat kebebasan (dk = n-1)
SD = Standar deviasi
n = Jumlah pengulangan
24
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Spektrum Serapan Maksimum Metformin dan Glibenklamid
Berdasarkan hasil penelitian, diperoleh panjang gelombang maksimum
metformin pada 236,6 nm dan glibenklamid pada 229,4 nm.
Spektrum serapan maksimum meformin konsentrasi 4,0 μg/mL dan
glibenklamid konsentrasi 8,7 μg/mL masing-masing dapat dilihat pada Gambar
4.1 dan 4.2.
0,50000
0,40000
0,30000
Abs.
0,20000
0,10000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
Gambar 4.1 Spektrum serapan maksimum metformin konsentrasi 4,0 μg/mL
25
0,50000
0,40000
0,30000
Abs.
0,20000
0,10000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
Gambar 4.2 Spektrum serapan maksimum glibenklamid konsentrasi 8,7 μg/mL
4.2 Spektrum Serapan dalam Berbagai Konsentrasi
Spektrum serapan metformin dan glibenklamid dari berbagai konsentrasi
dapat dilihat pada Gambar 4.3; 4.4, sedangkan spectrum tumpang tindih serapan
metformin dan glibenklamid dapat dilahat pada Gambar 4.5.
0,70000
Konsentrasi 2,0 µg/mL

0,60000

0,40000
Abs.

0,20000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
Gambar 4.3 Spektrum serapan metformin dengan konsentrasi 2,0-6,0 μg/mL
26
0,70000

0,60000
Konsentrasi 6.7 µg/mL

0,40000
Abs.

0,20000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
Gambar 4.4 Spektrum Serapan Glibenklamid dengan Konsentrasi 4,7-12,7µg/mL

0,70000
0,60000 Metformin 4,0 µg/mL
Glibenklamid 8,7 µg/mL
0,40000
Abs.
0,20000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
Gambar 4.5 Tumpang Tindih Spektrum Serapan Metformin Konsentrasi 4,0

µg/mL dan Glibenklamid 8,7 µg/mL
Spektrum serapan metformin dan glibenklamid dengan berbagai
konsentrasi dalam pelarut metanol menunjukkan bahwa konsentrasi tidak
mengubah bentuk spektrum dari masing-masing zat, sehingga bisa dikatakan
penggunaan pelarut metanol stabil terhadap metformin maupun glibenklamid.
Metode spektrofotometri biasa tidak dapat dilakukan untuk menetapkan
kadar metformin dan glibenklamid dalam campuran karena spektrum metformin
dan glibenklamid saling tumpang tindih dan serapan pada panjang gelombang
dalam spektrum campuran tidak menggambarkan besar konsentrasi zat tersebut
27
dalam campurannya. Berbeda dengan spektrofotometri metode panjang
gelombang berganda, metode ini memungkinkan untuk menetapkan kadar suatu
zat dalam campuran zat tersebut dengan zat lainnya, dengan syarat masing-masing
komponen masih memiliki serapan pada panjang gelombang yang ditentukan
(Andrianto, 2009).
4.3 Penentuan Panjang Gelombang Analisis

0,70000
0,60000 Metformin 4,0 µg/mL
Glibenklamid 8,7 µg/mL
0,40000
Abs.
0,20000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
Gambar 4.6 Spektrum tumpang tindih serapan maksimum metformin

konsentrasi 4,0 µg/mL dan glibenkamid konsentrasi 8,7 µg/mL
Dari Gambar 4.6 dapat dilihat bahan spektrum tumpang tindih serapan
dibuat dengan menggabungan kedua serapan dari metformin konsentrasi 4,0
µg/ml dan glibenklamid konsentrasi 8,7 µg/ml. Pembacaan spektrum serapan ini
dilakukan pada rentang panjang gelombang 220-260 nm, karena pada rentang
panjang gelombang ini metformin dan glibenklamid tumpang tindih secara
keseluruhan.Penentuan dilakukan dengan menggabungkan 2 spektrum, kemudian
dipilih lima panjang gelombang analisis metformin dan glibenklamid adalah 225
nm, 229,4 nm, 236,6 nm, 233 nm dan 243 nm. Spektrum panjang gelombang
analisis dapat dilihat pada Gambar 4.7.
28
0,70000
0,60000 236,6
229,4
233
225
243
0,40000
Abs.
0,20000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
Gambar 4.7 Lima panjang gelombang analisis yang digunakan
Berdasarkan Gambar 4.7 maka diperoleh lima panjang gelombang yang
akan digunakan. Lima panjang gelombang yang digunakan adalah 225 nm, pada
panjang gelombang ini metformin maupun glibenklamid mulai memberikan
serapan.Pada panjang gelombang 229,4 merupakan serapan maksimum
glibenklamid. Pada panjang gelombang 233 merupakan titik perpotongan
metformin dan glibenklamid. Pada panjang gelombang 236,6 karena merupakan
panjang gelombang maksimum metformin. Pada panjang gelombang 243 nm baik
metformin maupun glibenklamid serapannya mulai menurun, sedangkan titik
potong kedua yaitu pada panjang gelombang 255 nm tidak dipilih dikarenakan
pada titik tersebut baik metformin maupun glibenklamid hampir tidak
memberikan serapan.
4.4 Hasil Penentuan Serapanpada Lima Panjang Gelombang
Harga serapan merupakan nilai yang menunjukkan seberapa besar
konstribusi serapan suatu senyawa terhadap serapan dari campuran senyawa pada
panjang gelombang (Andrianto, 2009).
29
Penentuan harga serapan ini dilakukan dengan mengukurserapan masing-
masing larutan baku metformin dan glibenklamid pada panjang gelombang 225
nm; 229,4 nm; 233 nm; 236,6 nm; dan 243 nm. Data perhitungan serapan
metformin dan glibenklamid dapat dilihat pada Tabel 1-12:
Tabel 4.1 Data perhitungan nilai serapan (a) metformin pengulangan I
C 𝜆 𝜆 𝜆 𝜆 𝜆
( 225 nm 229,4 nm 233 nm 236,6 nm 243 nm
0,0 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000
2 0,1064 0,1404 0,1688 0,1834 0,1495
3 0,2022 0,2645 0,3162 0,3424 0,2802
4 0,2684 0,3586 0,4326 0,4706 0,3844
5 0,3067 0,4125 0,4987 0,5446 0,4459
6 0,3648 0,4913 0,5929 0,6455 0,5237
a= 0,062 a= 0,084 a= 0,101 a= 0,110 a= 0,090
r= 0,9941 r= 0,9951 r= 0,9953 r= 0,9955 r= 0,9952
30
Tabel 4.2 Data perhitungan nilai serapan (a) metformin pengulangan II
225 nm 229,4 nm 233 nm 236,6 nm 243 nm
0,0 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000
2 0,2240 0,2531 0,2750 0,2810 0,2273
3 0,2503 0,3009 0,3405 0,3566 0,2891
4 0,2903 0,3593 0,4120 0,4350 0,3499
5 0,3450 0,4270 0,4907 0,5189 0,4193
6 0,4117 0,5132 0,5932 0,6298 0,5067
a= 0,063 a= 0,080 a= 0,094 a= 0,100 a= 0,080
r= 0,9721 r= 0,9838 r= 0,9885 r= 0,9915 r= 0,9911
Tabel 4.3 Data perhitungan nilai serapan (a) metformin pengulangan III
( 225 nm 229,4 nm 233 nm 236,6 nm 243 nm
0,0 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000
4,7 0,2072 0,2285 0,2430 0,2446 0,1991
6,7 0,2637 0,2989 0,3245 0,3300 0,2667
8,7 0,3499 0,3962 0,4297 0,4373 0,3515
10,7 0,4155 0,4816 0,5308 0,5471 0,4433
12,7 0,4854 0,5720 0,6379 0,6620 0,5372
a= 0,079 a= 0,093 a= 0,104 a= 0,109 a= 0,087
r= 0,9950 r= 0,9977 r= 0,9988 r= 0,9999 r= 0,9990
31
Tabel 4.4 Data perhitungan nilai serapan (a) metformin pengulangan IV
( ) 225 nm 229,4 nm 233 nm 236,6 nm 243 nm
0,0 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000
2 0,1779 0,1992 0,2152 0,2200 0,1797
3 0,2272 0,2586 0,2869 0,2985 0,2436
4 0,2744 0,3243 0,3675 0,3882 0,3175
5 0,3270 0,3925 0,4478 0,4742 0,3875
6 0,3842 0,4657 0,5335 0,5659 0,4611
a= 0,060 a= 0,075 a= 0,087 a= 0,092 a= 0,075
r= 0,9906 r= 0,9947 r= 0,9972 r= 0,9983 r= 0,9985
Tabel 4.5 Data perhitungan nilai serapan (a) metformin pengulangan V
( 225 nm 229,4 nm 233 nm 236,6 nm 243 nm
0,0 0,0000 0,0000 0,0000 0,00000 0,0000
2 0,1268 0,1834 0,2278 0,24738 0,1936
3 0,1904 0,2600 0,3140 0,34029 0,2742
4 0,2118 0,3167 0,4017 0,44580 0,3586\
5 0,2788 0,4054 0,5092 0,56339 0,4579
6 0,3338 0,4877 0,6142 0,67867 0,5494
a= 0,062 a= 0,084 a= 0,101 a= 0,110 a=0,075
r= 0,9995 r= 0,9981 r= 0,9990 r= 0,9993 r= 0,9996
32
Tabel 4.6 Data perhitungan nilai serapan (a) metformin pengulangan VI
( 225 nm 229,4 nm 233 nm 236,6 nm 243 nm
0,0 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000
2 0,0892 0,1616 0,2221 0,2581 0,2215
3 0,1237 0,2177 0,2936 0,3380 0,2803
4 0,1877 0,3015 0,3938 0,4471 0,3697
5 0,2355 0,3623 0,4664 0,5262 0,4379
6 0,3341 0,4815 0,3623 0,6684 0,5475
a= 0,053 a= 0,077 a= 0,096 a= 0,107 a= 0,087
r= 0,9861 r= 0,9960 r= 0,9970 r= 0,9967 r= 0,9961
Tabel 4.7 Data perhitungan nilai serapan (a) Glibenklamid pengulangan I
( ) 225 nm 229,4 nm 233 nm 236,6 nm 243 nm
0,0 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000
4,7 0,2290 0,2278 0,2101 0,1775 0,1140
6,7 0,3253 0,3498 0,3455 0,3455 0,2128
8,7 0,4309 0,4377 0,4067 0,4067 0,2087
10,7 0,5141 0,5327 0,4973 0,4973 0,2473
12,7 0,6262 0,6499 0,6077 0,6077 0,2575
a= 0,048 a= 0,050 a= 0,047 a= 0,039 a= 0,023
r= 0,9997 r= 0,9993 r= 0,9976 r= 0,9931 r= 0,9798
33
Tabel 4.8 Data perhitungan nilai serapan (a) glibenklamid pengulangan II
( 225 nm 229,4 nm 233 nm 236,6 nm 243 nm
0,0 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000
4,7 0,2403 0,2479 0,23178 0,1963 0,1209
6,7 0,3019 0,3182 0,2976 0,2456 0,1366
8,7 0,4351 0,4441 0,4133 0,3501 0,2206
10,7 0,5453 0,5636 0,5239 0,4345 0,2522
12,7 0,6001 0,6231 0,5817 0,4851 0,2901
a= 0,048 a=0,050 a=0,046 a= 0,039 a= 0,023
r= 0,9963 r=0,9973 r= 0,9975 r= 0,9972 r= 0,9923
Tabel 4.9 Data perhitungan nilai serapan (a) glibenklamid pengulangan III
( 225 nm 229,4 nm 233 nm 236,6 nm 243 nm
0,0 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000
4,7 0,2355 0,2401 0,2273 0,1951 0,1263
6,7 0,3370 0,3415 0,3171 0,2666 0,1629
8,7 0,4221 0,4321 0,4021 0,3347 0,1980
10,7 0,5296 0,5567 0,5189 0,4238 0,2336
12,7 0,6042 0,6165 0,5979 0,5387 0,3820
a= 0,047 a= 0,049 a= 0,047 a= 0,041 a= 0,026
r= 0,9992 r= 0,9983 r= 0,9993 r= 0,9971 r= 0,9654
34
Tabel 4.10 Data perhitungan nilai serapan (a) Glibenklamid pengulangan IV
( 225 nm 229,4 nm 233 nm 236,6 nm 243 nm
0,0 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000
4,7 0,2193 0,2238 0,2076 0,1743 0,1073
6,7 0,3056 0,3192 0,2989 0,2513 0,1503
8,7 0,4040 0,4223 0,3954 0,3326 0,2006
10,7 0,5143 0,5310 0,4983 0,4199 0,2591
12,7 0,6323 0,6630 0,6235 0,4983 0,3161
a= 0,049 a= 0,051 a= 0,048 a= 0,040 a= 0,024
r= 0,9984 r= 0,9980 r= 0,9978 r= 0,9979 r= 0,9979
Tabel 4.11 Data perhitungan nilai serapan (a) Glibenklamid pengulangan V
( 225 nm 229,4 nm 233 nm 236,6 nm 243 nm
0,0 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000
4,7 0,2385 0,2448 0,2290 0,1927 0,1199
6,7 0,3290 0,3420 0,3220 0,2713 0,1661
8,7 0,4416 0,4483 0,4180 0,3521 0,2207
10,7 0,5146 0,5351 0,5036 0,4259 0,2664
12,7 0,6384 0,6669 0,6281 0,5291 0,3219
a= 0,052 a= 0,051 a= 0,041 a= 0,048 a= 0,020
r= 0,9991 r= 0,9992 r= 0,9992 r= 0,9993 r= 0,9997
35
Tabel 4.12 Data perhitungan nilai serapan (a) Glibenklamid pengulangan VI
( 225 nm 229,4 nm 233 nm 236,6 nm 243 nm
0,0 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000
4,7 0,2290 0,2278 0,2101 0, 1775 0,1140
6,7 0,3243 0,3373 0,3261 0, 2882 0,1943
8,7 0,4169 0,4510 0,4299 0, 3600 0,2054
10,7 0,5318 0,5422 0,5147 0, 4492 0,3013
12,7 0,6323 0,6630 0,6235 0, 5238 0,3161
a=0,104 a=0,109 a=0,103 a=0,087 a=0,054
r=0,9994 r=0,9996 r=0,9994 r=0,9986 r=0,9884
Nilai serapan (a) yang dipakai adalah nilai serapan dari metformin dan
glibenklamid pada pengulangan V. Pemilihan nilai serapan (a) dapat ditentukan
berdasarkan harga r hitung. Nilai r hitung dibandingkan dengan nilai r tabel
dengan taraf kepercayaan 95% dengan df 4 yaitu 0,8114. Berdasarkan data
tersebut terlihat bahwa nilai r hitung metformin dan glibenklamid pada
pengulangan V lebih besar dari nilai r tabel. Ini berarti bahwa persamaan tersebut
mempunyai linearitas yang baik, karena nilai r hitung mendekati 1. Dasar lain
dalam memilih nilai serapan yang akan digunakan dapat dilihat dari nilai a dari
persamaan, nilai a ini menggambarkan noise atau pengganggu. Dalam suatu
penelitian harga noise yang diterima adalah semakin mendekati 0, karena
menunjukkan bahwa hasil penelitian ini dapat dipercaya, walaupun nilai a pada
pengulangan V baik metformin maupun glibenklamid bukanlah nilai a yang
36
terkecil. Hal pertama yang harus diperhatikan adalah melihat nilai r nya. Nilai r
diterima bila lebih besar dari r tabel, dan nilai r yang mendekati 1
Berdasarkan pada penilaian tersebut maka nilai serapan yang digunakan
untuk metformin dan glibenklamid adalah nilai serapan pada duplikat kelima,
didukung dengan nilai r yang baik
4.5 Hasil Spektrum Serapan Campuran Baku Metformin dan Glibenklamid

Larutan baku campuran yang telah dipreparasi sebanyak enam kali
pengulangan kemudian masing-masing diukur pada panjang gelombang 220–
400 nm. Spektrum yang diperoleh digunakan untuk melihat apakah spektrum
larutan baku campuran tersebut sama dengan spektrum tablet G®. Perhitungan
kadar teoritis baku campuran metformin dan glibenklamid dapat dilihat pada
Lampiran 5 halaman 57.
4.6 Hasil Perbandingan Spektrum Serapan Campuran Metformin dan

Glibenklamid Sebelum Penambahan Baku dan Sesudah Penambahan
Baku
Spektrum campuran metfromin dan glibenlamid sebelum penammbahan bau
dan sesudah penambahan baku dapat dilihat pada Gambar 4.8 dan Gambar 4.9
1,50000
1,00000
Abs.
0,50000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
Gambar 4.8 Spektrum Serapan Campuran Metformin dan Glibenklamid

(Sebelum metode adisi standar)
37
1,50000
1,00000
Abs.
0,50000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
Gambar 4.9 Spektrum Serapan Campuran Metformin dan Glibenklamid

(Sesudah metode adisi standar)
4.7 Hasil Penentuan Kadar Metformin dan Glibenklamid pada Sediaan

Tablet
Sediaan yang mengandung metformin dan glibenklamid di pasaran
mengandung metformin 250 mg dan glibenklamid 1,25 mg. Karena
perbandingannya yang begitu besar yakni 1:200 mengakibatkan kadar
glibenklamid sulit untuk dianalisis.Untuk mengatasi hal ini maka perlu dilakukan
adisi dengan baku pembanding sebanyak 4,32mL dari larutan induk baku II
setelah itu pengukuran dapat dilakukan. Larutan sampel dibuat sebanyak 6 kali
pengulangan, dengan tujuan agar data yang diperoleh lebih akurat. Kemudian
larutan tersebut diukur serapannya pada kelima panjang gelombang yaitu 225 nm;
229,4 nm; 233 nm; 236,6 nm dan 243 nm.
Dari hasil pengukuran spektrum serapan sampel campuran diperoleh spektrum
sebagai berikut:
38
1,50000
1,00000
Abs.
0,50000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
Gambar 4.10 Spektrum Serapan Tablet G®

Dari bentuk spektrum campuran metformin dan glibenklamid berbeda dengan
bentuk spektrum tumpang tindih, karena spektrum campuran merupakan
gabungan dari 2 senyawa dalam satu larutan, sehingga tidak dapat diperoleh
bentuk spektrum yang sama dengan bentuk spektrum tumpang tindih.
Data serapan larutan sampel campuran metformin dan glibenklamid yang
didapat, digunakan untuk mengukur kadar masing-masing campuran, dengan cara
memasukkan data yang tersedia pada perhitungan matriks. % Koefisien variasinya
dan dapat dilihat pada Tabel 4.13 dibawah ini.
39
Tabel 4.13. Data konsentrasi, kadar dan koefisien variasi (% KV) metformin dan
glibenklamid dalam sediaan tablet G®
Metformin Glibenklamid
Konsentr Konsentr Kadar Konsentrasi Konsen Kadar
No. asi asi akurasi perolehan trasi akurasi
Sampel perolehan Teoritis hasil matriks Teoritis hasil
matriks (µg/ml) matriks (µg/ml) (µg/ml matriks
(µg/ml) (%) (%)
1 4,0054 100,99% 0,02 100,24%
2 4,0183 104,46% 0,02 100,63%
3 4,0247 104,51% 0,02 103,84%
4 4,0248 104,59% 0,02 99,90%
5 4,0377 99,40% 0,02 97,61%
6 3,9924 105,06% 0,02 98,24%
Rerata dari akurasi hasil 103,16% Rerata dari akurasi 100,07%
hasil matriks
matriks
% KV 0,2628% %KV 0,3641%
Berdasarkan Tabel 4.13 diatas, kadar metformin dan glibenklamid dalam
sediaan tablet G® memenuhi persyaratan menurut Farmakope Indonesia Edisi V
(2014) yaitu untuk sediaan tablet yang mengandung metformin dan glibenklamid
tidak kurang dari 90% dan tidak lebih dari 110% dari jumlah yang tertera pada
etiket.
Diperoleh rentang kadar akurasi dari hasil matriks untuk masing-masing
metformin dan glibenklamid adalah 104,655%-105,092% dan 100,566%-
101,162%. Koefisien variasi (%KV) untuk masing-masing metformin dan
glibenklamid adalah 0,2628% dan 0,3641%. Nilai rentang kadar akurasi
metformin dan glibenklamid memiliki akurasi yang baik karena berada pada
40
rentang 90%-110% dan juga memiliki presisi yang baik karena %KV metformin
dan glibenklamid termasuk <2%.
Perhitungan kadar metformin dan glibenklamid dengan operasi matriks
dapat dilihat pada Lampiran 12 halaman 75. Perhitungan kadar akurasi dari hasil
matriks metformin dan glibenklamid dapat dilihat pada Lampiran 13 halaman 77.
Perhitungan statistik kadarmetformin dan glibenklamid padasediaan tablet
G®dapat dilihat pada Lampiran 14 halaman 78. Perhitungan koefisien variasi
(%KV) metformin dan glibenklamid dapat dilihat pada Lampiran 15 halaman 85.
4.8 Perbandingan Hasil Penelitian Penetapan Kadar Metformin dan

Glibenklamid
Hasil Perbandingan penelitian Penetapan Kadar Metformin dan
Glibenklamid dapat dilihat pada Tabel 4.14
Tabel 4.14 Perbandingan Penelitian Penetapan Kadar Metformin dan Glibenklamid
Rujukan
Regina(2015) Rona (2017)
Metode KLT Densitometri Panjang gelombang berganda
Metanol, air, dan asam asetat

Pelarut glasial (6:4:0,25) (fase Metanol p.a
gerak)
λ yang Metformin pada 237 nm 225 nm; 229,4 nm; 233 nm;
digunakan Glibenklamid pada 300 nm. 236,6 nm dan 245 nm
Kadar (88,43 - 104,54)% (104,65 – 105,09) %

Metformin
Kadar (97,22–102,88)% (100,256 – 101,16) %

Glibenklamid
41
4.9 Hasil Uji Validasi
Tujuan utama yang harus dicapai dari suatu kegiatan analisis kimia adalah
dihasilkannya data hasil uji yang absah (valid). Secara sederhana hasil uji yang
absah dapat digambarkan sebagai hasil uji yang mempunyai akurasi (accuracy)
dan presisi (precission) yang baik (Gandjar dan Rohman, 2007).
4.9.1 Hasil Uji Akurasi
Perhitungan uji akurasi dari hasil matriks pada sediaan tablet G® dapat
dilihat pada Lampiran 13 halaman 77. Data hasil uji akurasi dari hasil matriks
Metformin dan Glibenklamid dengan pada tablet G® dapat dilihat pada Tabel 4.15.
Tabel 4.15 Data hasil uji akurasil hasil matriks metfomin dan glibenklamid pada
tablet G®
Akurasi hasil matriks (%)

Pengulangan
Metformin Glibenklamid
1 100,99% 100,24%
2 104,46% 100,63%
3 104,51% 103,84%
4 104,59% 99,90%
5 99,40% 97,61%
6 105,06% 98,24%
Rata-rata 103,16% 100,07%
Berdasarkan Tabel 4.15 diatas menunjukkan bahwa nilai rata-rata persen
akurasi dari hasil matriks yang diperoleh sangat dekat dengan nilai sebenarnya
dan telah memenuhi syarat akurasi untuk validasi prosedur analisis karena rata-
rata berada di antara rentang 90% − 110% (Kementerian Kesehatan R. I., 2014).
42
Persen perolehan kembali metformin dan glibenklamid masing-masing 103,16%
dan 100,07%.
4.9.2 Hasil Uji Presisi
Berdasarkan data perhitungan terhadap kadar metformin dan glibenklamid,
diperoleh koefisien variasi metformin adalah 0,2628% dan glibenklamid adalah
0,3641%. Koefisien variasi yang diperoleh pada metformin dan glibenklamid
telah memenuhi syarat presisi yaitu ≤ 2% (Gandjar dan Rohman, 2007).
Perhitungan koefisien variasi (KV) metformin dan glibenklamid masing – masing
dapat dilihat pada Lampiran 15 halaman 85.
43
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan penelitian yang dilakukan, maka dapat disimpulkan:
a. Kadar Metformin dan Glibenklamid dalam campuran sediaan tablet yang
ditentukan dengan metode spektrofotometri ultraviolet secara panjang
gelombang berganda memenuhi persyaratan kadar sediaan tablet menurut
Farmakope Indonesia Edisi V yaitu (104,655±0,4377)% untuk Metformin
dan (100,256±0,9059)% untuk Glibenklamid.
b. Penetapan kadar campuran metformin dan glibenklamid yang ditetapkan
kadarnya secara panjang gelombang berganda mempunyai akurasi yang
baik karena berada di rentang 90-110% dan presisi yang baik dengan
%KV <2%
5.2 Saran
Disarankan agar dilakukan penelitian lebih lanjut pada penetapan kadar
campuran metformin dan glibenklamida secara spektrofotometri ultraviolet
dengan metode lain, misalnya metode Mean Centering of Ratio Spectra (MCR).
44
DAFTAR PUSTAKA
Andayani, R., Pitasari, F. dan Rusdi. (2015). Development and Validation of TLC
dentiometry Method for simultaneous Determination of Metformin HCl
and Glibenclamide in Tablets Dosage Form. Journal of Chemical and
Pharmaceutical Research, 2015, 7(9S):159-164.
Andrianto, Y. C. (2009). Validasi Metode Penetapan Kadar Campuran

Parasetamol Dan Ibuprofen Secara Spektrofotometri UV dengan Aplikasi
Panjang Gelombang Berganda. Skripsi. Yogyakarta: Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma. Halaman 2, 23-26
Day, R. A., dan Underwood, A. L. (1998). Quantitative Analysis. Sixtth Edition.

Penerjemah: Sopyan, I. (2002). Analisis Kimia Kuantitatif. Edisi Keenam.
Jakarta: Penerbit Erlangga. Halaman 383, 399-404.
Ditjen POM R. I. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi Ketiga. Jakarta:

Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 8.
Emmer, J., dan McB. Miller, J. H. (2005). Method Validation in Pharmaceutical
Analysis, A Guide to Best Practice. Weinhem: Wiley-Vch Verlag GmbH
& Co. KGaA. Halaman 201-202 dan 210.
Febriani, C. (2016). Aplikasi Metode Spektrofotometri Secara Panjang

Gelombang Berganda Terhadap Penetapan Kadar Teofilin dan Efedrin
Hidroklorida dalam Sediaan Tablet. Skripsi. Medan : Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara. Halaman 2.
Gandjar, I. G., dan Rohman, A. (2007). Kimia Farmasi Analisis. Cetakan IV.
Yogyakarta: Pustaka Belajar. Halaman 31-33.
Harmita. (2004). Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara
Perhitungannya. Majalah Ilmu Kefarmasian. 1(3): 117-135.
Jas, A. (2004). Perihal Obat dengan Berbagai Bentuk Sediaannya. Medan: USU
Press. Halaman 2-3.
Kementerian Kesehatan R. I. (2014). Farmakope Indonesia. Edisi V. Jakarta:
Kementerian Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 554, 998 dan 1001.
Khopkar, S. M. (1985). Basic Concepts of Analytical Chemistry. Penerjemah:

Saptorahardjo, A. (1990). Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta:
Universitas Indonesia. Halaman 215-217.
Moffat, A. C., Osselton, M. D., dan Widdop, B. (2011). Clarke’s Analysis of Drug
And Poisons. Fourth Edition. London: Pharmaceutical Press. Electronic
version. Halaman 686, 1565.
45
Munson, J. W. (1984). Pharmaceutical Analysis - Part B. Modern Methods.
Penerjemah: Harjana dan Soemadi (1991). Analisis Farmasi: Metode
Modern. Parwa B. Surabaya: Airlangga University Press. Halaman 334-
338.
Sastrohamidjojo, H. (1985). Spektroskopi. Edisi Pertama. Yogyakarta: Penerbit

Liberty. Halaman 39-40.
Satiadarma, K., Mulja, M., Tjahjono, D. H., Kartasasmita, R. E. (2004). Asas

Pengembangan Prosedur Analisis. Edisi Pertama. Surabaya: Airlangga
University Press. Halaman 46-47, 49, 92.
Sudjana. (2005). Metode Statistika. Edisi VI. Bandung: Tarsito. Halaman 93, 168.
Suherman, S. K. (2012). Insulin dan Antidiabetik Oral. Dalam: Gunawan, S. G.

(2012). Farmakologi dan Terapi. Edisi Kelima. Jakarta: Balai Penerbit FK
UI. Halaman 490-492.
Tan, H. T., dan Rahardja, K. (2007). Obat-Obat Penting Kasiat, Penggunaan dan
Efek-Efek Sampingnya. Edisi Keenam. Cetakan Pertama. Jakarta: Elex
Media Komputindo Kelompok Gramedia. Halaman 312,317, dan 318.
Watson, D. G. (2005). Pharmaceutical Analisis: a Textbook for Pharmacy

Students and Pharmaceutical Chemists. Edisi kedua. Penerjemah: Syarief,
W. R. (2009). Analisis Farmasi: Buku Ajar Untuk Mahasiswa Farmasi
dan Praktisi Kimia Farmasi. Edisi Kedua. Jakarta: EGC. Halaman 126.
Zainuddin, M. (1999). Aplikasi Metoda Panjang Gelombang Berganda Pada

Analisis Multikomponen Secara Spektrofotometri Terhadap Campuran
Fenilbutazon dan Metampiron. Majalah Farmasi Indonesia 10 (4), 217-
223(1999). Surabaya: Universitas Airlangga. Halaman 218.
46
Lampiran 1. Gambar tablet
Gambar 1. Tablet Glucovance
47
Lampiran 2. Daftar spesifikasi sampel pada tablet Glucovance
1. Tablet Glucovance
Nama produk : Glucovance
Nomor Registrasi : DK11301600117A1
Tanggal kadaluarsa : 01 Oktober 2018
Komposisi : Metformin …………250 mg
Glibenklamid……….1,25 mg
48
Lampiran 3. Gambar alat-alat
Gambar 2. Spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu 1800)
Gambar 3. Neraca analitik (Boeco)
Gambar 4. Sonikator (Branson 1510)
49
Lampiran 4. Bagan Alir Prosedur Penelitian
1. Pembuatan Larutan Induk Baku dan Serapan Maksimum
Baku Metformin
Ditimbang seksama 50,3 mg
Dimasukkan kedalam labu tentukur 100ml
Dilarutkan dan dicukupkan dengan pelarut metanol p.a

sampai garis tanda
LIB Metformin (1006µg/ml)
Dipipet 5ml
Dimasukkan kedalam labu tentukur 100 ml
Dicukupkan dengan pelarut yang sama sampai batas tanda
LIB Metformin (50,3 µg/ml)
Dipipet 0,75ml
Metformin (3,77 µg/ml)
Diukur serapan pada gelombang 200-400mm
Panjang gelombang maksimum (λ)
Metformin = 236,6 nm
50
Lampiran 4. (Lanjutan)
2. Pembuatan Larutan Induk Baku dan Serapan Maksimum Glibenklamid
Baku Glibenklamid
Ditimbang seksama 25,2 mg
Dilarutkan dan dicukupkan dengan pelarut metanol p.a

sampai garis tanda
LIB Glibenklamid (1008µg/ml)
Dipipet 2,5 ml
Dicukupkan dengan pelarut yang sama sampai batas tanda
LIB Glibenklamid (100,8µg/ml)
Dipipet 0,87ml
Glibenklamid (8,7µg/ml)
Diukur serapan pada gelombang 200-400 nm
Panjang gelombang maksimum (λ)
Glibenklamid = 229,4 nm
51
3. Pembuatan Spektrum Serapan Metformin
LIB II Metformin100 μg/mL
dipipet masing-masing sebanyak 0,4 mL;0,6

mL; 0,8 mL; 1 mL dan 1,1 mL
dimasukkan masing-masing kedalam labu

tentukur 10 mL
dicukupkan dengan pelarut metanol p.a
dicukupkan dengan pelarut metformin p.a

Larutan Standar Metformin
(2µg/mL;3µg/mL; 4µg/mL;
5µg/mL dan 6µg/mL)
diukur serapan maksimum pada panjang

gelombang 200 - 400 nm
Spektrum Serapan Metformin
8 μg/ml
52
4. Pembuatan Spektrum Serapan Glibenklamid
LIB II Glibenklamid 100 μg/mL
dipipet masing-masing sebanyak 0,47 mL;

0,67 mL; 0,87 mL; 1,1 mL dan 1,3 mL
dimasukkan masing-masing kedalam labu

tentukur 10 mL
dicukupkan dengan pelarut metanol p.a
Larutan Standar Glibenklamid

(4,7µg/mL; 6,7µg/mL; 8,7µg/mL;
10,7µg/mL dan 12,7 µg/mL)
diukur serapan maksimum pada panjang

Spektrum Serapan Glibenklamid
8 μg/ml
53
5. Penentuan Panjang Gelombang Analisis Metformin dan Glibenklamid
Metformin 4 μg/mL Glibenklamid 8,7 μg/mL
diukur serapan dari masing-masing

metformin dan glibenklamid panjang
8 μg/ml 8 μg/ml
ditumpang tindihkan
ditentukan 5 panjang panjang gelombang

analisis
diambil panjang gelombang pada

spektrum serapan yang mulai memberikan
serapan sampai hampir tidak memberikan ,
dipilih secara variabel bebas serapan.
225 nm 229,4 nm 236,6 nm 233 nm 243 nm
54
6. Pembuatan Larutan Baku Campuran Metformin dan Glibenklamid
Metformin 10 mg Glibenklamid 10 mg
Dimasukkan ke dalam
Dimasukkan ke dalam
labu tentukur 10 mL
labu tentukur 10 mL
Dilarutkan dan
Dilarutkan dan
dicukupkan dengan
dicukupkan dengan
pelarut metanol p.a
pelarut metanol p.a
Larutan8 μg/ml
Metformin Larutan8 Glibenklamid
μg/ml
1000 µg/mL 1000 µg/mL
Diambil 0,4 mL Diambil 0,87 mL

mL
8 μg/ml 8 μg/ml
Kedua larutan dicampurkan ke dalam labu tentukur 10 mL dicukupkan dengan

pelarut metanol p.a
Diambil dari larutan tersebut 1 mL dimasukkan ke dalam labu tentuukur 10 mL

dicukupkan dengan pelarut
Larutan diukur pada panjang gelombang 200-400 nm
Lakukan pengulangan sebanyak 6 kali
55
7. Penentuan Kadar Sediaan Tablet
20 Tablet
Ditimbang (berat 20 tablet = 6181,7 mg)

Digerus dengan lumpang sampai halus dan homogen
Serbuk
Ditimbang setara 50 mg Metformin (penimbangan

dilakukan sebanyak 6 kali Pengulangan
Dihitung kesetaraan Glibenklamid yang terkandung
didalamnya
Dimasukkan ke dalam labu tentukur 50ml
Dilarutkan dalam metanol p.a
Dihomogenkan dengan sonikator selama 15 menit
Dikocok sampai homogen
Disaring larutan tersebut
Dibuang ± 10ml filtrat pertama dan ditampung filtrat
selanjutnya
Dipipet sebanyak 0,1 ml dan dimasukkan kedalam labu
tentukur 25 ml
Dipipet 4,3 larutan baku Glibenklamid konsentrasi 50,2
µg/ml dan dimasukkan kedalam labu tentukur 25 ml
(Metode Adisi Standar)
Dicukupkan dengan pelarut yang sama sampai garis tanda
Diukur pada panjang gelombang 200-400 mm.
Serbuk
dihitung
Kadar
56
Lampiran 5. Perhitungan kadar teoritis dari campuran baku Metformin dan
Glibenklamid
Pengulangan 1 (penimbangan metformin dan glibenklamid masing-masing 10,6

mg)
Kadar metformin:
V1 x C1 = V2 x C2
0,4 x 1060 = 10 x C2
X = 42,4µg/mL (kadar awal)
V2 x C2 = V3 x C3
1 x 42,4 = 10 x C3
X = 4,24µg/mL (kadar akhir)
KadarGlibenklamid:
V1 x C1 = V2 x C2
0,87 x 1060 = 10 x C2
V2 x C2 = V3 x C3
1 x 92,22 = 10 x C3
Keterangan:
V = mL
C = µg/mL

mg)
Kadar metfomin:
V1 x C1 = V2 x C2
0,4 x 1050 = 10 x C2
X = 42µg/mL (kadar awal)
V2 x C2 = V3 x C3
1 x 42 = 10 x C3
Kadar glibenklamid:
V1 x C1 = V2 x C2
0,87 x 1050 = 10 x C2
V2 x C2=V3 x C3
1 x 91,35 = 10 x C3
Keterangan:
V = mL
C = µg/mL
57

mg)
Kadar metformin:
V1 x C1 = V2 x C2
0,4 x 1040 = 10 x C2
V2 x C2 = V3 x C3
1 x 41,6 = 10 x C3
Kadar glibenklamid:
V1 x C1 = V2 x C2
0,87 x 1040 = 10 x C2
V2 x C2 = V3 x C3
1 x 90,48 = 10 x C3
Keterangan:
V = mL
C = µg/mL

mg)
Kadar metformin:
V1 x C1 = V2 x C2
0,4 x 1030 = 10 x C2
V2 x C2 = V3 x C3
1 x 41,2 = 10 x C3
Kadar glibenklamid:
V1 x C1 = V2 x C2
0,87 x 1030 = 10 x C2
V2 x C2 = V3 x C3
1 x 89,61 = 10 x C3
Keterangan:
V = mL
C = µg/mL
58

mg)
Kadar metformin:
V1 x C1 = V2 x C2
0,4 x 1020 = 10 x C2
V2 x C2 = V3 x C3
1 x 40,08 = 10 x C3
Kadar glibenklamid:
V1 x C1 = V2 x C2
0,87 x 1020 = 10 x C2
V2 x C2 = V3 x C3
1 x 88,74 = 10 x C3
Keterangan:
V = mL
C = µg/mL

mg)
Kadar metformin:
V1 x C1 = V2 x C2
0,4 x 1010 = 10 x C2
V2 x C2 = V3 x C3
1 x 40,4 = 10 x C3
Kadar glibenklamid:
V1 x C1 = V2 x C2
0,87 x 1010 = 10 x C2
V2 x C2 = V3 x C3
1 x 87,87 = 10 x C3
Keterangan:
V = mL
C = µg/mL
59
Lampiran 6. Spektrum serapan Metformin dengan konsentrasi 2,0-6,0 μg/mL
yang dibuat sebanyak 6 kali pengulangan
0,70000
0,60000
0,40000
Abs.
0,20000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
Gambar 5. Spektrum serapan metformn dengan konsentrasi 2,0-6,0 μg/mL

pengulangan 1
0,70000
0,60000
0,40000
Abs.
0,20000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
Gambar 6. Spektrum serapan metformin dengan konsentrasi 2,0-6,0 μg/mL

pengulangan 2
60
Lampiran 6. (lanjutan)
0,70000
0,60000
0,40000
Abs.
0,20000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .

pengulangan 3
0,70000
0,60000
0,40000
Abs.
0,20000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .

pengulangan 4
61
0,70000
0,60000
0,40000
Abs.
0,20000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .

pengulangan 5
0,70000
0,60000
0,40000
Abs.
0,20000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .

pengulangan 6
62
Lampiran 7. Spektrum serapan Glibenklamid konsentrasi 4,7-12,7 μg/mL yang
di buat sebanyak 6 kali pengulangan
0,70000
0,60000
0,40000
Abs.
0,20000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
Gambar 11. Spektrum serapan glibenklamid dengan konsentrasi 4,7-12,7 μg/mL

pengulangan 1
0,70000
0,60000
0,40000
Abs.
0,20000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .

pengulangan 2
63
0,70000
0,60000
0,40000
Abs.
0,20000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .

pengulangan 3
0,70000
0,60000
0,40000
Abs.
0,20000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .

pengulangan 4
64
0,70000
0,60000
0,40000
Abs.
0,20000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
Gambar 15 . Spektrum serapan glibenklamid dengan konsentrasi 4,7-12,7 μg/mL

pengulangan 5
0,70000
0,60000
0,40000
Abs.
0,20000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
Gambar 16 . Spektrum serapan glibenklamid dengan konsentrasi 4,7-12,7 μg/mL

pengulangan 6
65
Lampiran 8. Spektrum Serapan Baku Campuran Metformin dan Glibenklamid
yang di buat Sebanyak 6 kali
1,50000
1,00000
Abs.
0,50000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
Gambar 17. Spektrum serapan baku campuran pengulangan 1
1,50000
1,00000
Abs.
0,50000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
66
1,50000
1,00000
Abs.
0,50000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
1,50000
1,00000
Abs.
0,50000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
67
1,50000
1,00000
Abs.
0,50000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
1,50000
1,00000
Abs.
0,50000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
68
Lampiran 9. Spektrum serapan Metformin dan Glibenklamid dalam Sampel
Tablet G® yang di buat sebanyak 6 kali pengulangan
1,50000
1,00000
Abs.
0,50000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
Gambar 23. Spektrum serapan metformin dan glibenklamid dalam Sampel

Tablet G® pengulangan 1
1,50000
1,00000
Abs.
0,50000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
Gambar 24. Spektrum serapan metformin dan glibenklamid dalam Sampel

Tablet G® pengulangan 2
69
1,50000
1,00000
Abs.
0,50000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
Gambar 25. Spektrum serapan metformin dan glibenklamid dalam Sampel Tablet
G® pengulangan 3
1,50000
1,00000
Abs.
0,50000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
G® pengulangan 4
70
1,50000
1,00000
Abs.
0,50000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
G® pengulangan 5
1,50000
1,00000
Abs.
0,50000
0,00000
220,00 250,00 300,00 350,00 400,00
nm .
G® pengulangan 6
71
Lampiran 10. Data penimbangan dan serapan dari Tablet G®
Pengulangan Berat Panjang Gelombang

(mg) 225 nm 229,4 nm 236,6 nm 233 nm 243 nm
1 61,9 0,66481 0,83312 0,78121 0,84622 0,47213
2 62,1 0,67020 0,84675 0,78811 0,87313 0,48543
3 62,2 0,67441 0,84311 0,79167 0,87254 0,48634
4 62,4 0,67541 0,84231 0,79177 0,87304 0,48721
5 62,2 0,68112 0,81169 0,75701 0,84899 0,49775
6 61,7 0,67751 0,83893 0,78225 0,87343 0,49464
72
Lampiran 11. Contoh perhitungan kadar teoritis dari Metformin dan
Glibenklamid dalam tablet G
Komposisi tablet G = Metformin 250 mg

Glibenklamid 1,25 mg
Berat 20 tablet = 6181,7 mg

Ditimbang sampel setara dengan 50 mg, maka dapat dihitung berat serbuk.
Berat setara metformin
Berat serbuk yang tablet G = 20 tablet 250mg berat 20 tablet
50 mg
= 5000 mg 6181,7 mg
= 61,817 mg
Secara teoritis, didalam 61,817 mg serbuk yang ditimbang terdapat kesetaraan
metformin 250 mg dan glibenklamid 1,25 mg.
Berat serbuk yang ditimbang adalah 61,817 mg, maka berat setara metformin
sebenarnya adalah :

Berat serbuk yang tablet G = berat 20 tablet
20 tablet 250mg
61,817 mg = 6181,7 mg
5000 mg
Berat setara metformin = 49,98 mg
Berat setara Glibenklamid

Berat serbuk yang tablet G = berat 20 tablet
20 tablet 1,25mg
Berat setara Glibenklamid
61,817 mg = 6181,7 mg
20 tablet 1,25mg
Berat setara glibenklamid = 0,2499 mg
Dilarutkan dengan metanol p.a dengan kuantitatif dalam labu tentukur 50ml
sampai garis tanda.
49,98 mg
Konsentrasi metformin = 1000µg = 999,6ppm
50ml
73
0,2499 mg
Konsentrasi glibenklamid = x 1000µg = 4,998 ppm
50 ml
Kemudian larutan dipipet sebanyak 0,1 ml dan dimasukkan ke dalam labu 25 ml

dan dicukupkan dengan metanol p.a sampai garis tanda, sehingga didapat
konsentrasi akhir metformin dan glibenklamid dalam labu tentukur 25 ml adalah
999,8µg/ml 0,1 ml
Konsentrasi metformin dalam sampel = 25ml
= 3,999 ppm
4,998µg/ml 0,1 ml
Konsentrasi glibenklamid dalam sampel = 25ml
= 0,0199 ppm
Konsentrasi glibenklamid yang akan diadisikan (Metode Adisi Standar)
Konsentrasi glibenklamid = 8,7 µg/ml - 0,0199 µg/ml
= 8,6801 µg/ml
Volume larutan glibenklamid (50,2 µg/ml) yang dipipet untuk mengadisi:

V1.C1 = V2.C2
V1.50,2 µg/ml = 25 ml x 8,6801 µg/ml
V1 = 25 ml x 8,6801 µg/ml
V1 = 4,32 ml
Konsentrasi larutan baku glibenklamid dalam volume yang dipipet
V1.C1 = V2.C2
4,32 ml.50,2 µg/ml = 25 ml x C2
C2 = 8,6745 µg/ml
Konsentrasi larutan Glibenklamid yang diukur = 0,0199 µg/ml + 8,6745 µg/ml

= 8,7844 µg/ml
74
Lampiran 12. Data Perhitungan Kadar Perolehan Operasi Matriks Metformin
dan Glibenklamid Pada Tablet G®
Pengulangan 1
( ) -
( ) X
( )
( ) ( )
( )
( )=( )
Pengulangan 2
( ) -
( ) X
( )
( ) ( )
( )
( )=( )
Pengulangan 3
( ) -
( ) X
( )
( ) ( )
( )
( )=( )
Pengulangan 4
( ) -
( ) X
( )
( ) ( )
( )
( )=( )
Pengulangan 5
( ) -
( ) X
( )
( ) ( )
( )
( )=( )
75
Pengulangan 6
( ) -
( ) X
( )
( ) ( )
( )
( )=( )
76
Lampiran 13. Perhitungan Kadar Akurasi dari Perolehan Matriks Metformin
dan Glibenklamid
Pengulangan 1 Metformin = x 99,27% = 100,99%
Glibenklamid = x 99% = 100,24%
Pengulangan 6 Metformin = x 99% = 105,06%
Rata-rata akurasi dari perhitungan matriks metformin = 103,16%
Rata-rata akurasi dari perhitungan matriks glibenklamid = 100,07%
77
Lampiran 14. Perhitungan Statistik Kadar Metformin dan Glibenklamid pada
Tablet G®
1. Kadar Metformin
(X)
No. Kadar Akurasi
dari hasil X- (X - )2
matriks (%)
1. 100,99% -2,07 4,2849

2. 104,46% 1,3 1,69
3. 104,51% 1,35 1,8225
4. 104,59% 1,43 2,0449
5. 99,40% -3,76 14,137
6. 105,06% 1,9 3,61
= 103,16 (X - )2= 27,5893
∑( )
SD =√ =√ =√ = 2,3490
-
Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = n-1 = 6-1 = 5
Diperoleh ttabel= (1 – ½ α); dk
= (1 – 0,025); 5
= 0,975; 5
= 2.5706
Dasar penerimaan data jika t hitung ≤ t tabel dan t hitung ≥ -t tabel.
-
t hitung = | ⁄√
|
-
ft hitung 1 = | ⁄√
| =| | = 2,1584 (diterima)
√
-
t hitung 2 = | ⁄√
| =| | = 1,3555 (diterima)
√
-
| =| | = 1,4077 (diterima)
√
78
-
| =| | = 1,4911 (diterima)
√
-
| =| | = 3,9207 (ditolak)
√
-
| =| | = 1,9812 (diterima)
√
Data 5 ditolak karena nilai t hitung≥ ttabel dan t hitung ≤-t tabel , maka data yang dipakai
adalah data 1, 2, 3, 4, dan 6.
(X)
No.
Kadar Akurasi dari X- (X - )2
hasil matriks (%)
1. 100,99% -2,932 8,5966

2. 104,46% 0,538 0,2894
3. 104,51% 0,588 0,3457
4. 104,59% 0,668 0,4733
6. 105,06% 1,138 1,2950
= 103,922 (X - )2 = 11
∑( )
SD = √ √ = 1,6583
Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = 5-1 = 4
= (1 – 0,025); 4
= 0,975; 4
= 2,77645
79
-
t hitung = | ⁄√
|
-
|=| | = 3,9536 (ditolak)
√
-
| =| | = 0,7254 (diterima)
√
-
| =| | = 0,7928 (diterima)
√
-
| =| | = 0,9007 (diterima)
√
-
| =| | = 1,5345 (diterima)
√
Data 1 ditolak karena nilai t hitung≥ ttabel dan t hitung ≤-t tabel , maka data yang dipakai
adalah data 2, 3, 4, dan 6.
(X)
No.
hasil matriks (%)
2. 104,46% -0,195 0,0380

3. 104,51% -0,145 0,0210
4. 104,59% -0,065 0,0042
6. 105,06% 0,405 0,1640
= 104,655 (X - )2 = 0,2272
∑( )
SD = √ √ = 0,2751
Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = 4-1 = 3
80
= (1 – 0,025); 3
= 0,975; 3
= 3,18245
-
t hitung = | ⁄√
|
-
| =| | = 1,4176 (diterima)
√
-
| =| | = 1,0541 (diterima)
-
| =| | = 0,4725 (diterima)
√
-
| =| | = 2,9443 (diterima)
√
Semua data diterima, maka kadar metformin sebenarnya adalah:
μ = ( ̅ ± ttabelx )%
√
= (104,655± 3,18245 x )%
√4
= (104,655 ± 0,4377) %
81
2. Kadar Glibenklamid
(X)
No. Kadar Akurasi
dari hasil X- (X - )2
matriks (%)
1. 100,24% 0,17 0,0289

2. 100,63% 0,56 0,3136
3. 103,84% 3,77 14,129
4. 99,90% -0,17 0,0289
5. 97,61% -2,46 6,0516
6. 98,24% -1,83 3,3489
= 100,07 (X - )2= 3,9834
∑( )
SD =√ =√ = 0,8925
= (1 – 0,025); 5
= 0,975; 5
= 2.5706
-
t hitung = | ⁄√
|
-
| =| | = 0,4666 (diterima)
√
-
| =| | = 1,5371 (diterima)
√
82
-
| =| | = 10,3486 (ditolak)
√
-
| =| | = 1,4666 (diterima)
√
-
| =| | = 6,7526 (ditolak)
√
-
| =| | = 5,0233 (ditolak)
√
Data 3,5 dan 6 ditolak karena nilai t hitung ≥ t tabel dan t hitung ≤-t tabel , maka data
yang dipakai adalah data 1, 2, dan 4.
(X)
No.
hasil matriks (%)
1. 100,24% -0,016 0,0002

2. 100,63% 0,374 0,1398
4. 99,90% -0,356 0,1267
= 100,256 (X - )2 = 0,2667
∑( )
SD =√ =√ = 0,3651
= (1 – 0,025); 2
= 0,975; 2
= 4,30265
-
t hitung = | ⁄√
|
83
-
| =| | = 0,0759 (diterima)
√
-
| =| | = 1,7750 (diterima)
√
-
| =| | = 1,6896 (diterima)
√
Semua data diterima, maka kadar glibenklamid sebenarnya adalah:
μ = ( ̅ ± ttabelx )%
√
= (100,256± 4,30265 x )%
√3
= (100,256 ± 0,9069) %
84
Lampiran 15. Perhitungan %KV (Koefisien Variasi) Metformin dan
Glibenklamid pada Tablet G®
S
% KV = X
x 100%
0,2751
%KV Metformin = X 100% = 0,2628 %
104,655
%KV Glibenklamid = X 100% = 0,3641 %

100,256
85
Lampiran 16. Sertifikat Pengujuan Glibenklamid
86
Lampiran 17. Daftar Nilai Distribusi t
87
Lampiran 18. Tabel Distribusi r
88

Penetapan Kadar Campuran Metformin Dan Glibenklamid Dalam Sediaan Tablet Secara Spektrofotometri Ultraviolet Metode Panjang Gelombang Berganda

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Penetapan Kadar Campuran Metformin Dan Glibenklamid Dalam Sediaan Tablet Secara Spektrofotometri Ultraviolet Metode Panjang Gelombang Berganda

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

Universitas Sumatera Utara

Repositori Institusi USU http://repositori.usu.ac.id

Penetapan Kadar Campuran Metformin

Hutagalung, Rona Disinta

PROGRAM SARJANA FARMASI

Universitas Sumatera Utara

Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh

PROGRAM SARJANA FARMASI

Universitas Sumatera Utara

anugerah dan karuniaNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian

hingga akhirnya menyelesaikan penyusunan skripsi dengan judul “Penetapan

Kadar Campuran Metformin dan Glibenklamid dalam Sediaan Tablet secara

Spektrofotometri Ultraviolet dengan Metode Panjang Gelombang Berganda”.

Farmasi dari Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.

seluruh staf pengajar Fakultas Farmasi.

Penulis menyampaikan rasa terima kasih yang tak terhingga dan

Gunung Doli Hutagalung (Alm), Ibunda Ramianna Simanjuntak, abang Hotma

selama perkuliahan hingga penyelesaian skripsi ini.

kepada teman-teman seperjuangan di Laboratorium Penelitian, serta teman-teman

doa selama penelitian dan penyusunan skripsi ini berlangsung.

bermanfaat bagi kita semua.

Medan, April 2018

Rona Disinta Hutagalung

Saya yang bertanda tangan dibawah ini:

Medan, 11 Maret 2018

Rona Disinta Hutagalung

Kata kunci: Metformin, Glibenklamid, Tablet, Spektrofotometri Ultraviolet,

Keywords: Metformine, Glibenclamide, Tablet, Spectrophotometery Ultraviolet,

LEMBAR JUDUL .................................................................................. i

LEMBAR PENGESAHAN .................................................................... iii

KATA PENGANTAR ........................................................................... iv

SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT ........................................ vi

ABSTRAK ............................................................................................. vii

ABSTRACT ............................................................................................ viii

DAFTAR ISI ........................................................................................... ix

DAFTAR TABEL .................................................................................. xiii

DAFTAR GAMBAR ............................................................................. xiv

DAFTAR GAMBAR DALAM LAMPIRAN ........................................ xv

DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................... xvii

BAB I PENDAHULUAN ................................................................... 1

1.1 Latar Belakang ............................................................... 1

1.2 Perumusan Masalah ........................................................ 3

1.3 Hipotesis Penelitian ......................................................... 3

1.4 Tujuan Penelitian............................................................. 3

1.5 Manfaat Penelitian ........................................................... 4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ......................................................... 5

2.1 Uraian Bahan .................................................................... 5

2.1.1 Metformin HCl .................................................. 5

2.1.2 Glibenklamid ..................................................... 7

2.2 Spektrofotometri Ultraviolet-Visibel (Uv-vis) .............. 8

2.2.2 Komponen Spektrofotometri.............................. 8

2.2.3 Proses Penyerapan Radiasi Pada

2.2.4 Hukum Lambert-Beer ........................................ 11

2.2.5 Kegunaan Spektrofotometri Ultraviolet-Visibel 12

2.3 Analisis Multikomponen .............................................. 12

2.4 Validasi Metode Analisis............................................... 15

2.4.1 Akurasi .............................................................. 15

2.4.2 Presisi ................................................................ 16

BAB III METODE PENELITIAN.......................................................... 17

3.1 Jenis Penelitian ............................................................. 17

3.2 Waktu dan Tempat Penelitian....................................... 17

3.3 Alat ............................................................................... 17

3.4 Bahan ............................................................................ 17