MATA KULIAH MIKOLOGI

“NUTRISI DAN MEDIA PEMERIKSAAN FUNGI”

Untuk Memenuhi Tugas Mata Kuliah Mikologi

DOSEN PEMBIMBING

Makhabbah Jamilatun, M.Si

DISUSUN OLEH

1. Indri Agestianida Permatasari (P27903218014)

2. Mutiara Teni (P27903218020)
3. Rizka Riyana (P27903218026)

POLITEKNIK KESEHATAN KEMENKES BANTEN

ANALIS KESEHATAN
TINGKAT II KELAS REGULER PEGAWAI
2018/2019
 Nutrisi dan Media Pertumbuhan Jamur

1. Nutrisi

Nutrien dalam media perbenihan harus mengandung seluruh elemen yang penting
untuk sintesis biologik organisme baru. Nutrien diklasifikasikan berdasarkan
elemen yang mereka suplai.

a. Karbon

Senyawa karbon dibutuhkan untuk sumber energi jamur, seperti :

monosakarida, polisakarida, asam organik, asam amino, alkohol, asam
lemak, lemak, selulosa dan lignin dapat digunakan oleh jamur. Sekitar
separuh dari berat kering sel jamur terdiri dari karbon, yang menjadi
indikasi pentingnya unsur karbon pada dinding sel.

b. Nitrogen

Jamur memerlukan nitrogen sebagai sintesis protein dan membentuk

protein yang dibutuhkan untuk membentuk protoplasma. Penambahan unsur
nitrogen dikarenakan jamur tidak dapat menghambat nitrogen bebas dari
udara. Jamur dapat menggunakan nitrogen anorganik untuk pembentukan
nitrat, nitrit, ammonia atau nitrogen organik untuk pembentukan asam
amino.

c. Phospor

Fosfat (PO43-) dibutuhkan sebagai komponen ATP, asam nukleat dan

sejumlah koenzim seperti NAD, NADP dan flavin. Selain itu, banyak
metabolit, lipid (fosfolipid) komponen dinding sel (teichoic acid), beberapa
polisakarida kapsul dan beberapa protein adalah bergugus fosfat. Fosfat
selalu diasimilasi sebagai fosfat anorganik bebas (P).

2
d. Mineral

Jamur membutuhkan mineral dalam konsentrasi yang kecil, namun

mineral juga berperan dalam siklus hidup jamur. Sejumlah besar mineral
dibutuhkan untuk fungsi enzim. Ion magnesium (Mg2+) dan ion ferrum
(Fe2+) juga ditemukan pada turunan porfirin yaitu magnesium dalam

molekul klorofil, dan besi sebagai bagian dari koenzim sitokrom dan
peroksidase. Mg2+ dan K+ keduanya sangat penting untuk fungsi dan
kesatuan ribosom. Ca2+ dibutuhkan sebagai komponen dinding sel gram
positif, meskipun ion tersebut bebas untuk bakteri gram negatif. Banyak dari
organisme laut membutuhkan Na+ untuk pertumbuhannya. Dalam
memformulasikan medium untuk pembiakan kebanyakan mikroorganisme,
sangatlah penting untuk menyediakan sumber potassium, magnesium,
kalsium dan besi, biasanya dalam bentuk ion-ion (K+, Mg2+, Ca2+ dan Fe2+).
Banyak mineral lainnya (seperti Mn2+, Mo2+, Co2+, Cu2+ dan Zn2+)
dibutuhkan; mineral ini kerapkali terdapat dalam air kran atau sebagai
kontaminan dari kandungan medium lainnya.

Pengambilan besi dalam bentuk hidroksida yang tak larut pada

pH netral, difasilitasi pada banyak bakteri dan fungi dengan produksi
senyawa siderofor yang mengikat besi dan mendukung
transportasinya sebagai kompleks terlarut.

e. Vitamin

Seperti halnya mineral, vitamin dibutuhkan oleh jamur dalam jumlah

yang kecil. Vitamin dibutuhkan oleh jamur bukan sebagai sumber energi
melainkan sebagai koenzim. Vitamin yang umum diperlukan oleh jamur
diantaranya: vitamin B1 (tiamina), vitamin B7 (biotin), vitamin B3
(nikotinat), dan B5 (pantotenat).

3
2. Media Pertumbuhan Fungi

1) Brain-heart infusion (BHI) Agar : Ini adalah media kultur jamur non-
selektif yang memungkinkan pertumbuhan jamur hampir semua klinis
yang relevan. Hal ini digunakan untuk pemulihan utama saprofit dan
jamur dimorfik.
2) Agar Czapek 's: Hal ini digunakan untuk subkultur Aspergillus sp.
untuk diagnosis diferensial mereka.

3) Inhibitory Mold Agar (IMA): Pemulihan Primer jamur patogen

dimorfik. Jamur saprofit dan dermatofita tidak akan pulih.
4) Mycosel / Mycobiotic Agar : Untuk identifikasi Cryptococcus
neoformans.

5) Potato Dextrose Agar (PDA): Ini adalah media yang relatif kaya untuk
tumbuh berbagai jamur.
6) Sabouraud’s Heart Infusion (SABHI) Agar : Pemulihan Primer jamur
saprofit dan dimorfik, terutama strain rewel.
7) Sabouraud 's dextrose agar (SDA): Untuk isolasi dermatophyta, jamur
lain dan ragi, tetapi juga dapat tumbuh bakteri berserabut seperti
Nocardia.
8) Potato Flaxe Agar : Pemulihan Primer jamur saprofit dan dimorfik,
khususnya rewel dan lambat strain tumbuh.

1. Sabouraud Dextrose Agar (SDA)

Sabouraud Dextrose Agar (SDA) adalah media selektif terutama

digunakan untuk isolasi dermatophyta, jamur lain dan ragi, tetapi juga dapat
tumbuh bakteri berserabut seperti Nocardia. Media ini juga digunakan untuk
menentukan evaluasi mikologi makanan, kontaminasi dalam kosmetik dan
klinis untuk membantu dalam diagnosis infeksi ragi dan jamur. pH asam
dari media ini (pH sekitar 5,0) menghambat pertumbuhan bakteri tetapi

4
 memungkinkan pertumbuhan ragi dan kebanyakan jamur berfilamen. Agen
antibakteri juga dapat ditambahkan untuk meningkatkan efek antibakteri.

Antibiotik seperti kloramfenikol, gentamisin, dan tetrasiklin dapat

ditambahkan sebagai agen selektif untuk menghambat pertumbuhan bakteri
yang berlebihan bersaing mikroorganisme sementara memungkinkan isolasi
sukses jamur dan ragi. Berbagai modifikasi lain juga dilaporkan dengan
menggunakan cycloheximide, penisilin, streptomisin, neomisin tergantung
pada tujuan penggunaan.

SDA media terdiri dari enzimatik digest kasein dan jaringan hewan
yang menyediakan sumber nutrisi asam amino dan senyawa nitrogen untuk
pertumbuhan jamur dan ragi. Dextrose adalah karbohidrat difermentasi
tergabung dalam konsentrasi tinggi sebagai sumber karbon dan energi. Agar
adalah agen pemadat. Selain antibiotik seperti kloramfenikol dan / atau
tetrasiklin bertindak antimikrobial spektrum sebagai luas untuk menghambat
pertumbuhan berbagai bakteri gram positif dan gram negatif. Gentamisin
ditambahkan untuk lebih menghambat pertumbuhan bakteri gram negatif.
Digunakan pada mikrobiologi :

 Untuk budidaya jamur patogen & komensal dan ragi

 Baik untuk isolasi terutama dermatofit

 Digunakan untuk menentukan kandungan mikroba dalam kosmetik

 Digunakan dalam evaluasi mikologi makanan, dan secara klinis

membantu dalam diagnosis ragi dan jamur penyebab infeksi.

Komposisi media :

Bahan g/L
Mikologi pepton (enzimatik mencerna, kasein 10
dan jaringan hewan)
Dekstrosa 40
Agar 15
pH 5,6 pada suhu 25˚C

5
Prosedur untuk persiapan media :

1) Menangguhkan 65 g medium dalam satu liter air murni.

2) Panas dengan sering agitasi dan didihkan selama satu menit untuk
benar-benar membubarkan medium.
3) Autoklaf pada 121 ° C selama 15 menit.
4) Keren 45 sampai 50 ° C dan tuangkan ke dalam cawan petri
atau tabung untuk miring.
5) Untuk pengolahan spesimen, streak spesimen ke media dengan
loop inokulasi yang steril untuk mendapatkan koloni terisolasi.

6) Menetaskan piring di 25 - 30 ° C dalam posisi terbalik (sisi agar

up) dengan kelembaban meningkat.

7) Budaya harus diperiksa setidaknya mingguan untuk pertumbuhan

jamur dan harus diadakan untuk 4 - 6 minggu sebelum dilaporkan
sebagai negatif.

 Khas Colony morfologi beberapa jamur di SDA :

Jamur Morfologi Koloni

Aspergillus flavus : Kuning-hijau, tepung dan pucat kekuningan pada
sebaliknya
Aspergillus niger : Pertumbuhan awal adalah putih, menjadi hitam
kemudian memberikan "garam dan merica penampilan"
yang dihasilkan dari konidia berpigmen gelap
ditanggung dalam jumlah besar pada konidiofor dan
reverse balik kuning pucat
Rhodotorula sp : merah muda-orangish koloni krem
Aspergillus fumigatus : Biru - hijau, tepung dan kuning pucat di sebaliknya.
Aspergillus nidulans : Biru kehijauan dengan tepi keputihan, kuning

6
 kecoklatan pada sebaliknya
Trichosporon
mucoides : Putih untuk krim, kekuningan, berkerut
Geotrichum candidum : Putih untuk krim berwarna, datar dengan miselium
aerial
Koloni Trichophyton rubrum var. rodh

Koloni Trichophyton rubrum var. Rodhaini Sporothrix schenckii

Candida albicans Trichophyton terrestre (Sabouraud agar)

7
2. Potato Dextrose Agar (PDA)

Potato Dextrose Agar (PDA) adalah media yang digunakan untuk

isolasi dermatophyta. SDA dengan TA (Asam tartarat) direkomendasikan
untuk pemeriksaan mikroba dari produk makanan dan susu. Selain dari
Chlortetracycline dianjurkan untuk pencacahan mikroba ragi dan jamur dari
kosmetik. PDA dengan Kloramfenikol direkomendasikan untuk budidaya
selektif jamur dari sampel campuran.

Potato Dextrose Agar (PDA) mengandung dextrose sebagai sumber

karbohidrat yang berfungsi sebagai stimulan pertumbuhan, dan infus kentang
yang menyediakan dasar nutrisi untuk pertumbuhan lebat kebanyakan jamur.
Agar ditambahkan sebagai agen pemadat. Sebuah jumlah tertentu asam tartarat
steril (10%) dapat dimasukkan untuk menurunkan pH medium 3,5, sehingga
pertumbuhan bakteri akan terhambat.

Komposisi PDA:
Bahan g/L
Dekstrosa 20
Ekstrak Kentang 4
Agar 15

Keterangan:

4 gram ekstrak kentang setara dengan 200 gram infus kentang

Jika ditambahkan :
Tartrat 1,4 gram (pH 3,5 pada suhu 25° C)

Kloramphenicol 25 mg (pH 5,6 pada suhu 25° C)

Chlortetracycline - 40 mg

8
Prosedur Penyusunan media

1) Menangguhkan 39 gram dalam 1000 ml air suling. Panas sampai mendidih untuk
melarutkan media sepenuhnya.
2) Mensterilkan dengan autoklaf pada 15 tekanan lbs (121 ° C) selama 15 menit.
Aduk rata sebelum pengeluaran.
3) Dalam pekerjaan tertentu, ketika pH 3,5 diperlukan, media harus diasamkan dengan
10% asam tartarat steril. Jumlah asam diperlukan untuk 100 ml. steril, didinginkan
menengah adalah sekitar 1ml. Jangan memanaskan media setelah penambahan
asam.
4) Untuk pengolahan spesimen, streak spesimen ke media dengan loop inokulasi yang
steril untuk mendapatkan koloni terisolasi.
5) Menetaskan piring di 25 - 30 ° C dalam posisi terbalik (sisi agar up) dengan
kelembaban meningkat.
6) Budaya harus diperiksa setidaknya mingguan untuk pertumbuhan jamur dan harus
diadakan untuk 4 - 6 minggu sebelum dilaporkan sebagai negatif.

9
3. Brain-heart infusion (BHI) Agar

Brain-heart infusion (BHI) Agar dapat dilengkapi dengan antibiotik,

jumlah natrium klorida yang bervariasi, ekstrak ragi dan serum untuk
mengoptimalkan pertumbuhan bakteri, ragi, dan jamur patogen. BHI Agar
banyak digunakan dalam pengujian makanan dan pengujian air. Nitrogen,
vitamin, dan sumber karbon disediakan oleh BHI agar. Dextrose adalah
sumber karbohidrat, dan Sodium Klorida mempertahankan lingkungan
osmotik, dan agar merupakan agen pemadat. Komposisi BHI Agar :

Keterangan :

pH akhir 7,4 ± 0,2 pada 25o C

10
Formula dapat disesuaikan dan / atau ditambah seperti yang diperlukan untuk memenuhi
spesifikasi kinerja.

Prosedur Pembuatan Media :

1) Menangguhkan 52 g medium dalam 1 liter air murni.

2) Panaskan dengan sering agitasi dan didihkan selama 1 menit untuk
benar-benar membubarkan medium.
3) Autoclave pada 121° C selama 15 menit.

Kelemahan media BHI Agar:

Dapat mengiritasi mata, sistem pernapasan, dan kulit.

Penyimpanan :

Toko disegel botol yang berisi media dehidrasi pada 2-30° C.

Setelah dibuka dan menutupnya kembali, tempat kontainer di
lingkungan kelembaban rendah pada suhu penyimpanan yang
sama. Melindungi dari kelembaban dan cahaya oleh menjaga
wadah tertutup rapat.

Gambar S. mutan pada BHI agar

11
 Gambar Sporothrix schenckii pada BHI Agar

 Faktor yang mempengaruhi pertumbuhan fungi

Pada umumnya pertumbuhan fungi dipengaruhi oleh faktor substrat,

kelembapan, suhu, derajat keasaman substrat (pH), dan senyawa-senyawa kimia
dilingkungannya.

a. Substrat

Substrat merupakan sumber nutrien utama bagi fungi. Nutrien-nutrien baru

dapat dimanfaatkan sesudah fungi mengekskresi enzim-enzim ekstraseluler yang

dapat mengurai senyawa-senyawa kompleks dari substrat tersebut menjadi

senyawa-senyawa yang lebih sederhana. Fungi yang tidak dapat menghasilkan
enzim sesuai komposisi subtrat dengan sendirinya tidak dapat memanfaatkan
nutrien-nutrien dalam substrat tersebut.

b. Kelembapan

Faktor ini sangat penting untuk pertumbuhan fungi. Pada umumnya fungi
tingkat rendah seperti Rhizopus atau Mucor memerlukan lingkungan dengan
kelembapan nisbi 90%, sedangkan kapang Aspergillus, Penicillium, Fusarium,
banyak Hyphomycetes lainnya dapat hidup pada kelembapan nisbi yang lebih
rendah, yaitu 80%. Dengan mengetahui sifat-sifat fungi ini penyimpanan bahan
pangan dan materi lainnya dapat mencegah kerusakannya.

12
c. Suhu

Berdasarkan kisaran suhu lingkungan yang baik untuk pertumbuhan, fungi

dapat dikelompokkan sebagai fungi psikrofil, mesofil, dan termofil. Secara umum
pertumbuhan untuk kebanyakan fungi adalah sekitar 25 – 30 0C. Beberapa jenis
fungi bersifat psikrotrofik yakni dapat tumbuh baik pada suhu lemari es dan ada
fungi yang masih bisa tumbuh secara lambat pada suhu dibawah suhu pembekuan,
misalnya -5 0C sampai -10 0C. Selain itu, ada jamur yang bersifat termofilik
yakni mampu tumbuh pada suhu tinggi.km Mengetahui kisaran suhu pertumbuhan
suatu fungi adalah sangat penting, terutama bila isolat-isolat tertentu atau
termotoleran dapat memberikan produk yang optimal meskipun terjadi
peningkatan suhu, karena metabolisme funginya.

d. Derajat keasaman (pH)

pH substrat sangat penting untuk pertumbuhan fungi , karena enzim-enzim

tertentu hanya akan mengurai suatu substrat sesuai dengan aktivitasnya pada pH
tertentu. Umumnya fungi menyenangi pH dibawah 7,0. Namun beberapa jenis
khamir tertentu bahkan dapat tumbuh pada pH yang cukup rendah, yaitu pH 4,5 –
5,5.

e. Senyawa kimia

Selama pertumbuhannya fungi menghasilkan senyawa-senyawa yang tidak

diperlukannya lagi dan dikeluarkan ke lingkungan. Senyawa-senyawa tersebut
merupakan suatu pengamanan bagi dirinya terhadap serangan oleh organisme lain
termasuk terhadap sesama mikroorganisme.

13
 DAFTAR PUSTAKA

Buckle,KH,KH, Edward, Gh Pleat, dan M.Muchtar . 1985. Ilmu Pangan. Universitas

Indonesia Press : Jakarta

Dwidjoseputro, D.1978. Pengantar Mikologi. Bandung: Penerbit Alumni.

Dwidjosaputro. 2005. Dasar-dasar Mikrobiologi. Jakarta:Djambatan

Handayani,Sugyo. 2006. Mikrobiologi. Rajawali Press : Jakarta.

Kimball,J. 1992. Biologi Edisi Keempat. Erlangga : Jakarta.

Kurniawati. 2010. Mikrobiolohi Umum. Erlangga : Jakarta.

14
15