Bismillahirrahmaanirrahiim.
Objek glass yang sudah diolesi albumin
Buccal Smear!
1. Tujuan Buccal Smear :
Mencari Sel Ganas kecuali Swab Mukosa
Mulut (Buccal Smear)
Swab Mukosa Mulut bisa untuk :
Mencari Sel Ganas
Melihat Adanya Sex Kromatin
2. Metode pengecatan :
Papanicolou
3. Penemu :
Pengecatan : George Papanicolou
Barr Bodies : Murray Llewellyn Barr
4. Prinsip pewarnaan Papanicolou :
Prinsip pewarnaan Papanicolaou adalah
melakukan pewarnaan, hidrasi dan dehidrasi
sel.
5. Cara Kerja
ALAT DAN BAHAN
1.Harris hematoksilin : Cat utama yang
berfungsi mewarnai inti sel
2.OG. 6 : Mewarnai keratin dan memberi
warna orange
3.EA-50 : Memberi warna pada sitoplasma
(merah muda), mewarnai bagian sel epitel
skuamos bagian superfisial
4. Alcohol 100%
5. Alcohol 96% (etil alcohol)
6. Alcohol 80 %
7. Alcohol 70%
8. Alcohol 50%
Fiksasi alkohol dilakukan untuk
mempertahankan bentuk jaringan, agar
perubahan stuktur sel atau jaringan
kemungkinan terjadinya kecil, sedangkan
dehidrasi bertujuan agar jaringan atau sel
mudah tepoles oleh parafin atau selodin
sehingga sel lebih kontras dan mudah dilihat.
9. Xylol : Menjernihkan / Menggantikan
alcohol
10. Aquadest
11. Mounting medium : mengawetkan
jaringan yang sudah diwarnai
12. HCl 0,25%
13.
Albumin (Putih telur) : Merekatkan smear
14. Tongue spatula
15. Deck glass
16. Mikroskop binokuler
17. Canada balsam/entelan : Merekatkan
object glass dengan deck glass
18. Staining jar 25 buah
19. Timer
CARA KERJA
1. Siapkan terlebih dahulu alat dan bahan
2. Object glass diberi identitas probandus
masing-masing
3. Lakukan swab pada mukosa mulut teman
pasangan bergantian
4. Oleskan spatula yang telah mengandung
lender/cairan mukosa mulut ke objek glass
yang sudah disiapkan (sudah dioles albumin)
5. Keringkan sebentar dan selanjutnya
dicelupkan kedalam alcohol 96% selama 15
menit untuk fiksasi.
6. Lakukan pengecatan papanicolou sesuai
dengan prosedur (keterangan dibagian
bawah).
7. Sesudah selesai pengecatan, tetesi sediaan
dengan Canada balsam/entelan, lalu tutup
dengan deck glass, tunggu kering.
8. Sediaan siap dilihat dengan mikroskop
untuk mencari/melihat ada tidaknya Barr
bodies (Barr bodies dijumpai menempel pada
bagian dalam dinding inti sel).
Prosedur pengecatan papanicolau :
Di rehidrasi :
1. Masukkan object glass yang sudah difiksasi
dalam alkohol 96% (sebanyak 10 kali
celupan)
2. Masukkan dalam alkohol 80% sebanyak 10
kali celupan
3. Masukkan dalam alkohol 70% sebanyak 10
kali celupan
4. Masukkan dalam alkohol 50% sebanyak 10
kali celupan
5. Masukkan dalam aquadest 1 kali celupan
 6. Rendam dalam haematoxillin selama 15 Bila ditemukan <5 dipastikan laki-laki
menit Bila ditemukan 5-10 meragukan
7. Letakkan pada air mengalir selama 5 menit Bila ditemukan > 10 berarti perempuan
Di dehidrasi : 10. Kenapa di akhir kadar alkoholnya meningkat?
8. Masukkan dalam alkohol 50% sebanyak 10 Karena ada proses dehidrasi dan hidrasi
kali celupan untuk menghindari penyusutan sel.
9. Masukkan dalam alkohol 70% sebanyak 10 Dehidrasi : Menghilangkan kelebihan warna
kali celupan
10. Rendam dalam orange G-6 selama 5
menit
11. Masukkan dalam alkohol 70% sebanyak
10 kali celupan
12. Masukkan dalam alkohol 70% sebanyak
10 kali celupan
13. Rendam dalam EA-50 selama 5 menit
14. Masukkan dalam alkohol 70% sebanyak
10 kali celupan
15. Masukkan dalam alkohol 80% sebanyak
10 kali celupan
16. Masukkan dalam alkohol 96% sebanyak
10 kali celupan
17. Keringkan selama 5 menit (tiriskan)
18. Masukkan dalam xylol sebanyak 10 kali Matematika SMP ayo kerjain yang bisa jawabbb
celupan
19. Masukkan dalam xylol sebanyak 10 kali Jika seorang wanita ditemukan Barr bodies
celupan sejumlah x. X merupakan bilangan real.
20. Rendam dalam xylol selama 15 menit Sedangkan seorang pria didapati Barr bodies
21. Pres dengan kertas saring sejumlah y. Y merupakan bilangan bulat.
Apabila x.y=0; x+y=15. Tentukan nilai dari
6. Perbesaran mikroskop : x²+y²/x+y !
400x / 1000x
7. Letak Barr Bodies :
Dalam dinding inti sel
8. Pengecatan yang menggunakan papanicolou :
Pap pewarnaan digunakan untuk
membedakan sel dalam preparat apusan
berbagai sekresi tubuh; spesimen dapat
berupa apusan ginekologi (Pap smear),
sputum, sikat, pencucian, urin, cairan
serebrospinal, cairan perut, cairan pleura,
cairan sinovial, cairan mani, bahan aspirasi
jarum halus, sampel sentuhan tumor, atau
bahan lain yang mengandung sel.

9. Hasil :