LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI PENGOLAHAN PANGAN

FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN

UNIVERSITAS KATOLIK SOEGIJAPRANATA
SEMARANG
ISOLASI
Kelompok: 12
Fernando Budiono 19.I1.0057
Olivia Veralta A. 19.I1.0058
Christine Vanny 19.I1.0059
Abstrak
Pada praktikum bab 4 ini membahas tentang isolasi, inokulasi mikroba pada agar tegak dan
pemurnian mikroba. Bahan yang digunakan pada praktikum ini adalah makanan basi seperti lepet
basi, lontong busuk, kuah sayur lodeh basi, kerang busuk, buah pisang busuk dan sirsak busuk
yang akan diamati bentuk pertumbuhan dan warnanya yang dihasilkan pada agar miring, agar
tegak dan cawan petri serta dapat mengidentifikasi mikroorganisme yang ada pada bahan tersebut.
Selama praktikum ini harus dilakukan secara aseptik agar tidak terjadi kontaminasi dari luar. Pada
metode isolasi mikroba menggunakan media NA miring dan PDA miring, inokulasi mikroba pada
agar tegak dengan menggunakan media NB + agar, pemurnian mikroba menggunakan media NA
yang dituangkan ke cawan petri. Tujuan praktikum ini agar dapat mengetahui bagaimana cara
isolasi, inokulasi dan pemurnian mikroba, mengetahui ciri-ciri dan faktor pertumbuhan mikroba,
mengetahui setiap bentuk pertumbuhan koloni pada setiap media, mengetahui tentang kontaminasi
dan mengetahui kenampakan mikroba pada setiap media dan bahan pangan yang digunakan. 

Kata kunci : inokulasi, isolasi, pemurnian mikroba

Menurut Sabdaningsih et al., (2013) bahwa

1. TINJAUAN PUSTAKA
Isolasi, inokulasi pada agar tegak dan
pemurnian mikroba merupakan cara agar
mendapatkan biakan murni. Pada saat
melakukan isolasi, inokulasi dan pemurnian
diharuskan menggunakan alkohol, sarung
tangan, masker adalah prosedur aseptis dalam
laboratorium (Irwan & Kornelia, 2019).
Makanan basi adalah makanan yang sudah
mengalami perubahan struktur di dalamnya
(Liss, 2017). Pada isolasi dengan agar miring
menggunakan metode gores dengan cara zigzag
(Arsyik et al.,2015). Pada inokulasi mikroba
pada agar tegak dengan metode teknik
penusukan pada media agar tegak (Sophia et
al., 2011). Pada pemurnian mikroba dengan
cawan petri menggunakan metode gores yang
digoreskan secara merata (Klement et al.,
2015). Media yang digunakan untuk proses
isolasi, inokulasi dan pemurnian mikroba 
biasanya menggunakan media jenis agar
(Hatopan, et al., 2019). Media yang digunakan
seperti NA, PDA dan NB + agar. Bentuk
sebaran mikroba pada tabung miring biasanya
secara Spreading (Gemy & Zulfiati, 2020). 
bentuk pertumbuhan koloni pada cawan petri
berbeda-beda sesuai morfologinya antara lain
rhizoid, circular, filamentous dan irregular.
Bentuk pertumbuhan Spreading biasa ditemui
dalam bakteri asam laktat (Heru, et al., 2017).
Bacillus Cereus adalah salah satu bakteri yang
mampu merusak makanan (Salaki, 2011).
Azotobacter sp  merupakan salah satu bakteri
yang terdapat pada santan (Umesha &
Narayanaswamy, 2016). Bulu et al., (2019)
Lactobacillus memiliki bentuk koloni irregular
sedangkan Leuconostoc memiliki bentuk koloni
circular. Mikroorganisme dapat tumbuh
disebabkan oleh  mikroba tersebut masuk ke
dalam bahan pangan baik melalui udara, debu,
tangan, atau media yang lain. Selain itu kondisi
pada bahan pangan seperti kandungan air dalam
pangan dan pH mendukung pertumbuhan
mikroorganisme (Arini, 2017).
2. TUJUAN PRAKTIKUM
Tujuan dilakukannya praktikum ini adalah
mengetahui manfaat dan cara melakukan isolasi,
mengetahui cara melakukan pemindahan kultur

1
mikrobia, mengetahui faktor-faktor dan ciri-ciri
pertumbuhan mikrobia, mengetahui bentuk-
bentuk koloni mikrobia, mengetahui ciri genus
dari mikrobia yang diisolasi, mengetahui
penyebab dan jenis mikrobia yang
mengkontaminasi, mengetahui mikroorganisme
yang tumbuh pada arem-arem basi, tomat
busuk, daging ayam busuk, kue lapis basi,
santan basi, dan susu basi , serta mengetahui
kenampakan mikroorganisme pada media dan
bahan pangan.
3. METODE PRAKTIKUM
3.1. Materi
3.1.1. Alat
Alat-alat yang dibutuhkan dalam praktikum ini
antara lain masker, sarung tangan, tabung
reaksi, cawan petri, rak tabung reaksi, jarum
ose, jarum N, kapas, bunsen, korek api, dan
label.
3.1.2. Bahan
3.1.2.1. Isolasi
Bahan-bahan yang digunakan dalam
pengisolasian kultur antara lain media NA steril
dan PDA, alkohol 1. Lepet basi; 2. Lontong
basi; 3. Kuah sayur lodeh basi; 4. Kerang
busuk; 5. Buah pisang busuk; dan 6. Buah
sirsak busuk.
3.1.2.2. Inokulasi Mikroba pada Agar Tegak
Bahan-bahan yang digunakan dalam inokulai
mikroba antara lain media semi padat
(NB+agar) steril, alkohol, dan isolat masing-
maing kelompok.
3.1.2.3. Pemurnian Mikroba
Bahan-bahan yang digunakan dalam pemurnian
mikroba antara lain NA steril, alkohol, dan
isolat masing-masing kelompok.
3.2. Metode
3.2.1. Isolasi
Pertama, Media NA steril (1-4) dan PDA (5 &
6) dibiarkan memadat dengan posisi miring,
untuk memperoleh agar miring. Kemudian,
meja dilap dengan alkohol, kemudian tangan
dicuci juga dicuci dengan alkohol terlebih
dahulu.Selanjutnya, jarum ose dipijarkan
sampai berwarna merah pada seluruh bagiannya
agar steril. Lalu tabung reaksi yang berisi
media steril dipegang dengan menggunakan
tangan kiri, tutup tabung dibuka (tutup tabung
2
tetap dipegang, jangan diletakan diatas meja
karena akan menyebabkan kontaminasi pada
tutup tabung). Setelah itu mulut tabung reaksi
dipanaskan sebentar diatas api. Kemudian
bagian sampel yang busuk diambil sedikit
dengan jarum ose. Lalu digoreskan secara zig-
zag pada permukaan agar miring. Mulut dan
tutup tabung reaksi dipanaskan lagi dan ditutup,
jarum ose juga dipijarkan kembali. Kemudian
diinkubasi selama 24 jam, pertumbuhan yang
terjadi diamati, difoto, dan diberi keterangan
mengenai warna dan bentuk pertumbuhannya.
3.2.2. Inokulasi Mikroba pada Agar Tegak
Media semi padat steril (NB + agar) dan sampel
hasil isolasi disiapkan. Meja dilap dengan
alkohol, kemudian tangan dicuci juga dicuci
dengan alkohol terlebih dahulu. Jarum N (jarum
ose lurus) dipijarkan sampai berwarna merah
pada seluruh bagiannya agar steril. Lalu tabung
reaksi yang berisi sampel hasil isolasi dipegang
dengan menggunakan tangan kiri, tutup tabung
dibuka (tutup tabung tetap dipegang, jangan
diletakan diatas meja karena akan
menyebabkan kontaminasi pada tutup tabung).
Mulut tabung dibakar sebentar. Jarum N
dioleskan pada isolat mikrobia, mulut tabung
dibakar dan ditutup kembali. Lalu tabung reaksi
yang berisi media semi padat steril dipegang
dengan menggunakan tangan kiri, tutup tabung
dibuka (tutup tabung tetap dipegang, jangan
diletakan diatas meja karena akan
menyebabkan kontaminasi pada tutup tabung).
Setelah itu mulut tabung reaksi dipanaskan
sebentar diatas api. Jarum N yang sudah
dioleskan dengan isolat, ditusukkan pada media
semi padat tersebut, kemudian mulut tabung
dibakar lalu ditutup dan jarum N pun dipijarkan
kembali. Kemudian diinkubasi selama 2 hari,
pertumbuhan yang terjadi diamati, digambar,
dan diberi keterangan mengenai warna dan
bentuk pertumbuhannya.
3.2.3. Pemurnian Mikroba
Sampel hasil isolasi disiapkan. Meja dilap
dengan alkohol, kemudian tangan dicuci juga
dicuci dengan alkohol terlebih dahulu. Media
NA dituangkan dalam cawan petri secara
aseptis, kemudian dibiarkan memadat. Jarum
ose dipijarkan sampai berwarna merah pada
seluruh bagiannya agar steril. Lalu tabung reaksi
yang berisi sampel hasil isolasi dipegang dengan
menggunakan tangan kiri, tutup tabung dibuka
(tutup tabung tetap dipegang, jangan
diletakan diatas meja karena akan
menyebabkan kontaminasi pada tutup tabung).
Mulut tabung dibakar sebentar. Jarum ose steril
tersebut dioleskan pada isolat mikrobia,
kemudian bakar kembali mulut tabung, lalu
ditutup. Jarum ose digoreskan pada media yang
telah memadat dicawan petri dengan
menggunakan teknik penggoresan langsung (1-
3) dan teknik penggoresan kuadran (4-6) secara
aseptis. Cawan petri dibungkus kembali dengan
kertas buram dan diinkubasi selama 2 hari,
diamati pertumbuhannya, digambar dan diberi
keterangan mengenai warna dan bentuk
pertumbuhannya.
4. HASIL PENGAMATAN
Tabel. 1. Hasil Pengamatan Isolasi (Terlampir)
Pada tabel 1 terdapat hasil pengamatan proses
isolasi dimana didapatkan data dari kelompok
A1 pada sampel Lepet basi dengan
menggunakan media NA miring dengan bentuk
pertumbuhan mikroorganisme secara
Spreading dan berwarna putih. Pada kelompok
A2 didapatkan data pada sampel Lontong
busuk pada media NA miring memiliki bentuk
pertumbuhan secara Spreading dan berwarna
putih. Sementara pada kelompok A3 yang
menggunakan sampel Kuah sayur lodeh basi
pada media NA miring memiliki bentuk
pertumbuhan Spreading dan berwarna putih.
Selanjutnya pada kelompok A4 yang
menggunakan sampel Kerang busuk dengan
media NA miring memiliki bentuk
pertumbuhan Echinulate dan berwarna putih.
Untuk kelompok A5 dengan media PDA miring
dan sampel Buah pisang busuk didapatkan
bentuk pertumbuhan secara Spreading dan
berwarna putih. Terakhir pada kelompok A6
dengan media PDA miring dan menggunakan
sampel Buah sirsak busuk memiliki bentuk
pertumbuhan Spreading dan berwarna putih.
Tabel. 2. Hasil Pengamatan Inokulasi Mikroba
pada Agar Tegak (Terlampir)
Berdasarkan tabel 2 terdapat hasil pengamatan
inokulasi mikroba pada agar tegak dengan
media yang sama setiap kelompoknya yaitu
NB+agar. Pada kelompok A1 dan A3 dengan
3
bahan lepet basi dan kuah sayur lodeh basi
didapatkan hasil pertumbuhan berbentuk
beaded dan berwarna putih. Lalu pada
kelompok A2 dengan bahan lontong busuk
didapatkan hasil pertumbuhan mikroorganisme
berbentuk papillate dan memiliki warna putih.
Kemudian pada kelompok A4 dengan bahan
kerang busuk memiliki bentuk pertumbuhan
echinulate dan memiliki warna putih. Terakhir
pada kelompok A5 dan A6 dengan bahan buah
pisang busuk dan buah sirsak busuk didapatkan
hasil pertumbuhan mikroorganisme berbentuk
filiform dan memiliki warna putih.
Tabel. 3. Hasil Pengamatan Pemurnian Mikroba
(Terlampir)
Pada tabel 3 terdapat hasil pengamatan
pemurnian mikroba dengan bahan yang berbeda
pada setiap kelompoknya. Bahan pada
kelompok A1 lepet basi, kelompok A2 lontong
busuk, kelompok A3 kuah sayur lodeh,
kelompok A4 kerang busuk, kelompok A5 buah
pisang busuk dan kelompok A6 buah sirsak
busuk. Pada pemurnian mikroba semua
kelompok menggunakan media NA tuang,
berdasarkan hasil pengamatan pada kelompok
A1 hingga A6 pertumbuhannya berbentuk
Irregular dan menghasilkan warna putih.
5. PEMBAHASAN
Pada saat isolasi, inokulasi dan pemurnian
mikroba harus menggunakan masker, sarung
tangan, dan alkohol adalah untuk menjaga
kesterilan (Irwan & Kornelia, 2019).
Penggunaan jarum ose yang dibakar pada
bunsen digunakan untuk mengambil mikroba
digunakan berada pada kondisi steril.
Penggunaan tabung reaksi pada praktikum ini
adalah sebagai wadah proses isolasi dan
inokulasi.  Bahan yang digunakan pada
praktikum ini adalah bahan yang sudah busuk
atau basi. 
Menurut Magdalena et al., (2017) untuk
melakukan proses isolasi mikroorganisme yang
ada pada bahan yang busuk diambil dengan
menggunakan jarum ose yang sudah dipanaskan
untuk mencegah terjadinya cemaran dari
mikroba sebanyak satu ose. Setelah diambil
sampel itu dimasukkan kedalam tabung dengan
metode gores, metode gores yang digunakan
juga dilakukan dengan cara zig-zag (Arsyik et
al., 2015). Setelah digoreskan tabung kemudian
diinkubasi selama 24 jam. Metode inokulasi Pada hasil pengamatan tabel 1 bahan yang
mikroba pada agar tegak dengan menyiapkan  digunakan untuk uji isolasi adalah dengan
alat  dan  bahan lalu tuang  media  (NB)  steril  menggunakan bahan yang sudah basi. Pada hasil
ke  dalam  petridisk  dan  biarkan membeku. pengamatan didapatkan data bahwa hampir
Selanjutnya  mikroba diinkubasi  pada  suhu  semua kelompok mengalami bentuk
37°C  dan  dilakukan pengamatan   pertumbuhan mikroba secara Spreading kecuali
karakteristik   koloni   dan   perhitungan   pada kelompok A4 (Echinulate). Menurut
jumlah   koloni   bakteri   2 x 24   jam (Djaya & Aditya, et al., (2017) bentuk Echinulate biasa
Rusita, 2016). Pertumbuhan  bakteri  yang  ditemukan pada media tegak dan media miring.
telah  diencerkan  pada  media  NB+agar Menurut Gemy & Zulfiati (2020) mengatakan
ditandai dengan adanya kekeruhan dalam bahwa bentuk pertumbuhan pada bakteri media
media. Metode inokulasi mikroba dapat miring akan berbentuk Spreading dikarenakan
dilakukan dengan teknik penusukan (stab) pada mengikuti pola pertumbuhan dari medium yang
media agar tegak (Sopiah et al., 2011). Pada digunakan. Berdasarkan tabel pengamatan 2
pemurnian mikroba dapat dilakukan dengan tentang inokulasi mikroba pada media tegak
menyiapkan sampel terlebih dahulu yang telah bahwa Yulitaasary et al (2017) menyatakan jika
diisolasi selama 24 jam lalu sampel tersebut morfologi  koloni  isolat  bakteri  yang 
dapat digoreskan dengan metode gores pada digunakan dalam praktikum ini memiliki
media NA secara merata agar mendapatkan karakteristik yang  berbeda-beda dan pada
hasil isolat murni. Selama proses pemurnian pengamatan koloni bakteri pada medium tegak
mikroba harus dilakukan secara aseptik agar berupa bentuk pertumbuhan koloni saja. Pada
tidak terjadi adanya kontaminasi. Setelah itu kelompok A1 dan A3 memiliki bentuk beaded,
dapat diinkubasi dengan suhu 25°C dalam lalu pada kelompok A2 memiliki bentuk
waktu 2 hari (Klement et al., 2015). papillate. Kemudian untuk kelompok A4
Berdasarkan praktikum yang ada metode gores memiliki bentuk echinulate sedangkan
yang digunakan adalah penggoresan kuadran kelompok A5 dan A6 memiliki bentuk filiform.
dan penggoresan langsung.  Berdasarkan teori Sabdaningsih et al., (2013)
bahwa bentuk pertumbuhan koloni pada bakteri
Media yang digunakan untuk uji Isolasi adalah itu berbeda-beda sesuai morfologinya antara
media cair PDA (Potato Dextrose Agar) dan lain rhizoid, circular, filamentous dan irregular.
NA (Nutrient Agar). Menurut Chinthia, et al., Pada hasil pengamatan tabel 3 didapatkan
(2014) media PDA dan NA bukan merupakan bentuk pertumbuhan mikroba kelompok A1
sumber karbohidrat dan strukturnya padat hingga A6 yaitu irregular sedangkan kelompok
sehingga mudah digunakan untuk proses isolasi A6 berbentuk circular. Untuk warna yang
mikroba. Media yang digunakan untuk dihasilkan pada hasil pengamatan tabel 1,2 dan
praktikum inokulasi mikroba pada agar tegak 3 berwarna putih yang merupakan tanda
adalah media semi padat NB+agar dengan tumbuhnya mikroba dalam praktikum ini (Liss,
menuang media NB  steril  lalu dibiarkan 2017).
membeku. Nutrient Broth (NB) merupakan
media umum yang digunakan untuk Menurut Heru, et al. (2017), bentuk
menumbuhkan biakan secara general yang pertumbuhan mikroba Spreading ini biasanya
diformulasikan dengan sumber karbon dan ditemui pada Bakteri Asam Laktat. Menurut
nitrogen agar memenuhi kebutuhan nutrisi Gemy & Zulfiati (2020) kelompok genus
bakteri (Wahyuningsih & Zulaika, 2019). Pada Bacillus sp. adalah bakteri yang memiliki
pemurnian mikroba menggunakan media NA bentuk pertumbuhan spreading pada media agar
yang awalnya cair lalu dituang ke dalam cawan miring. Berdasarkan hasil pengamatan dimana
petri lalu dipadatkan. Menurut Rosita et al., warna bakteri putih. Bacillus sp. memiliki ciri-
(2015) media NA merupakan media yang ciri merupakan genus Bacillus, memiliki bentuk
paling sering digunakan untuk pertumbuhan kokus, berwarna putih, serta merupakan bakteri
mikroba, media ini dapat ditumbuhi oleh semua gram positif. Sementara terdapat bakteri dengan
mikroba dan biasanya digunakan untuk dapat bentuk Echinulate Menurut Letha, et al. (2016),
melihat morfologi (bentuk, warna dan penampakan bakteri dengan bentuk Echinulate
permukaan) dari bakteri  dan warna putih dapat ditemukan pada mikroba

4
Fascaplysinopsis sp. Ciri-ciri dari mikroba ini
sendiri adalah memiliki bentuk basil serta
merupakan bakteri jenis gram negatif.
Berdasarkan tabel pengamatan tabel 2
kelompok A1 dan A3 memiliki bentuk
pertumbuhan koloni beaded lalu kelompok A4
memiliki bentuk pertumbuhan echinulate dan
berwarna putih.. Sesuai dengan pernyataan
Umesha & Narayanaswamy (2016) bahwa
bakteri Azotobacter sp termasuk dalam gram
negatif, memiliki bentuk batang dan berwarna
putih. Pada hasil pengamatan kelompok A2
memiliki bentuk pertumbuhan papillate dan
berwarna putih. Sesuai dengan pernyataan
Salaki (2011) bahwa Bacillus Cereus memiliki
bentuk batang, bersifat gram positif dan
berwarna putih. Sedangkan hasil pengamatan
pada kelompok A5 dan A6 memiliki bentuk
filiform dan menghasilkan warna putih. Hal ini
sesuai dengan teori Ginting et al., (2019) yang
menyatakan bahwa bakteri Lactobacillus
bentuk filiform yakni pertumbuhan sepanjang
garis inokulasi dan koloni bakteri didominasi
warna putih yang  tergolong dalam gram
negatif dan berbentuk batang. Hasil
pengamatan kelompok A1-A5 pertumbuhan
bentuk koloni irregular dan menghasilkan
warna putih. Sesuai dengan teori Bulu et al.,
(2019) Lactobacillus Yang merupakan gram
negatif, berbentuk basil, bentuk koloni
irregular, memiliki warna putih, dan termasuk
bakteri mesofilik. Pada hasil pengamatan
kelompok A6 pertumbuhan bentuk koloni
circular dan berwarna putih. Sesuai teori Bulu
et al., (2019) Leuconostoc Yang merupakan
gram positif, berbentuk coccus, bentuk koloni
circular, berwarna putih dan termasuk bakteri
mesofil.  zig-zag, inokulasi pada agar tegak dengan
Mikroorganisme dapat tumbuh ke dalam bahan
pangan baik melalui udara, debu, tangan, atau
media yang lain. Kondisi pada bahan pangan
seperti kandungan air dalam pangan dan pH
mendukung pertumbuhan mikroorganisme.
Bahan pangan yang telah rusak oleh
mikroorganisme dapat menjadi sumber
kontaminasi yang berbahaya bagi bahan pangan
lain yang masih segar. Penyebab kerusakan
mikrobiologis dapat disebabkan oleh berbagai
mikroorganisme seperti khamir, kapang dan
bakteri (Arini, 2017).
6. KESIMPULAN
5
 Isolasi berfungsi untuk menumbuhkan
mikroba dalam media dengan cara inkubasi
untuk mendapatkan isolat murni
 Bentuk pertumbuhan Bacillus sp. Spreading,
dengan bentuk bulat, dan berwarna memiliki
bentuk basil (batang pendek), dan muncul warna
putih. 
 Fascaplysinopsis sp. bentuk pertumbuhannya
Echinulate dan berwarna putih
 Bentuk pertumbuhan Azotobacter sp adalah
beaded dan echinulate dan muncul warna putih
 Mikroba Bacillus Cereus memiliki bentuk
koloni papiliate dan muncul warna putih 
 Pertumbuhan mikroba dapat diketahui
dengan adanya kekeruhan pada media
 Mikroorganisme yang terdapat pada santan
basi adalah Azotobacter sp
 Bahan pangan yang telah rusak oleh
mikroorganisme dapat menjadi sumber
kontaminasi
 Penyebab kerusakan mikrobiologis dapat
disebabkan oleh  berbagai mikroorganisme
seperti khamir, kapang dan bakteri
 Pertumbuhan mikroba dapat ditandai dengan
adanya kekeruhan pada media 
 Pemurnian mikroba dengan metode gores
berfungsi agar mendapatkan biakan murni dari
satu spesies mikroba 
 Lactobacillus memiliki bentuk pertumbuhan
koloni irregular (tidak beraturan) dan muncul
warna putih
 Leuconostoc memiliki bentuk pertumbuhan
koloni circular (bulat) dan muncul warna putih
 Bentuk koloni pada agar cawan antara lain
rhizoid, circular, filamentous dan irregular.
 Isolasi dengan menggunakan metode gores
teknik penusukan (stab) dan pada pemurnian
mikroba dengan metode gores langsung dan
kuadran.
7. DAFTAR PUSTAKA
Aditya TY., Iis NA., Mochammad I. (2017).
Isolasi dan Identifikasi Azotobacter dari
Rhizosfer Tanaman Kopi (Coffea
canephora) yang Terserang Nematoda
Parasit Pratylenchus coffeae. Saintifika
19(2): 13-23.
Arini, L. D. D. (2017). Faktor-faktor penyebab
dan karakteristik makanan kadaluarsa
yang berdampak buruk pada kesehatan
masyarakat. JITIPARI (Jurnal Ilmiah
 Teknologi dan Industri Pangan
UNISRI), 2(1).
Arsyik I., Aditya F., Fila D. (2015). Isolasi dan
Identifikasi Bakteri Asam Laktat (BAL)
dari Buah Mangga (Mangifera indica
L.). Jurnal Ilmiah Manuntung 1(2): 159-
163.
Bulu, S., Mellisa, E.S., Anggreini, D. N. R.
(2019). Identifikasi Bakteri Asam
Laktat Pada Nira Segar Lontar
(Borassus flabellifer Linn). Jambura
Edu Biosfer Journal. 1(2):47-52
Chinthia SY., Chrisnawan SB., Trisna D.
(2014). Uji Daya Hambat Infusa Daun
Nangka (Artocarpus heterophyllus)
Terhadap Pertumbuhan Bakteri
Staphylococcus aureus. Jurnal Permata
Indonesia Volume 5, Nomor 2,
November 2014 Hal. 1-7.
Djaya, L., Sulastrini, I., & Rusita, I. (2016).
Teknik Inokulasi Buatan Clavibacter
michiganensis subsp. sepedonicus,
Penyebab Penyakit Busuk Cincin
Bakteri, pada Tanaman Kentang
(Solanum tuberosum L.). Agrikultura,
27(2).
Gemy NH., Zulfiati. (2020). Isolasi Mikroba
Penghasil Antibiotik dari Pasir Pantai
Lemo-Lemo Kabupaten Bulukumba
dalam Menghambat Beberapa Bakteri
Patogen. Jurnal Kesehatan 13 (1): 21-
27.
Ginting, E. L., Rangian, L., Wantania, L. L., &
Wullur, S. (2019). Isolasi Bakteri
Simbion Alga Merah Dari Perairan
Tongkeina, Sulawesi Utara. Jurnal
Ilmiah Platax, 7(2), 394-400.
Heru N., Evy Y., Himmatul H., Desi DA. ,
Puput S. (2017). Isolasi Bakteri
Kandidat Probiotik dari Isi Usus Halus
Ayam Kampung untuk Meningkatkan
Produktivitas Ayam Pedaging.
Prosiding Seminar Nasional Pendidikan
Biologi dan Biologi B-139 - B-148.
Irwan B., Kornelia FN.(2019). Penerapan
Teknik Aseptik pada Asuhan
Keperawatan di Ruang Bedah RSUD
Kabupaten Ende. Jurnal Keperawatan
Terpadu 1(2): 56-64.
6
Klement, Z, Rudolph, K, Sands D.C., (2015),
Methods in Phytobacteriology. Abe
Books. Sands D.C
Letha LW., Elvy L. Ginting, Stenly W. (2016).
Isolasi Bakteri Simbion dengan Spons
dari Perairan Tongkeina, Sulawesi Utara.
Jurnal LPPM Bidang Sains dan
Teknologi 3(1): 57-65.
Liss D.D.A. (2017). Faktor-faktor Penyebab dan
Karakteristik Makanan Kadaluarsa yang
Berdampak Buruk pada Kesehatan
Masyarakat. Jurnal Teknologi dan
Industri Pangan 2 (1) : 15 – 24.
Magdalena L., Karlina S., Risco BG., Nur H.
(2017). Potensi Abalon Tropis Haliotis
asinina L. sebagai Sumber Inokulum
Jamur Simbion Penghasil Antimikroba.
Spermonde (2017) 3(1): 42-46.
Rosita, A. S.M., Kukuh, M., Sawitri, K. (2015).
Komparasi Media NA Pabrikan dengan
NA Modifikasi untuk Media
Pertumbuhan Bakteri. FKIP Universitas
Muhammadiyah Jember. Hal 193
Sabdaningsih, A., Anto, B., Endang, K. (2013).
Isolasi dan Karakteristik Morfologi
Koloni Bakteri Asosiasi Alga Merah
(Rhodophyta) dari Perairan Kutuh Bali.
Jurnal Biologi, 2(2):11-17
Sabdaningsih, A., Anto, B., Endang, K. (2013).
Isolasi dan Karakteristik Morfologi
Koloni Bakteri Asosiasi Alga Merah
(Rhodophyta) dari Perairan Kutuh Bali.
Jurnal Biologi, 2(2):11-17
Salaki, C. L. (2011). Isolasi dan Karakterisasi
Bakteri Indigenous (Bacillus cereus
Frank.) Sebagai Agensia Pengendali
Hayati Hama Kubis. EUGENIA, 17(1),
10-15.
Sopiah, N., Oktaviani, A., Sulistia, S., Suciati,
F., & Aviantara, D. (2011). Isolasi dan
identifikasi bakteri pendegradasi
hidrokarbon yang berasal dari tanah
tercemar minyak bumi. Jurnal
Teknologi Lingkungan, 12(3), 291-298.
Umesha, S., & Narayanaswamy, B. (2016).
Isolation and characterization of
microorganisms present in coconut water
from coconut mills producing desiccated
coconut powder. Mysore Journal of
Agricultural Sciences, 50(2), 275-278.
Wahyuningsih, N., & Zulaika, E. (2019).
Perbandingan Pertumbuhan Bakteri
Selulolitik pada Media Nutrient Broth
dan Carboxy Methyl Cellulose. Jurnal
Sains dan Seni ITS, 7(2), 36-38.
Yulitaasary, A. T., Asyiah, I. N., & Iqbal, M.
(2017). Isolasi dan identifikasi
Azotobacter dari rhizosfer tanaman kopi
(Coffea canephora) yang terserang
nematoda parasit Pratylenchus coffeae.
Saintifika, 19(2), 13-23.

7
8. LAMPIRAN
8.1. Hasil Pengamatan
Tabel 1. Isolasi
Kelompo Bentuk
Bahan Media Gambar Warna
k pertumbuhan

A1 Lepet basi NA miring Spreading Putih

A2 Lontong busuk NA miring Spreading Putih

Kuah sayur
A3 NA miring Spreading Putih
lodeh basi

A4 Kerang busuk NA miring Echinulate Putih

Buah pisang
A5 PDA miring Spreading Putih
busuk

8
 Buah sirsak
A6 PDA miring Spreading Putih
busuk

Tabel 2. Inokulasi Mikroba pada Agar Tegak

Bentuk
Kelompok Bahan Media Gambar Warna
pertumbuhan

A1 Lepet basi NB + agar Beaded Putih

A2 Lontong busuk NB + agar Papilliate Putih

Kuah sayur
A3 NB + agar Beaded Putih
lodeh basi

A4 Kerang busuk NB + agar Echinulate Putih

9
 Buah pisang
A5 NB + agar Filiform Putih
busuk

Buah sirsak
A6 NB + agar Filiform Putih
busuk

Tabel 3. Pemurnian Mikroba

Bentuk
Kelompok Bahan Media Gambar Warna
pertumbuhan

A1 Lepet basi NA tuang Irregular Putih

Lontong
A2 NA tuang Irregular Putih
busuk

Kuah sayur
A3 NA tuang Irregular Putih
lodeh basi

10
 Kerang
A4 NA tuang Irregular Putih
busuk

Buah pisang
A5 NA tuang Irregular Putih
busuk

Buah sirsak
A6 NA tuang Circular Putih
busuk

8.2. Laporan Sementara

LAPORAN SEMENTARA
PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI PENGOLAHAN PANGAN 2021
FTP UNIKA SOEGIJAPRANATA

Judul Praktikum : Isolasi

Kelompok : 12
Anggota : Fernando Budiono (19.I1.0057), Olivia Veralta (19.I1.0058),
Christine Vanny M (19.I1.0059)
Asisten Praktikum : Wynetta Mileina Jatmiko

A. Ringkasan Materi Praktikum

Praktikum ini bertujuan untuk mengetahui manfaat dan cara melakukan isolasi, mengetahui
cara melakukan pemindahan kultur mikrobia, mengetahui faktor-faktor dan ciri-ciri
pertumbuhan mikrobia, mengetahui bentuk-bentuk koloni mikrobia, mengetahui ciri genus
dari mikrobia yang diisolasi, mengetahui penyebab dan jenis mikrobia yang
mengkontaminasi, mengetahui mikroorganisme yang tumbuh pada arem-arem basi, tomat
busuk, daging ayam busuk, kue lapis basi, santan basi, dan susu basi, serta mengetahui
kenampakan mikroorganisme pada media dan bahan pangan.

11
Pada praktikum bab 4 ini mempelajari tentang isolasi yang pertama membahas cara praktikan
bekerja secara aseptik. Selanjutnya pada praktikum ini digunakan 2 jenis medium yaitu
medium padat (agar miring dan agar tegak) dan medium cair yang memiliki berbagai bentuk
dalam pertumbuhan mikrobanya. Dijelaskan 3 metode yang digunakan dalam praktikum ini
yaitu isolasi, inokulasi mikroba pada agar tegak dan pemurnian mikroba. Selanjutnya dibahas
alat, bahan dan metode dalam praktikum ini. Pada metode isolasi digunakan media NA dan
PDA, untuk inokulasi mikroba digunakan media semi yaitu NB+agar dan untuk pemurniaan
mikroba digunakan media NA. Selanjutnya pada metode pemurniaan dibahas juga tentang
goresan pada agar cawan seperti goresan langsung, goresan kuadran dan goresan radian.
Selain itu dijelaskan juga mengenai hal teknis seperti cara menggores kultur yang baik dan
benar.

B. Poin Pembahasan Laporan Resmi

1. Bahas alat, bahan dan metode
2. Bahas fungsi media yang digunakan dan kaitkan dengan hasil pengamatan
3. Bahas hasil pengamatan
4. Bahas identifikasi mikroorganisme beserta ciri-cirinya berdasarkan hasil pengamatan
Bahas penyebab pertumbuhan mikroorganisme yang mengontaminasi bahan
8.3. Foto
Fernando Budiono (19.I1.0057)

12
Olivia Veralta A. (19.I1.0058)

Christine Vanny (19.I1.0059)

13
8.4. Plagscan

8.5. Jurnal Acuan

14